Untersuchung von biologischem Material mit der PCR-Methode. Was ist ein PCR-Bluttest und warum wird er benötigt?

Die PCR-Diagnostik ist ein auf der Polymerase-Kettenreaktion basierendes Verfahren, mit dem eine Person auf Infektions- und Erbkrankheiten untersucht werden kann. PCR-Tests bei 12 Infektionen zeigen Ergebnisse, unabhängig davon, ob die Erkrankung akut oder chronisch ist. Einige Experten halten PCR 12 für einen obligatorischen Test und stellen ohne ihn keine endgültige Diagnose. Die Ergebnisse können bereits lange vor dem Auftreten von Krankheitssymptomen positiv sein.

Im 20. Jahrhundert entdeckte Kary Mullis aus den USA das Phänomen der Polymerase-Kettenreaktion. Derzeit ist die PCR-Methode in einigen Bereichen der Medizin der Goldstandard. Die Methode eignet sich am effektivsten zur Identifizierung der Krankheit im aktiven Stadium, da es Fälle gibt, in denen herkömmliche Methoden im aktiven Stadium kein so genaues Ergebnis liefern.

Die Diagnose infektiöser Prozesse mittels PCR ist in der modernen Welt sehr relevant. Die Vorteile dieser Art der Prüfung sind folgende:

1. Nachweis infektiöser Krankheitserreger in Tests. Die Analyse beinhaltet die Identifizierung der DNA oder RNA eines Infektionserregers.
2. Falsche und fehlerhafte Reaktionen sind praktisch ausgeschlossen.
3. Die PCR 12-Methode ist die empfindlichste. Dank dieser Methode können sogar einzelne Zellen von Infektionserregern nachgewiesen werden.
4. Das Ergebnis der PCR für versteckte Krankheitserreger liegt innerhalb von 4 Stunden nach dem Eingriff vor.
5. Die Fähigkeit, Infektionserreger zu erkennen, ohne dass charakteristische Symptome für die Krankheit vorliegen. Die Methode ist im Falle einer bestimmten Krankheit sehr effektiv.

In der modernen Welt der PCR-Diagnostik von Infektionen entwickelt sich die Geschwindigkeit immer weiter. Die Technik wird aktiv verbessert. Es entstehen neue Subtypen von PCR-Untersuchungen. Dank der Entwicklung dieser Untersuchungsmethode wird sie für ein breites Spektrum von Menschen so zugänglich wie möglich, und die Kosten ändern sich allmählich.

Grundlagen der Polymerase-Kettenreaktion

Die PCR-Methode wird ausschließlich unter Laborbedingungen durchgeführt. Zur Durchführung werden spezielle Enzyme eingesetzt, die die Struktur der DNA und RNA des Patienten um ein Vielfaches erhöhen. Es muss eine solche Menge an DNA und RNA gebildet werden, dass eine visuelle Analyse durchgeführt werden kann. Bei der Untersuchung wird der RNA- oder DNA-Abschnitt kopiert, der für die geforderten Bedingungen optimal geeignet ist.

Das Labor verfügt über eine entsprechende Datenbank, die den genauen Aufbau verschiedener Infektionserreger anzeigt. Dank der PCR-Methode können Sie den Erreger nicht nur sehen, sondern auch dessen Mengenverhältnis berechnen.

Auch die PCR-Diagnostik bringt einige Neuerungen mit sich, darunter die folgenden:

• Einführung von Mutationen;
• Verbindung einzelner DNA-Fragmente;
• Feststellung der Vaterschaft usw.

