Как делают анализ на кортизол слюны. Свободный кортизол в суточной моче или слюне

Оценка состояния надпочечниковых желез

Общая характеристика

Слюна содержит свободный, стабильный кортизол, уровень которого не зависит от содержания кортизол-связывающего глобулина, так как из кровотока пассивная диффузия липофильных молекул стероидов происходит через барьеры липофильных слоев капилляров и эпителиальных клеток слюнных желез быстрее, чем гидрофильных молекул пептидов. Однонаправленность изменения концентрации кортизола в крови и в слюне как при нормальном циркадном ритме секреции (пик в 7-9 часов утра, уровень минимален в полночь), так и при его нарушении (гипокортицизм, эндогенный гиперкортицизм) позволяет использовать данное исследование как скрининг на гиперкортицизм (дважды исследуется кортизол в слюне в 23-24.00 в разные дни) и мониторинг гормонзаместительной терапии гидрокортизоном при гипокортицизме (до приема препарата per os, через 2, 4 и 6 часов после или утром, пиковый уровень после приема и уровни понижения перед дальнейшими приемами гидрокортизона). Преимущества методики определения свободного кортизола в слюне (в отличие от исследований свободного кортизола в суточной моче, АКТГ и кортизола в крови) - биоматериал стабилен (при комнатной температуре сохраняется до 7 суток), забор биоматериала безболезненный, неинвазивный, нетрудоемкий, не затратный по времени, не нужны: участие среднего медперсонала, госпитализация, фармакологическое воздействие.

Показания для назначения

1. Эндогенный гиперкортицизм (обусловленный как повышенной секрецией АКТГ опухолью гипофиза, АКТГ-продуцирующей карциноидной опухолью любой локализации, так и первичной патологией надпочечников. Скрининг в следующих группах:- Пациенты с нехарактерными для их возраста проявлениями (например остеопороз, артериальная гипертензия в молодом возрасте);- Пациенты с клиническими проявлениями гиперкортицизма; - Дети с отставанием в росте и увеличением веса (! патогномоничность сочетания симптомов); - Пациенты с инциденталомами надпочечников. 2. Гипокортицизм - мониторинг гормонзаместительной терапии таблетированными формами гидрокортизона. (! Диагностический тест первого ряда для первичной надпочечниковой недостаточности-уровень кортизола в сыворотке (снижен) и АКТГ в плазме крови (повышен).

Маркер

Маркер нарушений регулирующей функции гипофиза и глюкокортикоид-синтезирующей функции надпочечников.

Клиническая значимость

1. Скрининг на гиперкортицизм 2. Мониторинг гормонозаместительной терапии гидрокортизоном при гипокортицизме

Состав показателей:

Кортизол (в слюне)

Метод : Твердофазный иммуноферментный анализ
Диапазон измерений : 0,2-3750,0
Единица измерения : Нанограмм на миллилитр

Референтные значения:

Комментарии

Выполнение возможно на биоматериалах:

Биологический материал

Условия доставки

Контейнер

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Контейнер Sarstedt Cortisol-Salivette

5 Миллилитров

Правила подготовки пациента

У детей рекомендуется собирать слюну данным способом с 5-летнего возраста (для предотвращения проглатывания тампона). Слюна собирается в специальный контейнер (время забора указывает врач) - Sarstedt Cortisol-Salivette. В слюне не должно быть крови (не проводить исследование при обострении заболеваний полости рта,не проводить чистку зубов щеткой или нитью, не употреблять пищу и напитки перед сбором образца слюны в течение 30 минут). Необходимо удалить помаду или бальзам для губ. В течение 1 часа перед сбором образца пациент должен быть в спокойном состоянии (физическая активность или эмоциональное возбуждение повышают уровень кортизола). Не курить, не жевать табак. За сутки перед исследованием необходимо воздержаться от употребления алкоголя, солодки. Несоблюдение условий подготовки искажает результат.

