Подготовка пробы биологического материала для пцр. Способы взятия биоматериала для исследований методом пцр

    Отбор клинического материала осуществляет медицинский персонал с соблюдением правил противоэпидемического режима, только стерильными одноразовыми инструментариями (шприцы, соответствующие зонды, цитощеточки и пр.), в одноразовых перчатках.

    Максимально полно собрать материал из выбранного локуса, используя подходящие для этого аппликаторы – зонды, цитощетки (обеспечить адекватность клинического образца).

    Сохранить полученный материал (ДНК/РНК микроорганизмов), используя надежные транспортные среды и консерванты, предоставляемые ПЦР-лабораторией. Среда для транспортировки и хранения клинического материала обеспечивает стабильность РНК и ДНК при комнатной температуре до 28 дней.

    Поместить взятый материал в вакуэты с ЭДТА (кровь), в одноразовые химически чистые пробирки «Эппендорф» (мазки, ликвор, биоптат и др.). Основным условием при сборе материала является предотвращение попадания в пробу ДНК-аз и рибонуклеаз, т.к. рибонуклеазы и ДНК-азы – ферменты деградации РНК и ДНК. Они чрезвычайно стабильны в окружающей среде, выдерживают длительное кипячение. Основной источник нуклеаз – кожные покровы, частицы пыли. Пластиковые пробирки и наконечники должны иметь маркировку «DNase, RNase- free» (свободные от нуклеаз).

    Сразу после забора плотно закрывать пробирки, флаконы с клиническим материалом, не касаясь их внутренней поверхности и внутренней поверхности крышек.

    При работе с клиническим материалом, открывая пробирки, флаконы, не производить резких движений и не допускать разбрызгивания и расплескивания, что может привести к контаминации проб и рабочих поверхностей.

    Для исключения взаимной контаминации образцы хранить и транспортировать в отдельном полиэтиленовом пакете или штативах. При необходимости переноса образца использовать автоматические микропипетки со сменными одноразовыми наконечниками с аэрозольными барьерами.

    До транспортировки в ПЦР-лабораторию отобранный биоматериал хранить при температуре 2–4 °С не более 48 часов. Необходимо минимизировать время от забора образца до постановки ПЦР-анализа. Транспортировка образцов осуществляется в сумках-холодильниках, термоконтейнерах, термосах с термопакетами, льдом или сухим льдом.

Кровь, плазма, сыворотка

Забор крови рекомендуется проводить с использованием вакуумных систем. Внедрение таких систем позволяет стандартизировать манипуляции с кровью, положительно сказывается на всех этапах лабораторного исследования и в целом переводит работу лаборатории на иной, более высокий уровень качества. Их использование гарантирует защиту персонала от инфицирования, сокращается время, затрачиваемое на процедуру забора крови, значительно реже сопровождается гемолизом, позволяет сохранить стерильность проб крови и герметично транспортировать.

Венепункцию рекомендуется выполнять натощак из локтевой вены в специальную вакуумную пробирку с антикоагулянтом, после чего пробирка переворачивается для перемешивания несколько раз. Пробирки с кровью хранят в холодильнике при +4 °С – +8 °С. Максимальный срок хранения крови – 1 сутки (не замораживать!). В случае необходимости длительного хранения необходимо отобрать 1 мл сыворотки или плазмы крови и хранить ее при температуре -16 о -20 о С не более 2 недель.

Характеристика вакуумных систем, используемых для ПЦР-диагностики:

    Вакуэты с ЭДТА (6 %) – используются для проведения качественных и количественных исследований. ЭДТА-антикоагулянт хорошо фиксирует нуклеиновые кислоты клетки.

    Вакуэты с цитратом натрия (3,8 %) – используются для проведения качественных и количественных исследований. Не подходят для длительной транспортировки, т.к. цитрат является хорошей питательной средой для посторонней микрофлоры.

    Вакуэты без антикоагулянтов (сыворотка крови) – используются для проведения качественных исследований. Использования сыворотки крови для количественных исследований нежелательно, т.к. часть инфекционного агента оседает в сгустке крови, при этом снижается возможность определения количественного содержания его в крови.

    Вакуэты с гепарином - категорически не подходят для ПЦР - реакции. Гепарин является полианионом, как и ДНК, поэтому в ПЦР-реакции конкурирует с ДНК.



Оптимальное время исследования крови – в интервале от 1 до 4 часов после взятия.В промежутке от 5 до 30 минут происходит временная адаптации тромбоцитов к антикоагулянту и их агрегация, что может привести к их ложному снижению в пробе крови.

Нежелательно исследовать кровь позднее 8 часов после взятия, т.к. изменяются некоторые характеристики клеток: снижается объем лейкоцитов, повышается объем эритроцитов, что в конечном итоге приводит к ошибочным результатам измерения и неправильной интерпретации результатов. Только концентрация гемоглобина и количество тромбоцитов остаются стабильными в течение суток хранения крови.

Кровь нельзя замораживать. Капиллярную кровь с К 2 ЭДТА следует хранить при комнатной температуре и анализировать в течение 4 часов после взятия.

Для обеспечения качественного результата исследований нужно четко контролировать время и условия хранения проб до выполнения анализа.