Durch PCR-Analyse nachgewiesene Infektionen

Mit der PCR-Diagnostik können folgende infektiöse Prozesse nachgewiesen werden:

• Hepatitis der folgenden Sorten: A, B, C, G;
• Epstein-Barr-Virus, der Erreger der infektiösen Mononukleose;
• Cytomegalovirus;
• Mycobacterium tuberculosis;
• Herpes Typ 1 und 2;
• viele sexuell übertragbare Infektionen: Ureaplasmose, Gardnerellose, Chlamydien, Mykoplasmose, Trichomoniasis.
• HPV und seine onkogenen Subtypen;
• durch Zecken übertragene Enzephalitis und Borreliose;
• Candida-Infektion;
• Listeriose;
• Helicobacter pylori-Infektion.

Und das ist nur ein Teil der häufigsten Infektionen, die mittels PCR nachgewiesen werden können. PCR-Bluttests werden im gynäkologischen Bereich der medizinischen Praxis sowie in folgenden Bereichen aktiv eingesetzt:

• pulmonal;
• phthisiatrisch;
• gastroenterologisch;
• onkologisch;
• viele andere Bereiche der Medizin.

Regeln für das Sammeln von Material zur Analyse

Fremde DNA und RNA können durch die Untersuchung verschiedener biologischer Flüssigkeiten einer bestimmten Person nachgewiesen werden. Um eine Person auf das Vorliegen bestimmter sexuell übertragbarer Infektionen zu untersuchen, ist es notwendig, dem Patienten eine Probe des Genitalsekrets (Abstrich oder Kürettage) und seinen Urin zu entnehmen.

Wenn eine Untersuchung einer Person auf verschiedene Arten von Infektionen (HIV, Herpes, Hepatitis und andere) erforderlich ist, wird ein PCR-Test durchgeführt, für den das Blut des Patienten verwendet wird.

Um Herpesläsionen und Mononukleose zu diagnostizieren, müssen Sie einen Abstrich aus dem Mund des Patienten machen. Um eine CMV-Infektion zu bestätigen, wird der Urin des Patienten zur Analyse entnommen. Es gibt Fälle, in denen die Gehirn-Rückenmarks-Flüssigkeit untersucht wird, um die Ursachen neurologischer Anomalien zu ermitteln.

In diesem Fall untersucht ein Pneumologe mittels PCR Sputum und Flüssigkeit aus der Pleura eines bestimmten Patienten.

Besteht bei einem Neugeborenen der Verdacht auf eine intrauterine Infektion, nehmen Ärzte eine Analyse des Fruchtwassers der Schwangeren und ein Stück Plazentagewebe vor.

Durchführung der Analyse: Merkmale des Verfahrens und Interpretation der Ergebnisse

Alle mit der PCR-Methode untersuchten Patienten erhalten das zuverlässigste Ergebnis. In diesem Fall ist das Auftreten von Fehlern praktisch ausgeschlossen. Die Ergebnisse dieser Analyse werden schnell genug aufbereitet, was die Diagnose erleichtert und eine rechtzeitige Verschreibung von Behandlungsmaßnahmen gewährleistet.

Die Zuverlässigkeit des PCR-Ergebnisses hängt direkt von der korrekten Einreichung des Untersuchungsmaterials ab. Das Material darf nicht kontaminiert sein, da sonst das Ergebnis der Untersuchung nicht objektiv ist. Zu den wichtigsten Empfehlungen vor der Durchführung eines PCR-Tests zählen folgende Voraussetzungen:

1. Es ist verboten, einen Tag vor dem Test sexuelle Aktivitäten auszuüben.
2. Eine Blutuntersuchung auf Infektionen muss morgens auf nüchternen Magen durchgeführt werden.
3. Der Urin wird morgens in einem sterilen Behälter gesammelt.

Das Ergebnis der Analyse liegt 1,5 bis 2 Tage nach dem jeweiligen Eingriff vor. Es gibt Situationen, in denen das Ergebnis noch am selben Tag erstellt werden kann.

Dekodierung der Ergebnisse

Das Ergebnis einer solchen Untersuchung kann positiv oder negativ ausfallen. Ein negatives Bluttestergebnis zeigt an, dass das gespendete Material keine infektiösen Elemente enthält. Eine Vielzahl durchgeführter PCR-Tests zeigen ein negatives Ergebnis.