Интерференция:

• Использование глюкокортикоидов как перорально, так и ректально, ингаляционно, иньекционно, местно - в том числе в виде кожных кремов, травяных лекарств, "тоников" с отбеливающими агентами, внутрисуставных и невральных иньекций, а также - применения меге

Интерпретация:

• Скрининг на гиперкортицизм - ночной кортизол в слюне (два измерения 23.00-24.00 в разные дни): 1. Результаты в норме, при этом а) клинически высокая степень вероятности синдрома - показано выполнение еще одного метода (определение уровня свободного кортизола в суточной моче; малая проба с дексаметазоном (определение уровня кортизола в крови утром после приема 1 мг дексаметазона накануне в 23:00), длинный тест с дексаметазоном (2 мг в день в течение 48 ч) .б) клинически малая степень вероятности синдрома - дальнейшая диагностика не показана, предлагается повторное обследование через 6 месяцев при прогрессировании симптомов.2. Один аномальный результат - показано выполнение еще одного метода (определение уровня свободного кортизола в суточной моче; малая проба с дексаметазоном (определение уровня кортизола в крови утром после приема 1 мг дексаметазона накануне в 23:00), длинный тест с дексаметазоном (2 мг в день в течение 48 ч). .
• Мониторинг гормонзаместительной терапии гидрокортизоном при гипокортицизме (до приема препарата per os, через 2, 4 и 6ч после или утром, пиковый уровень после приема препарата и уровни снижения перед последующими принимаемыми дозами), позволяет индивидуал

Free cortisol (saliva)

Кортизол — стероидный гормон, синтезируется в пучковой зоне коры надпочечников из общего предшественника холестерина под контролем АКТГ. Взаимодействие в системе «гипоталамус — гипофиз — надпочечники» осуществляется по классическому принципу отрицательной обратной связи. АКТГ повышает секрецию кортизола, повышенный уровень кортизола блокирует секрецию АКТГ. Кора надпочечников секретирует кортизол в свободной форме, попадая в кровоток, кортизол связывается с белками плазмы крови, более 90% кортизола связывается со специфическим транспортным белком — транскортином (КСГ) и в небольшом количестве — с альбумином. В связанном состоянии кортизол теряет биологическую активность, и лишь свободный кортизол обеспечивает его эффект на ткани-мишени. Метаболизируется в печени, фильтруется в почечных клубочках, и выделятся с мочой в свободной форме. Период полувыведения — 80-100 минут. Кортизол играет важную роль в метаболизме глюкозы, поддержании сосудистого тонуса, регуляции иммунного ответа, и в реакции организма на стресс.

Концентрация АКТГ и кортизола в плазме имеет чёткий суточный ритм: пик концентрации АКТГ отмечается между 4 и 6 часами утра, максимальный уровень кортизола — в 8 часов утра, минимальный — в вечернее время (23 часа).

У здоровых людей перепад между концентрацией кортизола в утренние и дневные часы достигает 50%, а между утренней и вечерней — 350%.

Секреция кортизола мало меняется с возрастом. Суточный ритм секреции АКТГ и кортизола формируется у детей к 6-12 месяцам жизни и чётко устанавливается только после 3 лет жизни. У старших детей и взрослых индивидуальный суточный ритм секреции АКТГ и кортизола достаточно устойчив и меняется при смене часового пояса только через 15-20 дней.

Определение свободного биологически активного кортизола в слюне

Клеточная мембрана (барьер) слюнных желез, не пропускает в слюнные протоки биологические молекулы с МВ > 400 Да. Молекулярный вес всех стероидов < 400 Да, и в результате только свободные формы стероидов проникают в слюнной проток (кортизол, тестостерон, эстрадиол и др.), а гормоны, связанные с альбумином или глобулинами, транспортными белками стероидов, не проникают.

Уровень кортизола в слюне не зависит от объёма и скорости ее выделения, что имеет принципиальное значение при интерпретации результатов.