При необходимости проведения отсроченного анализа (транспортировка на отдаленные расстояния, техническая неполадка прибора и т. д.), пробы крови хранят в холодильнике (4 о – 8 о С) и исследуют в течение 24 часов. Однако при этом следует учитывать, что происходит набухание клеток и изменение параметров, связанных с их объемом. У практически здоровых людей эти изменения не носят критического характера и не сказываются на количественных параметрах, но при наличии патологических клеток, последние могут изменяться или даже разрушаться в течение нескольких часов с момента взятия крови.

Непосредственно перед исследованием кровь должна быть тщательно перемешана в течение нескольких минут для разведения антикоагулянта и равномерного распределения форменных элементов в плазме. Длительное постоянное перемешивание образцов до момента их исследований не рекомендуется вследствие возможного травмирования и распада патологических клеток.

Исследование крови на автоматическом анализаторе проводится при комнатной температуре. Кровь, хранившуюся в холодильнике, необходимо вначале согреть до комнатной температуры, так как при низкой температуре увеличивается вязкость крови, и форменные элементы имеют тенденцию к склеиванию, что в свою очередь, приводит к нарушению перемешивания и неполному лизису. Исследование холодной крови может быть причиной появления «сигналов тревоги» вследствие компрессии лейкоцитарной гистограммы.

При выполнении гематологических исследований на значительном удалении от места взятия крови неизбежно возникают проблемы, связанные с неблагоприятными условиями транспортировки. Воздействие механических факторов (тряска, вибрация, перемешивание и т.д.), температурного режима, вероятность пролива и загрязнения проб могут оказывать влияние на качество анализов. Для устранения этих причин при перевозках пробирок с кровью рекомендуется использовать герметично закрытые пластиковые пробирки и специальные транспортные изотермические контейнеры. Во время транспортировки не допускается контакт образца (с нативным материалом) и бланка-направления, в соответствии с правилами биологической безопасности.

^ 4.3. Прием и регистрация биологического материала

Пробирки с образцами венозной крови доставляют в лабораторию в день взятия в в штативах в специальных сумках-саквояжах для доставки биологического материала, в которых пробирки должны находиться в вертикальном положении, а при транспортировке на удаленное расстояние - в специальных контейнерах.

Сотрудник лаборатории, принимающий материал, должен проверить:

Правильность оформления направления: в бланке–направлении указываются данные обследуемого (фамилия, имя и отчество, возраст, № истории болезни или амбулаторной карты, отделение, диагноз, проведенная терапия);

Маркировку пробирок с образцами крови (на них должны быть нанесены код или фамилия больного, идентичные коду и фамилии в бланке направления материала для исследования). Лаборант должензарегистрировать доставленный материал, отметить количество пробирок.

^ 4.4 Подсчет клеточного состава крови на гематологическом анализаторе

Подсчет клеточного состава крови на гематологическом анализаторе должен проводиться в строгом соответствии с инструкцией к прибору.

При работе на гематологическом анализаторе следует:

Использовать кровь, стабилизированную К- 2 ЭДТА в рекомендованной пропорции для конкретной соли и одноразовые пробирки для гематологических исследований (простых или вакуумных);

Перед анализом осторожно, но тщательно перемешать пробирку с кровью (рекомендуется для этой цели использовать устройство для перемешивания образцов крови - ротомикс);

Использовать реактивы, зарегистрированные в установленном порядке; при смене реактивов на продукцию другого производителя следует проверить и установить калибровку прибора;

Запускать прибор, соблюдая все стадии промывки, добиваясь нулевых (фоновых) значений показателей по всем каналам;

Обращать внимание на сообщения прибора о вероятных систематических ошибках: помнить, что увеличение МСНС выше нормальных значений, как правило, результат ошибки измерения;

При выявлении ошибки обязательно устранить причину, не работать на неисправном приборе;

Выполнять процедуру контроля качества по соответствующей программе. с оценкой полученного результата;

Работать осмысленно, сопоставляя получаемые результаты с клинической характеристикой проб больного;

После окончания измерений тщательно промыть анализатор;

При остановке прибора на длительный срок обязательно выполнить все процедуры консервации (по возможности совместно с сервис-инженером);

При возникновении технических проблем следует воспользоваться помощью сервис-инженера фирмы, имеющей лицензию на техническое обслуживание; не доверять работу необученному персоналу.

Приступая к работе на гематологическом анализаторе, следует учесть границы линейности измерения анализируемых параметров. Оценка проб со значениями анализируемых параметров, превышающих границу линейности измерения, может привести к ошибочным результатам. В большинстве случаев при анализе проб с гиперцитозами анализатор вместо значения измеряемого параметра выдает значок "D" (dilute), что указывает на необходимость разведения пробы и повторного измерения. Разведение необходимо проводить до тех пор, пока не будут получены схожие итоговые результаты при двух ближайших разведениях.

^ П р и м е р ─ Анализ пробы больного с гиперлейкоцитозом на трех различных гематологических анализаторах представлен в таблице.

Таблица 3

¦Результаты подсчета количества при гиперлейкоцитозе, выполненные на трех различных гематологических анализаторах


^ Гематологические анализаторы

Степень разведения пробы

Итоговое значение

^ Цельная кровь

1:1

1:3

1:4

WBC

1

D

274,5

274,5

143,1

715,5

2

322,6

253,2

177,7

141,8

709,0

3

D

D

168,3

139,1

695,5

Из таблицы видно, что при анализе цельной крови только один анализатор (2-й) дал цифровое значение количества лейкоцитов, два других указали на необходимость разведения пробы. Последующее поэтапное измерение пробы в трех разведениях позволило добиться близких конечных результатов на всех приборах только при разведении 1:3 и 1:4. Таким образом, итоговое количество лейкоцитов составило 700,0 - 710,0 x 10 9 /л, что более чем в 2 раза превышает первоначальное значение, полученное в цельной крови на 2-м анализаторе и в 1,5 - при разведении 1:1 на 1-м и 2-м анализаторах.