Eine positive PCR-Analyse bestätigt, dass im eingereichten Material Infektionserreger nachgewiesen wurden und eine qualitativ hochwertige und möglichst wirksame Behandlung des Patienten erforderlich ist.

Das Ergebnis kann positiv sein, es gibt jedoch keine Manifestationen der Krankheit. Dies weist entweder auf den Ausbruch der Krankheit oder auf deren Übertragung hin. Wird ein Krankheitsüberträger festgestellt, sind keine therapeutischen Maßnahmen erforderlich. Sie müssen nur einen Spezialisten aufsuchen. Beispiele für solche Krankheiten sind:

• Papillomavirus-Infektion;
• Herpes usw.

Man findet sie meist im Speichel, in Abstrichen des Gebärmutterhalskanals und der Harnröhre. Es muss jedoch beachtet werden, dass ein Kranker völlig gesunde Menschen infizieren kann, obwohl ihn diese Krankheit überhaupt nicht stört. Die Krankheit kann chronisch werden. Es ist zu beachten, dass in Fällen, in denen der PCR-Bluttest ein positives Ergebnis zeigt, die Ernennung therapeutischer Maßnahmen lediglich erforderlich ist.

Die PCR-Analyse hat auch einen quantitativen Charakter. Das quantitative Ergebnis wird nur von einem Spezialisten beurteilt; es ist individuell für verschiedene Infektionen. Anhand der quantitativen Merkmale ist der Arzt in der Lage, die Aktivität eines bestimmten pathologischen Prozesses zu verstehen und den genauen Entwicklungsstadium einer bestimmten Krankheit festzulegen. Durch die Analyse der erhaltenen Ergebnisse kann der Spezialist das erforderliche Medikament auswählen und möglicherweise die Dosierung des Medikaments überarbeiten.

Genauigkeit der PCR-Diagnostik

Fachleuten werden die wichtigsten PCR-3-Merkmale genannt, darunter:

1. Genauigkeit.
2. Spezifität.
3. Empfindlichkeit.

Bei der Diagnose von Infektionen mit der PCR-Methode besteht eine hohe Wahrscheinlichkeit, Infektionserreger nachzuweisen. Die PCR-Analyse von Blut und anderen Flüssigkeiten ist hochspezifisch. Mit seiner Hilfe können Sie einen bestimmten Infektionsprozess leicht identifizieren. Die PCR-Diagnostik ist hochsensitiv. Wenn das Testmaterial eine Mindestmenge an Infektionserregern enthält, ist die PCR-Methode immer positiv.

Das seltenste Ergebnis ist ein falsch positives Ergebnis. Liegt keine Infektion vor, ist das Ergebnis negativ.

PCR für latenten Infektionsprozess

Bei Verdacht auf eine STI wird eine Blutuntersuchung verordnet, um nach versteckten Infektionen zu suchen. Sexuelle Krankheiten können nur durch eine Untersuchung des Patienten erkannt werden. Krankheiten wie:

• Chlamydien;
• Ureaplasmose;
• Tripper;
• Herpes;
• Gardnerellose;
• Mykoplasmen.

Die oben genannten sexuell übertragbaren Infektionen sind weit verbreitet und gleichzeitig heimtückisch. Im Anfangsstadium der Krankheit verursachen sie keine nennenswerten Symptome und die Patienten suchen keine Hilfe. Bei Verdacht auf diese Infektionen sind PCR-Blutuntersuchungen und Abstriche der Schleimhaut der Harnröhre und des Gebärmutterhalskanals erforderlich.

STIs haben einen sehr negativen Einfluss auf das Fortpflanzungssystem. Sie können Unfruchtbarkeit oder Defekte beim Fötus verursachen. In diesem Zusammenhang müssen Sie vor der Planung einer Schwangerschaft einen PCR-Test durchführen.