При синдроме эндогенного гиперкортицизма нарушен суточный ритм секреции кортизола и пациенты с синдромом Иценко-Кушинга имеют высокий уровень гормона плазмы в вечерние часы, который коррелирует с уровнем гормона в слюне. Поэтому определение кортизола в слюне в 23 часа является удобным и эффективным тестом скрининга у пациентов с подозрением на эндогенный гиперкортицизм. Чувствительность — 92-100%, специфичность — 93-100%. Рекомендуется двукратное определение. В норме уровни кортизола в слюне в 23-24 ч не превышают 145 нг/дл (4 нмоль/л).

Возможен мониторинг терапии надпочечниковой недостаточности производными гидрокортизона.

Показатель

Характеристика

Анализатор и тест - система

EUROIMMUN (Германия)

Референтные значения, нг/мл
Дети: до 4 дней жизни: до 0,95; 4-6 дней жизни: 1,3-3,02; 6-8 дней жизни: 2,07-5,05; 8-10 дней жизни: 1,04-4,78; 10-12 дней жизни: 0,49-1,83; 12-14 дней жизни: 0,46-1,26; 14-16 дней жизни: 0,55-1,23; 16-18 дней жизни: 0,13-1,15; 18-20 дней жизни: 0,03-1,15; 20-22 дня жизни: 0,18-0,72; 22-24 дня жизни: 0,06-0,96.
Взрослые: 0,2-4,4

Активный стероидный гормон, вырабатываемый корой надпочечников, это кортизол. Он играет важную роль в человеческом организме, отвечает за стрессовое состояние, регулирует иммунную систему и участвует в реакциях с глюкозой. В организме он присутствует в нескольких формах:

• Совместно с эритроцитами.
• В виде коньюгатов с протеинами.
• А также в свободном виде, где его действие выражается в активной форме.

В основные функции кортизола входит его участие в энергетическом обмене, метаболизме жиров, белков и углеводов, а также регулировании водно-солевого обмена. Благодаря его активному участию, в организме вырабатываются защитные свойства организма на внешние раздражители, то есть стрессовые состояния.

Кортизол влияет на иммунную систему, блокируя аллергию. Искусственные препараты на основе этого гомона способны снять гиперчувствительные реакции, блокируют проявления анафилактического шока, помогают снизить воспалительные процессы, что важно при терапии, аутоиммунных заболеваний. Нормальное количество кортизола у здорового человека оказывает положительное влияние на биоритмы.

Так как кортизол играет значительную роль в жизнедеятельности организма, то для подтверждения достоверности заболевания берется анализ слюны пациента. Повышение уровня кортизола может быть следствием развития таких заболеваний:

• Образование опухолей в надпочечниках.
• Развития синдрома Иценко-Кушинга, болезни Аддисона.
• Недостаточной выработке адренокортикотропного гормона.
• Пониженный уровень кортзола достаточно часто становится причиной развития остеопроза.

Для исследования кортизола в слюне, прежде всего, требуется незначительная подготовка. Процедура взятия анализа достаточно проста, для пациента и врача, и не представляет особых сложностей. Однако примерно за три-четыре недели перед прохождением процедуры, нужно предупредить врача о проведении медикаментозной терапии, желательно ее прекращение.

За сутки исключить из своего меню жирную и острую пищу, а также прием алкогольных напитков. За несколько часов перед сбором слюны запрещается чистка зубов, прием пищи, курение и питье, также не следует пользоваться освежающими пастилками для полости рта. Не соблюдение этих рекомендаций приведет к неточным показателям истинной картины заболевания.

Как правило, забор слюны проводится в период наиболее низкой концентрации кортизола, это с 11 и до 12 часов вечера. Для этого используется тампон и специальная емкость, в которую помещается биоматериал, и указывается точное время. Обычно проведения процедуры делается в течение двух дней, это позволяет наиболее получить наиболее точные результаты.