  1. ^ Калибровка гематологических анализаторов
Под калибровкой понимается процедура настройки анализатора, в результате

Которой достигается равенство нулю систематической составляющей погрешности (нулевое смещение) или подтверждается, что смещение равно нулю с учетом погрешности калибровки. Калибровка гематологических анализаторов может быть выполнена двумя основными способами:

По цельной крови;

По образцам стабилизированной крови с аттестованными значениями.

^ 5.1 Калибровка по цельной крови

Калибровка по цельной крови может быть выполнена путем сравнения с референтным анализатором, калибровка которого верифицирована и может быть принята за исходную.

Для калибровки путем сравнения с референтным анализатором используется 20 образцов венозной крови пациентов, выбранных произвольно из дневной программы исследований лаборатории, располагающей референтным анализатором. Кровь должна быть взята в вакуумные пробирки с антикоагулянтом К 2 ЭДТА. После анализа на референтном анализаторе пробирки с кровью доставляются лабораторию для анализа на калибруемом приборе. Время между измерениями на референтном и калибруемом анализаторе не должно превышать 4 часа. Анализ калибровочных проб на калибруемом приборе должен выполняться таким же способом, как и анализ проб пациентов. Полученные результаты заносятся в таблицу по форме, приведенной в Приложении 1. Данные результаты используются для определения соответствующих калибровочных факторов, которые численно равны коэффициентам наклона калибровочных прямых, проходящих на графике через начало координат.

Калибровочные факторы рассчитываются на компьютере с использованием программы EXCEL, входящей в состав пакета Microsoft OFFICE любой версии. Для расчета калибровочных факторов в данной программе строится точечная диаграмма, где по оси Х откладываются измеренные значения, по оси Y – референтные, задается линия регрессии через начало координат. Программа рисует калибровочную прямую и определяет ее наклон, который и является искомым калибровочным фактором. При выявлении грубых ошибок – точек значительно отстоящих на графике от калибровочной прямой, их необходимо удалить из расчета (стереть всю строку в таблице EXCEL). Полученный калибровочный фактор заносится в таблицу Приложения 1 и используется для ручной корректировки калибровки прибора в соответствие с его инструкцией по эксплуатации.


    1. ^ Калибровка по образцам стабилизированной крови с аттестованными значениями
Данный способ калибровки базируется на коммерческих калибровочных и контрольных материалах, представляющих собой искусственную смесь стабилизированных человеческих эритроцитов и фиксированных клеток человека или животных, имитирующих лейкоциты и тромбоциты. Ввиду существенного отличия биологических свойств компонентов данных материалов от натуральной крови аттестованные значения гематологических параметров зависят от конкретного типа анализатора.

Во всех случаях, когда возможно, следует использовать калибраторы, специально предназначенные изготовителем для калибровки конкретного типа анализатора. Погрешности установленных значений в современных гематологических калибраторах в основном соответствуют медицинским требованиям. Однако не для всех типов анализаторов такие калибраторы имеются. Кроме того, ввиду ограниченного срока сохранности (как правило, не более 45 дней) не всегда имеется возможность получать непросроченные образцы.

Контрольные материалы не предназначены изготовителем для целей калибровки: допуски для значений значительно шире, методы аттестации и производственного контроля не такие строгие как для калибраторов. При проведении калибровки, контрольные материалы могут быть использованы лишь как один из источников информации о метрологических свойствах прибора.

Следует, однако, иметь ввиду, что при использовании для целей калибровки как контрольных материалов, так и калибраторов, особенности пробоподготовки и эксплуатации анализаторов оказывают существенное влияние на составляющие систематической погрешности. Данные влияющие факторы не могут быть учтены при калибровке коммерческими материалами. Вследствие этого, во всех случаях, проведенная калибровка должна быть верифицирована путем анализа статистики получаемых результатов в пробах пациентов (эритроцитарные индексы, интервалы нормальных значений).

5.2.1 Периодичность калибровки гематологических анализаторов

Требования к периодичности калибровки обычно содержатся в инструкции по эксплуатации анализатора. Как правило, калибровка требуется после ремонта или в случае выявления значимого дрейфа в процедурах внутрилабораторного контроля качества.

5.2.2 Процедура калибровки

Процедура калибровки выполняется в соответствии с инструкцией по эксплуатации анализатора.

5.2.3 Контроль результата калибровки

Данный контроль заключается в анализе калибровочного образца сразу после выполнения калибровки. Выполненная калибровка принимается, если результаты анализа соответствуют калибровочным значениям с учетом аналитической вариации анализатора.

5.2.4 Верификация калибровки с помощью эритроцитарных индексов

В этом способе проверки и уточнения калибровки используется тот факт, что средние значения эритроцитарных индексов – МСНС, МСН и MCV по пациентам имеют довольно малую вариацию и поэтому могут эффективно использоваться для контроля калибровки и дальнейшего контроля качества. Рекомендуемое число проб для усреднения равняется 20. Для определения среднего значения МСНС могут быть использованы любые пробы пациентов, в то время, как для определения средних МСН и MCV следует исключать пациентов с анемиями.