PCR-Tests für 12 Infektionen sind beliebt. Die Diagnose mit der PCR 12-Methode erfolgt durch Abstriche aus den Geschlechtsorganen. Das Material wird 2 Stunden nach dem Urinieren gesammelt. 2 Tage vor der Studie sollten keine Zäpfchen in die Vagina eingeführt und keine Spülungen durchgeführt werden. Das Analyseergebnis liegt in 2 Tagen vor.

Die Kosten für die PCR variieren je nach der untersuchten Infektion. Der Preis liegt zwischen 200 und 500 Rubel für jede Infektion. Sie können ein Privatlabor auf eigene Faust betreten und sich dort untersuchen lassen, ohne eine ärztliche Überweisung.

PCR (Polymerase-Kettenreaktion) ist eine hochempfindliche spezifische Methode zur Diagnose viraler Erkrankungen, die mithilfe einer molekulargenetischen Untersuchung des Blutes des Patienten durchgeführt wird. Mit dieser Diagnosemethode können auch Erbkrankheiten erkannt werden. Mithilfe der PCR wird nicht nur die Diagnose ermittelt, sondern auch das Stadium, in dem sich die Erkrankung befindet. Lassen Sie uns über die Diagnose von Infektionen mit der PCR-Methode sprechen, erfahren Sie mehr über die Bedeutung der Ergebnisse und vieles mehr.

Der Entwickler der Polymerase-Kettenreaktionsmethode war der Amerikaner Kary Mullis, der sie 1983 entwickelte. 1993 erhielt Carey den Nobelpreis für Chemie.

Die PCR-Analyse ist der Goldstandard bei der Diagnose von Krankheiten. Ohne diese Methode wäre eine definitive Diagnose und damit eine adäquate Behandlung nicht möglich. Sehr oft ist die Analyse die einzige Methode zur Identifizierung aktiver Infektionen im Körper, wenn sich andere Methoden als unwirksam erwiesen haben.

Methode der Polymerase-Kettenreaktion

Lesen Sie mehr über die Polymerase-Kettenreaktionsmethode.

Der Test umfasst die mehrfache Vervielfältigung von DNA oder RNA mithilfe von Enzymen und wird in einem Labor durchgeführt. Auf diese Weise wird die für die visuelle Analyse erforderliche Materialmenge gebildet. Bei der PCR wird nur der gewünschte Abschnitt kopiert, der den angegebenen Parametern entspricht.

Beispielsweise wird menschliches biologisches Material, das wahrscheinlich einen Krankheitserreger enthält, in einen Cycler gegeben. Anschließend binden dem Reaktor hinzugefügte Enzyme an den Krankheitserreger und es wird eine Kopie von DNA und RNA synthetisiert. Das Kopieren erfolgt in mehreren Schritten, die eine Kettenreaktion bilden und Hunderte von Kopien desselben genetischen Materials erzeugen. Anschließend führen Labortechniker eine Analyse durch und vergleichen die Ergebnisse mit den Informationen in der Datenbank. PCR liefert sowohl qualitative als auch quantitative Forschungsergebnisse.

Diese Methode ist in der Medizin weit verbreitet; sie wird zur Durchführung von Mutations- und DNA-Splicing-Experimenten sowie für andere Experimente verwendet.