Забор слюны для анализа на кортизол.

Глюкокортикоидный гормон коры надпочечников, биологически активная фракция которого определяется в слюне.

Синонимы русские

Свободный гидрокортизон.

Синонимы английские

Salivary Cortisol (hydrocortisone, Compound F).

Метод исследования

Электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ECLIA).

Единицы измерения

Нмоль/л (наномоль на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
• Не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 3 часов до исследования.
• Не чистить зубы, не использовать зубочистки, зубные нити, исключить манипуляции, травмирующие слизистую оболочку ротовой полости, в течение 3 часов до сбора биоматериала. Перед сбором биоматериала убедиться, что отсутствуют кровоточивость десен и травмы слизистой оболочки ротовой полости.
• При отсутствии особых указаний врача сбор биоматериала производить вечером между 22 и 24 часами, оптимально - в 23 часа.

Общая информация об исследовании

Кортизол - липофильный стероидный гормон с небольшой молекулярной массой, который синтезируется в коре надпочечников. Он является главным глюкокортикоидным гормоном и участвует в регуляции ответа организма на стресс, поддержании артериального давления, обмене белков, жиров и углеводов. Кортизол влияет на иммунную систему и воспалительные реакции в организме, стимулирует секрецию соляной кислоты в желудке. Выделение кортизола регулируется адренокортикотропным гормоном (АКТГ), который вырабатывается в гипофизе. Концентрация АКТГ и кортизола в крови регулируется по принципу отрицательной обратной связи: уменьшение количества кортизола повышает выработку АКТГ, в результате чего стимулируется производство кортизола до нормализации его уровня. Повышение концентрации кортизола в крови, напротив, приводит к уменьшению выработки АКТГ и, соответственно, уменьшению количества кортизола.

В крови 1-15% от общего количества гормона находится в несвязанном состоянии и является его биологически активной формой. Остальное количество кортизола циркулирует в крови в комплексе со специфическими связывающими белками. Свободный кортизол способен проникать из сыворотки крови в слюну и другие жидкости путем пассивной диффузии, поэтому его уровень в слюне отражает количество биологически активной и значимой его фракции. Концентрация свободного кортизола в слюне может меняться при усилении или снижении выделения как самого кортизола в надпочечниках, так и АКТГ в гипофизе. Уровень гормона в слюне не зависит от ферментов и интенсивности слюновыделения. Во время проникновения в слюнные железы кортизол частично превращается в кортизон, поэтому его уровень в слюне на 10-35% меньше, чем в крови. Существует экспериментально доказанная корреляция между концентрацией кортизола в сыворотке и слюне. Изменения концентраций кортизола в данных биологических жидкостях происходят синхронно. Увеличение уровня кортизола в слюне отмечается через 1 минуту после его повышения в крови, а при достижении пиковой концентрации в сыворотке максимальное содержание гормона в слюне определяется через 2-3 минуты. Кортизол выделяется надпочечниками циркадно с максимальной концентрацией ранним утром и самыми низкими показателями ночью. При стрессе уровень гормона повышается в независимости от циркадных ритмов.

Кортизол в слюне является идеальным показателем для оценки острого ответа на стресс. Повторные анализы позволяют оценить базальный уровень гормона, его суточные колебания и изменения при пробуждении, стрессовой реактивности. Повышенная продукция кортизола связана с синдромом Кушинга, опухолями надпочечников. Снижение уровня кортизола отмечается при недостаточности надпочечников (болезни Аддисона) и дефиците АКТГ. Недостаток кортизола может сопровождаться похудением, мышечной слабостью, усталостью, снижением артериального давления, болью в животе. При сочетании сниженной продукции кортизола и сильного стресса иногда развивается адреналовый криз, который требует экстренной медицинской помощи. Избыток кортизола приводит к повышению артериального давления, повышению уровня сахара крови, ожирению, истончению кожи и появлению растяжек (стрий) на боковых поверхностях живота.