Многие современные гематологические анализаторы имеют встроенные программы расчета текущих средних, что значительно облегчает обработку данных.

Целевые значения эритроцитарных индексов при усреднении по 20 пробам пациентов в возрасте от 18 до 60 лет независимо от пола приведены в таблице 4.

Таблица 4

Целевые значения эритроцитарных индексов

Если полученные средние значения вышли за контрольный допуск, то это означает, что калибровка MCV или Hgb или RBC нуждается в корректировки.

При выяснении причин неудовлетворительной калибровки по результатам исследования эритроцитарных параметров при использовании коммерческих калибровочных/контрольных материалов следует принимать во внимание следующую оценку надежности аттестованных значений материалов:

Наиболее точным и стабильным во времени параметром является концентрация эритроцитов;

Стабильным параметром является Hgb, но он может зависеть от применяемых реактивов (например, циановые или бесциановые);

Самым нестабильным параметром является MCV. Значение MCV имеет тенденцию к изменению в течение всего срока годности материала в довольно широком интервале значений. При уточнении калибровки по MCV данные, полученные из анализа средних по эритроцитарным индексам, имеют приоритет над аттестованными значениями в образцах стабилизированной крови.

Считая калибровку по RBC правильной, в таблице 5 указаны возможные причины выхода средних значений индексов за контрольный допуск.

Таблица 5

Причины выхода за пределы средних значений эритроцитарных индексов


Эритро-цитарные индексы

Среднее значение индекса

Среднее значение индекса

Среднее значение индекса

Среднее значение индекса

MCHC

Ниже границы

Выше границы

Выше границы

Ниже границы

MCH

В границах допуска

В границах допуска

Выше границы

Ниже границы

MCV

Выше границы

Ниже границы

В границах допуска

В границах допуска

Причина

Завышен MCV

Занижен MCV

Завышен Hgb

Занижен Hgb
Решение о необходимости исследовать ту или иную локализацию (влагалище, уретра, цервикальный канал и др.) для анализа принимает лечащий врач на основании совокупности жалоб пациентки (та) и клинической картины заболевания.Для получения объективного результата необходимо, чтобы исследуемый клинический материал содержал возможно большее количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи и примеси крови (допустимо умеренное присутствие примесей в виде крови и слизи). Неправильное взятие биоматериала может привести к невозможности получения достоверного результата и, вследствие этого, необходимости повторного взятия биоматериала.

Порядок взятия клинического материала в пробирку с транспортной средой:

1. Открыть крышку пробирки.

2. С помощью одноразового стерильного зонда получить отделяемое соответствующего

биотопа (влагалище, уретра, цервикальный канал).

3.Перенести зонд с клиническим материалом в пробирку с транспортной средой объемом 1,5 мл, когда зонд упрется в дно пробирки, дополнительным усилием согнуть тонкую часть зонда до насечки, затем отломить и оставить зонд в пробирке.При необходимости получения клинического материала из нескольких биотопов повторить процедуру, каждый раз забирая клинический материал новым зондом в новую пробирку.

3. Пробирку плотно закрыть крышкой, промаркировать.

Особенности взятия клинического материала цервикального канала:

1.Клинический материал цервикального канала получают после введения во влагалище гинекологического зеркала с помощью уретрального зонда или цервикальной цитощетки (для исследования на ВПЧ необходимо достаточное количество эпителиальных клеток!).

2.Перед взятием клинического материала необходимо тщательно обработать отверстие цервикального канала с помощью стерильного марлевого тампона и затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором.

3.После введения уретрального зонда в шеечный канал на 1,5 см его вращают несколько раз (2-3 полных оборота по часовой стрелке) и извлекают. При извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание стенок влагалища.

4. Полученный клинический материал помещается в пробирку с транспортной средой (см. выше).

Особенности взятия клинического материала из влагалища:

В день обследования женщины не должны проводить туалет половых органов и спринцевание влагалища.

1. Клинический материал из влагалища получают с заднего или боковых сводов с помощью вагинального или уретрального зонда путем соскоба с поверхности эпителия.

2. Клинический материал должен быть получен ДО проведения мануального исследования.

3. Перед манипуляцией гинекологическое зеркало можно смочить теплой водой, применение антисептиков для обработки зеркала противопоказано.

4. У девочек (virgo) клинический материал получают со слизистой оболочки преддверия влагалища без использования гинекологического зеркала.

5. Полученный клинический материал помещается в пробирку с транспортной средой (см. выше).

Особенности взятия клинического материала из уретры у женщин:

1. Клинический материал из уретры получают с помощью уретрального зонда.

2.Перед взятием клинического материала пациентке рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов.

3. При наличии свободных уретральных выделений наружное отверстие уретры следует очистить с помощью ватного тампона.

4. При отсутствии свободных выделений может быть проведен легкий массаж уретры.

5. После введения инструмента в уретру на глубину 1 см необходимо продвигать его к наружному отверстию, слегка нажимая на заднюю и боковые стенки уретры (вращательные движения болезненны).

6. Полученный клинический материал помещается в пробирку с транспортной средой(см. выше).