Vorteile der Diagnose viraler Infektionen mittels PCR

• Die Empfindlichkeit des Tests ist sehr hoch und es können sogar einzelne Krankheitserreger nachgewiesen werden. Die Empfindlichkeit beträgt 10-1000 Zellen eines Bildes des Materials. Zum Vergleich: Die Empfindlichkeit mikroskopischer Tests überschreitet nicht 105 Zellen;
• Die Spezifität der PCR liegt auf einem hohen Niveau, was die Bestimmung der RNA- und DNA-Region des Erregers ermöglicht. Somit liefert der Test keine falschen Indikatoren;
• PCR weist den viralen Erreger, den Erreger der Infektion, direkt in der Testprobe nach;
• Der Test ist sehr schnell durchgeführt. Innerhalb von 4 Stunden können Sie die Ergebnisse der Studie auswerten;
• Mit einer universellen Forschungstechnik können Sie verschiedene Arten von Krankheitserregern nachweisen. Mit einer Probe können mehrere Arten von Krankheitserregern nachgewiesen werden.
• Mittels PCR kann eine präklinische und retrospektive Diagnostik durchgeführt werden. Die präklinische Diagnostik identifiziert Krankheitserreger bereits vor Ausbruch der Erkrankung, die retrospektive Diagnostik erfolgt erst nach Ausbruch der Erkrankung. Dadurch kann die Studie während der Inkubationszeit der Krankheit durchgeführt werden, wenn noch keine gesundheitlichen Beschwerden vorliegen, der Patient aber bereits mit dem Virus infiziert ist. Es ist auch möglich, eine latente Infektion zu erkennen, die asymptomatisch verläuft.
• PCR kann an Proben von Archivmaterial oder an biologischen Überresten durchgeführt werden. Dies hilft bei der Identifizierung oder Vaterschaft.

Außerdem, Diagnostik mittels PCR-Methode In letzter Zeit hat es sich aktiv weiterentwickelt. So entstehen immer mehr neue Tests für die Forschung. Dadurch sinken die Preise für solche Tests jedes Jahr, was die Methode vielen Menschen zugänglich macht.

Erkennbare Infektionen

Infektionen, die mittels Polymerase-Kettenreaktion im menschlichen Körper nachgewiesen werden können:

• Hepatitis A, B, C, G;
• Mononukleose;
• Cytomegalovirus-Infektion;
• Herpesinfektion, Typ 1 und 2;
• sexuell übertragbare Infektionen (Chlamydien, Trichomoniasis, Mykoplasmose, Ureaplasmose und andere);
• Tuberkulose;
• onkogene Viren (Papillome);
• Listeriose;
• Borreliose;
• durch Zecken übertragene Enzephalitis;
• Helicobacter-pylori-Infektion sowie andere Infektionen.

Die Diagnostik mittels PCR-Methode ist in vielen Bereichen der Medizin weit verbreitet, beispielsweise in der Urologie, Gynäkologie, Phthisiologie, Onkologie und anderen.

Analyse

Die Ergebnisse und der Zeitpunkt der PCR-Analyse, die mit der Polymerase-Kettenreaktionsmethode durchgeführt wird, werden innerhalb von zwei Tagen nach Einreichung der Proben für die Forschung bekannt gegeben. Manchmal werden Ergebnisse innerhalb eines Tages erzielt.

Regeln für das Sammeln von Material für die PCR-Forschung

Fast alle Patienten, die Material für die PCR-Diagnostik spenden, können mit zuverlässigen und schnellen Ergebnissen rechnen. Die Reinheit der Analyse hängt jedoch auch davon ab, dass der Patient das Material entnimmt. Das zu analysierende Material muss unter Bedingungen gesammelt werden, die eine Kontamination verhindern, was die Objektivität des Ergebnisses erheblich beeinträchtigen kann.

• Vermeiden Sie am Tag vor dem Test Geschlechtsverkehr.
• Die Blutentnahme erfolgt nur morgens auf nüchternen Magen. Das bedeutet, dass Sie vor der Blutentnahme weder essen noch trinken dürfen.
• Der zu analysierende Urin wird in einem sterilen Behälter vorgelegt und nur Morgenurin gesammelt.

Für die Forschung mit der PCR-Methode wird biologisches Material gesammelt, das vermutlich pathogene Bakterien enthalten kann. Es könnte sein:

• Blut,
• Speichel,
• Schleimproben aus Schleimhäuten,
• Plazenta,
• Urin,
• Sputum,
• kratzen,
• Fruchtwasser und Pleuraflüssigkeit.