Исследование кортизола в слюне является неинвазивным диагностическим методом, который при соблюдении правил взятия материала обладает высокой информативностью и удобством в применении.

Для чего используется исследование?

• Оценка базального уровня кортизола и его суточных колебаний;
• диагностика патологии гипоталамо-гипофизарно-надпочичниковой системы;
• диагностика недостаточности или гиперфункции коры надпочечников;
• оценка острой реакции организма на стресс.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на болезнь или синдром Иценко - Кушинга (лунообразное лицо, повышение артериального давления, ожирение, дистрофия мышц, растяжки на животе);
• при подозрении на болезнь Аддисона (слабость, усталость, пониженное артериальное давление, пигментация кожи);
• при мониторинге лечения заболеваний надпочечников;
• при выполнении дексаметазонового теста;
• при оценке реакции организма на стресс.

Что означают результаты?

Референсные значения

Для проб, взятых до полудня:

для проб, взятых после полудня:

Причины повышения:

• болезнь Кушинга (аденома гипофиза, новообразования гипоталамуса);
• синдром Кушинга (новообразования надпочечников, гиперплазия коры надпочечников);
• АКТГ-секретирующие опухоли других органов (яичек, бронхов, яичников);
• гипертиреоз;
• стресс (травмы, операции, ожоги);
• интенсивные физические нагрузки;
• ожирение;
• беременность.

Причины понижения:

• болезнь Аддисона (недостаточность коры надпочечников);
• гипопитуитаризм (сниженная секреция гормонов в гипофизе, в том числе АКТГ);
• синдром Шихана (послеродовой некроз гипофиза);
• туберкулез надпочечников;
• гипотиреоз;
• длительный прием кортикостероидов (дексаметазона, преднизолона), вызванный системными заболеваниями соединительной ткани, бронхиальной астмой.

Что может влиять на результат?

Ложно высокий уровень кортизола может быть получен при низком рН (менее 4) слюны, например при стимуляции слюноотделения кристаллами витамина С или употреблении фруктовых соков непосредственно перед сдачей биоматериала.

Повышают уровень кортизола в слюне:

• преднизолон, ингаляционные стероиды (в связи с перекрестной реактивностью с диагностической антисывороткой);
• беременность;
• стресс;
• алкоголь, никотин;
• лекарственные препараты: амфетамины, верошпирон, оральные контрацептивы, соли лития.

Снижают уровень кортизола в слюне:

• дексаметазон (вследствие угнетения гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси);
• андрогены, барбитураты, леводопа, фенитоин;
• обильное питье в течение 10 минут до сдачи биоматериала.

Важные замечания

• При оценке результатов необходимо учитывать суточные колебания уровня кортизола и влияние стрессовых факторов на его секрецию. Рекомендовано повторять исследование в разное время суток с интервалом в несколько дней для адекватной трактовки результатов.

Адренокортикотропный гормон (АКТГ)

Альдостерон

Кортизол

Свободный кортизол в моче

Дегидроэпиандростерон-сульфат (ДЭА-SO4)

17-гидроксипрогестерон (17-ОПГ)

Кто назначает исследование?

Эндокринолог, терапевт, врач общей практики, кардиолог, педиатр.

Литература

1. Dorn, L.D., Lucke, J.F., Loucks, T.L., Berga, S.L. (2007). Salivary cortisol reflects serum cortisol: analysis of circadian profiles. Ann Clin Biochem, 44(pt 3), 281-84.
2. Nicolson, Nancy A. (2008). In L.J. Luecken and L.C. Gallo. Measurement of Cortisol. In: Handbook of Psychological Research Methods in Health Psychology. Sage Publications. pp. 37–74.
3. Wilson D. McGraw-Hill Manual of Laboratory and Diagnostic Tests 1st Ed Normal, Illinois, 2007.