Для исследования материала,полученного из нескольких биотопов, процедуру повторяют, каждый раз используя новый стерильный зонд и новую пробирку!!!

Недопустимо смешивать материал из цервикального канала, влагалищного содержимого и уретры в одной пробирке!

Особенности взятия клинического материала из уретры у мужчин:

1,5–2 часов. Для исключения искажений результатов определения состава микрофлоры урогенитального тракта мужчин из-за присутствия в урогенитальном тракте транзиторной микрофлоры в течение трёх дней перед взятием биоматериала рекомендуется половое воздержание или использование защищенного полового контакта.

1.Перед взятием соскоба из уретры обрабатывают головку полового члена в области наружного отверстия уретры тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором.

2.Производят массаж уретры. При наличии свободно стекающих из уретры выделений удаляют их сухим тампоном.

3.Вводят зонд в уретру на глубину 1-2 см. Несколькими вращательными движениями производят соскоб эпителиальных клеток и переносят зонд в пробирку с транспортной средой, обламывают и оставляют. Отделяемое забирают в достаточном количестве. Допустимо умеренное присутствие примесей в виде слизи, крови и гноя.

Взятия клинического материала с крайней плоти головки полового члена (ГПЧ):

Перед взятием биоматериала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение

1,5–2 часов.

1.С помощью одноразового зонда делают соскоб эпителиальных клеток из соответствующего биотопа (крайняя плоть головки полового члена, препуциальный мешок) и переносят зонд в пробирку с транспортной средой, обламывают и оставляют.

Условия хранения и транспортировки биоматериала:

1. Пробирки с полученным клиническим материалом должны быть промаркированы.

2. В сопроводительном документе-направлении необходимо указать: ФИО, возраст пациентки (та), клинический материал, предполагаемый диагноз, показания к обследованию, дату и время взятия пробы, наименование учреждения (подразделения), направляющего клинический материал.

3. Если время транспортировки клинического материала от момента взятия до момента его доставки в лабораторию не более суток, то пробирку с клиническим материалом необходимо хранить и доставлять в лабораторию при температуре бытового холодильника (+ 4+10°С), не замораживая.

4. В случае невозможности доставки клинического образца в лабораторию в течение суток, допускается однократное замораживание и хранение образца клинического материала при температуре -20°С до одного месяца.

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

«Нижегородский медицинский колледж»

(ГБОУ СПО НО «НМК»)

Контрольная работа

Тема: «Организация приёма, маркировки и регистрации биоматериала»

Выполнил:

студент группы 221-IV лаб.

Степанычев М.Н.

Преподаватель:

Белова М.Н.

Н. Новгород 2016

Введение

1. Теоретическая часть

1.1 Оформление направлений

1.2 Режимы выполнения лабораторных исследований

1.3 Условия хранения и транспортировки материала для клинических лабораторных исследований

1.4 Область применения

1.5 Организация процесса транспортировки биоматериала курьером и ответственность курьера

1.6 Прием биоматериала в лаборатории

1.7 Передача биоматериала и направлений в соответствующие подразделения лаборатории

1.8 Регистрация бланков-заказов операторами

2. Практическая часть

Заключение

Введение

Лабораторные исследования являются наиболее чувствительными показателями состояния пациента. Специалисты клинической лабораторной диагностики уже давно осознали, что многие факторы способны повлиять на результаты лабораторных исследований. Среди этих факторов: правильно доставленные и грамотно оформленные образцы биоматериала и сопутствующая документация. При отсутствии такой вспомогательная информации (факторов, оказывающих влияние на лабораторные исследования) клиницист может дать неправильную интерпретацию полученного результата и предпринять в отношении пациента неверные действия.

Цель данной контрольной обратить внимание на необходимость пересмотра правил приёма и оформления документации биологического материала. Правильное применение информации должно привести к сокращению ненужных исследований, уменьшению расходов и к лучшему пониманию результатов исследований.

Цель:

Изучить Организацию приёма, маркировки и регистрации биоматериала.

Задачи:

1. Изучение приёма биоматериала.

2. Подготовка его документации.

1. Теоретическая часть

В настоящее время лабораторным методам исследования отводится ключевая роль в диагностике и лечении заболеваний. При обследовании пациентов большое значение имеют организационные аспекты лабораторной диагностики, обеспечение точности и правильности лабораторных исследований, применение стабильных, технически надежных аналитических методов, проведение контроля качества исследований.

В учреждениях здравоохранения используется достаточно широкий арсенал лабораторных методов, причём наряду с унифицированными рутинными методиками применяются и современные методы исследования, обладающие высокой специфичностью и информативностью.

Внедрение в практику здравоохранения высокоспецифичных лабораторных методов диагностики заболеваний, требует стандартизации на всех этапах диагностического процесса.

Доля ошибок преаналитического этапа в общем числе лабораторных ошибок составляет от 50% до 95%. Ошибки, возникающие на преаналитическом этапе лабораторных исследований, обесценивают весь дальнейший ход лабораторных исследований, приводят к потере значительных средств, дискредитируют лабораторные методы в глазах лечащего врача из-за недостоверности получаемых результатов.

Для всех видов лабораторных исследований, преаналитический этап объединяет комплекс процессов перед собственно лабораторным анализом, который состоит из:

· тщательной подготовки обследуемых;

· получения биоматериала (крови, мочи и др.);

· транспорта биоматериала в лабораторию;

· первичная обработка биоматериала в лаборатории;

· распределение и хранение биоматериала в лаборатории.