Um Tests auf sexuell übertragbare Infektionen durchzuführen, werden Ausflussproben aus den Genitalien entnommen.

Es werden Blutproben entnommen. Um auf Mononukleose zu testen, wird ein Rachenabstrich genommen, und um CMV zu diagnostizieren, werden Urinproben entnommen. Zur Diagnose von Läsionen im menschlichen Nervensystem wird Zerebrospinalflüssigkeit entnommen.

Bei intrauterinen Infektionen werden Plazentagewebe und Fruchtwasser entnommen.

Analyseergebnisse

PCR-Testergebnisse können positiv oder negativ sein. Ist das PCR-Testergebnis negativ, ist der Körper des Patienten nicht infiziert und somit gesund. Bei einem positiven Ergebnis kann bestätigt werden, dass sich im Körper des Patienten infektiöse Krankheitserreger befinden.

Es kommt auch zu einem gesunden Bakterientransport, bei dem der Patient keine Krankheitssymptome hat. In diesem Fall ist das PCR-Ergebnis positiv. Von einer aktiven Infektion kann hier aber nicht gesprochen werden. In diesem Fall ist keine Behandlung notwendig, es ist jedoch notwendig, regelmäßig einen Arzt aufzusuchen. Dieses Phänomen tritt häufig bei Krankheiten wie HPV, Herpes, CMV und anderen auf.
Es ist sehr wichtig zu bedenken, dass ein Träger der Infektion sie auf einen gesunden Menschen übertragen kann. Auch der Träger selbst kann in das chronische Stadium der Krankheit eintreten.

PCR-Diagnostik – Video-Erklärung

In der modernen Medizin kommt hochpräzisen Laborforschungstechniken auf Basis der Polymerase-Kettenreaktion eine immer größere Bedeutung zu. Durch den Einsatz von PCR-Technologien ist es möglich, Analysen auf molekulargenetischer Ebene durchzuführen und akute und chronische Formen von Erb- und Infektionskrankheiten bei einem Patienten lange vor dem Auftreten klinischer Symptome zu erkennen.

Was ist PCR-Diagnostik?

Diese Methode wurde 1984 von der amerikanischen Biochemikerin und Nobelpreisträgerin Carrie Mullis entwickelt.

Viele qualifizierte Fachkräfte sind täglich mit PCR-Tests konfrontiert und können sich eine genaue Diagnose der aktivsten Formen von Pathologien ohne deren Ergebnisse nicht vorstellen, wenn immunologische und mikrobiologische Methoden nicht funktionieren. Es kommt häufig vor, dass verschiedene Viren die gleichen klinischen Symptome verursachen können. Mit der PCR-Analyse können Sie den Erreger in seiner niedrigsten Konzentration im Biomaterial identifizieren und sogar einzelne Zellen von Viren oder Bazillen identifizieren.

Zur PCR-Diagnostik im Video

Grundlage der PCR-Diagnostik ist die unter besonderen Laborbedingungen wiederholte Amplifikation (Vermehrung) bestimmter Abschnitte der DNA (Desoxyribonukleinsäure) – menschliches Erbgut.

Der gesamte technologische Prozess des Kopierens besteht aus mehreren Phasen:

1. Denaturierung – Probenvorbereitung: Durch Erhöhung der Temperatur des Biomaterials (bis zu 95 °C) wird zweisträngige DNA in zwei separate Stränge gespalten.
2. Glühen — Das zu untersuchende Biomaterial wird abgekühlt und mit stickstoffhaltigen Primern (Reagenzien) versetzt, die die Fähigkeit besitzen, Sequenzen im DNA-Molekül, die nur für den Krankheitserreger charakteristisch sind, spezifisch zu erkennen und mit ihnen zu verbinden.
3. Verlängerung – Bei der Polymerasereaktion selbst kommt es zur Vervollständigung einer einzigartigen molekulargenetischen Stelle. In jeder der Verbindungen mit dem Primer wird ein neuer DNA-Strang gebildet, der den Tochterstrang strukturell ergänzt.