Основная задача этих этапов преаналитического процесса -- обеспечение стабильности (сохранности) компонентов биоматериалов, взятых на исследование, и сведение к минимуму влияния различных факторов, изменяющих их качество.

В связи с этим, рассмотрен преаналитический этап.

1.1 Оформление направлений

При взятии материала следует правильно заполнить направление. Пробирки и сопровождающие их документы, этикетки не должны быть перепутаны. На пробирке указывается отделение и порядковый номер. На пробирке с кровью для определения групповой и резус-принадлежности - дополнительно фамилия пациента.

В направлении на анализ при взятии биоматериала необходимо указать: (все данные с учетом приказа МЗ РБ от 28.09.2007 № 787 по формам первичной медицинской документации)

· данные пациента - фамилию, имя, отчество, дату рождения, пол, адрес, номер истории болезни, диагноз.

· фамилию врача, направившего биоматериал на анализ;

· дату и время взятия биоматериала;

· дать краткую характеристику направляемого биоматериала (указать вид биоматериала), материал, не соответствующий заявленному, исследоваться не будет - например слюна вместо мокроты, сыворотка вместо плазмы;

· особенности взятия биоматериала (место взятия - для крови, для мочи - объем, порция, время сбора);

· все необходимые исследования, а не просто «биохимический анализ крови».

Направление на анализ подписывается врачом.

Избегать дублирования анализов.

1.2 Режимы выполнения лабораторных исследований

Вся кровь должна поступать только в центрифужных, химически чистых пробирках, взятых в лаборатории. Кровь для исследования в режиме неотложного анализа должна быть доставлена отдельно, не ставиться вместе с плановыми анализами на стол без предупреждения. Сотрудник отделения, доставивший срочный анализ, должен убедиться, что анализ принят сотрудником лаборатории.

Неотложные анализы выполняются в течение 2 часов, только для пациентов в тяжелом состоянии, при необходимости экстренного вмешательства. Для выполнения неотложного анализа выделяется отдельный лаборант и врач лабораторной диагностики. Выполнение исследований в режиме неотложного анализа требует большего расхода реактивов и рабочего времени специалистов, и как следствие больших финансовых затрат.

В настоящее время лаборатория неотложного анализа в неотложном режиме выполняет следующие исследования крови:

· Определение концентрации гемоглобина

· Подсчет гематокрита

· Подсчет количества эритроцитов

· Подсчет количества лейкоцитов

· Подсчет лейкоцитарной формулы

· Подсчет количества тромбоцитов

Дежурный анализ выполняется в течение рабочего дня - для вновь поступивших пациентов или при ухудшении состояния пациента, не требующего экстренного вмешательства.

Примечание: Нормальные значения лабораторных параметров касаются материала, набранного натощак. Поэтому интерпретация результатов неотложного и дежурного исследования не может заключаться в простом сравнении с нормальными величинами.

Плановые исследования - это все исследования, назначенные накануне, и материала для которых поступает в лабораторию с 7 до 9 часов утра. Время выполнения - до 6 часов, в отдельных случаях требуется более длительная аналитическая процедура.

Лабораторное обследование сотрудников осуществляется по направлению врача, отвечающего за диспансеризацию сотрудников. Во всех остальных случаях предусмотрено обследование на платной основе.

1.3 Условия хранения и транспортировки материала для клинических лабораторных исследований

С целью профилактики профессионального инфицирования, любую биологическую жидкость необходимо рассматривать как потенциально инфицированный материал, соблюдая все соответствующие правила обращения с ней при транспортировке, хранении и обработке. Биоматериалы от инфекционных пациентов должны иметь особую маркировку, обращаться с ними надо с особой осторожностью. Все биоматериалы от пациентов с ВИЧ-инфекцией должны помечаться на направлении «код 120» с обязательным указанием номера истории болезни.

Полученная биологическая жидкость должна быть доставлена в лабораторию как можно быстрее. При необходимости определения глюкозы и показателей кислотно-основного состояния кровь должна быть доставлена в лабораторию немедленно.

На всех этапах транспортировки и обработки кровь должна находиться в пробирках, закрытых крышками, для предотвращения испарения и загрязнения микробами и различными веществами извне.

Пробирки при доставке должны располагаться вертикально, кверху крышками, что способствует сохранности проб и ускорению образования сгустка при получении сыворотки, уменьшает встряхивание при транспортировке и опасность возникновения гемолиза.

Пробирки не следует заполнять до краев. Цельную кровь, полученную без антикоагулянтов, не следует помещать в холодильник до доставки в лабораторию во избежание гемолиза.

Центрифугирование производится не позднее, чем через 1 ч после взятия биоматериала.

1.4 Область применения

Настоящая стандартная операционная процедура (далее - СОП) определяет порядок приема, регистрации биоматериала, поступающего в лабораторию из процедурного кабинета (наименование учреждения) и других учреждений, обслуживаемых лабораторией, а также выявление несоответствий и их устранение.

Настоящая СОП предназначена для фельдшера-лаборанта и оператора лаборатории.

1.5 Организация процесса транспортировки биоматериала курьером и ответственность курьера

Температуру в холодильнике, которая указана на дисплее в салоне машины, курьер фиксирует в журнале «Журнал учета температурного режима в холодильниках машин », а также в данном журнале курьер указывает свое ФИО, регистрационный знак машины и время отправления машины за биоматериалом непосредственно перед поездкой в учреждения.

Курьер, прибыв в ЛПУ, идет в регистратуру данного учреждения, где забирает контейнеры с разным биоматериалом. На каждом контейнере указаны название учреждения и тип биоматериала (кровь, моча, кал, предметные стекла с мазками, соскобы). Курьер размещает контейнеры в горизонтальном положении в холодильник машины, как это показано на фотографии.

Курьер отвечает за целостность контейнеров, их сохранность, за обеспечение должного температурного режима в холодильнике машины (+4 - +8 о С), а также за сохранность биоматериала, доставляемого из учреждений в лабораторию. Во время пути курьер отслеживает температуру в холодильнике машины, которая выводится на дисплей, установленный в салоне машины.

1.6 Прием биоматериала в лаборатории

Температуру, которая указана на табло в холодильнике машины на момент изъятия контейнеров, курьер отмечает в журнале «Журнал учета температурного режима в холодильниках машин » в графе, соответствующей государственному номеру машины. А также в этом же журнале водитель указывает время прибытия машины с биоматериалом из учреждений.

Курьер передает промаркированные контейнеры с образцами крови, мазками и соскобами фельдшеру-лаборанту.

В кабинете фельдшер-лаборант открывает крышку контейнера и извлекает оттуда пробирки с кровью, предметные стекла с мазками и соскобами, папки с направлениями на исследования.

Сортирует пробирки с кровью отдельно по штативам, согласно типу пробирок (биохимических, гематологических и коагулологических) и названиям учреждений, которые указаны на штативах.

1.7 Передача биоматериала и направлений в соответствующие подразделения лаборатории

В кабинете фельдшер - лаборант ставит штативы с пробирками для биохимических, иммунологических, коагулологических исследований в контейнеры с маркировкой « для переноса биоматериала» и относит их центрифугирования.

Фельдшер - лаборант звонит в отделы гематологии и ПЦР для того, чтоб фельдшеры-лаборанты из соответствующих отделов забрали биоматериал.

Далее передает направления на исследования операторам регистрации.

1.8 Регистрация бланков-заказов операторами

Порядок регистрации:

- оператор считывает штрих-код сканером, наклеенный на бланк- направление;

- затем оператор вводит в ЛИС паспортные данные пациента: ФИО, дату рождения, адрес проживания и другие данные: источник заказа (ОМС, ДМС, наличный расчет, диспансеризация), номер учреждения, отделение, ФИО врача, назначившего исследования, диагноз, код МЭС (медико-экономический стандарт).

- после этого оператор вносит в ЛИС те показатели, которые назначил лечащий врач, и сохраняет сформированный заказ в ЛИС.

2. Практическая часть

Городская клиническая больница № 40 была открыта в 1966 году и в настоящее время представляет собой единственный в г. Нижнем Новгороде многопрофильный медицинский комплекс, включающий в себя: стационар, родильный дом, женскую консультацию, детскую и взрослую поликлинику. Является основной клинической базой кафедры хирургии, центра повышения квалификации и профессиональной переподготовки специалистов, Нижегородской государственной медицинской академии, которая работает на базе больницы со дня ее открытия. Функциональная особенность больницы № 40 - прием пациентов практически с любой патологией в экстренных случаях в круглосуточном режиме. Машины «Скорой помощи» доставляют более 100 пациентов ежедневно.

В больнице и ее структурных подразделениях созданы все необходимые условия для оказания своевременной помощи больным и качественного их лечения. Здесь уверенно используются и совершенствуются традиционные методики, активно внедряются новейшие медицинские технологии. Повсеместно осваивается современное диагностическое оборудование. За последние два года в рамках программы модернизации здравоохранения больница получила 216 единиц медицинского оборудования, включая современное эндоскопическое, лабораторное, ультразвуковое диагностическое оборудование, что позволило выполнять более сложные вмешательства в гепатопанкреатологии, колопроктологии, флебологии.

Ведущие специалисты принимают активное участие в работе специализированных семинаров, конференций, симпозиумов российского и международного уровня. лабораторный клинический биоматериал

Городская больница № 40 - клиническая база широкого профиля, где современные научные разработки и методики применяются на практике. Здесь давно и плодотворно ведется совместная работа с кафедрой хирургии Центра повышения квалификации и профессиональной переподготовки специалистов Нижегородской государственной медицинской академии. Ее организатор, профессор Игорь Леонидович Ротков, стал основателем хирургической школы, которую прошли практически все хирурги больницы и сегодня продолжают развивать накопленный опыт, привнося новые разработки и методики. На базе больницы создан городской флебологический центр. В отделении детской хирургии в течение нескольких десятилетий работает научный отдел детской гастроэнтерологии как филиал Нижегородского института педиатрии. На базе родильного дома расположены кафедры акушерства и гинекологии усовершенствования врачей и обучения студентов НГМА. Здесь повышают квалификацию специалисты из многих регионов России. Совместная работа ученых-практиков и врачей больницы способствует росту их мастерства, а новаторство в самых разных областях медицины позволяет достигать уникальных результатов в лечении больных.

На результатах работы Городской клинической больницы № 40 было защищено 9 докторских и 29 кандидатских диссертаций. На способы операций, диагностики и полезные модели, разработанные специалистами больницы, получено более 70 авторских свидетельств и патентов.

Высокой оценкой деятельности коллектива врачей явилось присуждение премии города Нижнего Новгорода в области медицины в 2012 году. Работа посвящена одной из актуальнейших и сложнейших проблем хирургии - лечению флеботромбозов нижних конечностей, за последний пятилетний период наблюдения и оказания экстренной и плановой хирургической помощи больным с флеботромбозами в условиях городского флебологического центра на базе ГБУЗ НО «ГКБ № 40».

Родильный дом, входящий в структуру больницы, имеет 205 коек и является самым крупным в Нижегородской области. В настоящее время выполняет функцию областного перинатального центра, принимая 4500-5000 родов ежегодно. Вся проводимая врачами-акушерами-гинекологами работа направлена на уменьшение количества случаев невынашивания и перенашивания беременными, на достижение родоразрешения естественным путем и улучшение показателей выживаемости новорожденных.

С января 2010 года в стенах взрослой поликлиники успешно функционирует Центр здоровья, признанный одним из лучших на региональном уровне. Его опыт работы представлен заведующей Центром на Всероссийском форуме - «Здоровая нация - основа процветания России».

В 2012 году с целью повышения доступности оказания медицинской помощи на отдаленной территории в структуре взрослой поликлиники организован и успешно функционирует офис врача общей практики.

Более тысячи сотрудников учреждения, в том числе врачи, медицинские сестры, лаборанты, санитарки, технический персонал своим напряженным трудом, заботой и теплом создают атмосферу гуманизма и милосердия, которая свойственна коллективу ГБУЗ НО «ГКБ № 40».

Во время практики был освоен весь процесс приёма и регистрации биоматериала.

1. приём биоматериала и бланков.

2. Исследование биоматериала

3. Запись полученных результатов на бланк

4. Учет результат в журналах регистрации анализов

5. Утилизация биоматериала

Заключение

Основная форма контроля организации приёма, маркировки и регистрации биоматериала - периодические внешние и внутренние проверки. Но данную форму контроля нельзя признать эффективной. Проблема контроля этого этапа лабораторных исследований остается на сегодняшний день одной из серьезнейших проблем современной лабораторной медицины.

Наиболее эффективным и действенным представляется шаг в создании стандартных условий взятия, транспортировки и хранения биологических проб пациента (использование вакуумных или иных систем). Внедрение таких систем в практику оказывает влияние не все этапы лабораторного исследования и в целом переводит организацию работы лаборатории на иной уровень. Их использование не только облегчает организацию и значительно продвигает стандартизацию преаналитческого этапа, но и создает условия, необходимые для внедрения современных лабораторных систем. При наличии анализаторов они могут использоваться в качестве первичных пробирок, что значительно упрощает аналитический этап лабораторного исследования.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

    Главные задачи микробиологических исследований клинической лабораторной диагностики. Оснащение бактериологической лаборатории, высокопроизводительная автоматизированная техника идентификации микроорганизмов, стандартизация микробиологической диагностики.

    реферат , добавлен 09.10.2010

    Пути передачи сифилиса - венерического инфекционного заболевания с поражением кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей, нервной системы с последовательной сменой стадий болезни. Уязвимости зуботехнической лаборатории перед инфекцией.

    презентация , добавлен 27.04.2016

    Характериcтика деятельноcти клинико-диагноcтичеcкой лаборатории в cовременных уcловиях, оценка деятельноcти перcонала и технологии повышения ее эффективноcти. Описание работы cecтринcкого перcонала в лаборатории, разработка рекомендаций по оптимизации.

    курсовая работа , добавлен 28.06.2016

    Российские нормативные документы, регламентирующие производство лекарственных средств. Структура, функции и основные задачи испытательной лаборатории по контролю качества лекарственных средств. Законодательные акты РФ об обеспечении единства измерений.

    методичка , добавлен 14.05.2013

    Ознакомление с материалами, применяемыми для изготовления современных зубных протезов. Изучение схемы автоматизированной организации работы, позволяющей изготовить протезы по технологии CAD\CAM. Преимущества автоматизации зуботехнической лаборатории.

    презентация , добавлен 11.10.2015

    Основной элемент зуботехнической лаборатории – рабочий стол зубного техника. Конструкция данного стола, его оборудование и освещение. Параметры применяемой в кабинете аппаратуры. Важнейшие критерии, от которых зависит работоспособность литейной машины.

    презентация , добавлен 14.03.2016

    Правовая основа для проведения клинических исследований принципиально новых и ранее не применявшихся лекарственных препаратов. Этические и правовые принципы клинических исследований, сформулированные в Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации врачей.

    презентация , добавлен 25.03.2013

    Этапы работы микробиологической лаборатории и затраты времени на каждый из них. Нормативная документация. Общие требования к сбору и доставке проб биологического материала для микробиологического исследования. Интерпретация результатов анализов.

    презентация , добавлен 26.04.2016

    Общие положения Приказа Министра здравоохранения Республики Казахстан "Об утверждении Инструкции по проведению клинических исследований и (или) испытаний фармакологических и лекарственных средств". Принципы этической оценки клинических исследований.

    презентация , добавлен 22.12.2014

    Знакомство с основными признаками проявления шизофрении. Анализ психического, соматического и неврологического статуса больного. Рассмотрение клинических методов исследования душевного заболевания. Общая характеристика лабораторных исследований.