Der gesamte Zyklus wird 20 – 30 Mal wiederholt. Letztlich entsteht die Anzahl komplementärer DNA-Stränge, die für eine visuelle Analyse und den Vergleich der Ergebnisse mit verfügbaren Daten zur Zellstruktur verschiedener Krankheitserreger ausreicht. Es wird das Virus, die Art seines Auftretens, die Stärke seiner Wirkung auf den Körper und die Anzahl der vorhandenen Bazillen bestimmt. Diese Informationen sind für den behandelnden Arzt bei der Verschreibung wirksamer Therapiemethoden und der Auswahl von Medikamenten von großem Wert.

PCR-Diagnosemethoden unterscheiden sich von anderen Labormethoden in folgenden Punkten:

• direkte Bestimmung des Vorhandenseins von Krankheitserregern;
• hohe Empfindlichkeit, Spezifität und Vielseitigkeit des Virusnachweisverfahrens;
• Geschwindigkeit der Analyse;
• die Fähigkeit, asymptomatische Pathologien zu diagnostizieren.

Die Ergebnisse der Studie können fotografiert oder in Informationsmedien eingegeben werden, sodass sie von unabhängigen Experten beurteilt werden können.

Wie bereitet man sich richtig auf einen PCR-Test vor?

Für die Forschung werden verschiedene Biomaterialien verwendet:

• Blut;
• Schleim;
• Speichel;
• Urin;
• Sputum;
• Epithelabschürfungen;
• Prostatasaft;
• Abkratzen der Schleimhäute;
• Fruchtwasser;
• Plazentagewebe;
• Zerebrospinal-, Gelenk- oder Pleuraflüssigkeit;
• Genitalsekrete.

Moderne Laborausstattung und die Professionalität des Laborarztes garantieren, dass der Patient bei der PCR-Analyse ein zuverlässiges Ergebnis erhält. Die Genauigkeit der Studie hängt jedoch von der richtigen Vorbereitung auf den Test und der Einhaltung aller Empfehlungen zur Auswahl des Biomaterials ab.

Es ist nicht schwer, sich richtig auf die Analyse vorzubereiten; es ist wichtig, alle bestehenden Regeln zu befolgen:

1. Einen Tag vor dem Test sollten Sie keinen Geschlechtsverkehr haben.
2. Sportunterricht absagen.
3. Besuchen Sie vor der Untersuchung kein Badehaus oder keine Sauna.
4. Sie sollten am Vortag bis spätestens 20:00 Uhr zu Abend essen, keine scharfen und fettigen Speisen zu sich nehmen und keinen Alkohol trinken.
5. Venöses Blut muss morgens vor dem Eingriff gespendet werden. Essen, trinken und rauchen Sie nicht.

Wie Frauen und Männer PCR-Tests durchführen – Merkmale des Verfahrens

Die wichtigste allgemeine Anforderung bei der Auswahl von Biomaterial besteht darin, eine maximale Konzentration an Mikroorganismen in der Probe zu erreichen und keine unerwünschten Verunreinigungen – Schleim, Blut oder Eiter – zu enthalten.

Bei Untersuchungen auf Infektionen, die durch sexuellen Kontakt übertragen werden (Ureaplasmose, Gardnerellose, Chlamydien, Mykoplasmose, Trichomoniasis), werden Sekrete aus den Geschlechtsorganen gesammelt:

• bei Männern wird ein Abstrich oder eine Kürettage aus dem Harnkanal (Harnröhre) entnommen;
• bei Frauen - ein Abstrich oder Kratzen aus der Vagina, dem Gebärmutterhalskanal.

Bei der Entnahme von Material aus dem Urogenitaltrakt ist es wichtig, eine Kontamination zu vermeiden. Zu diesem Zweck werden bei Männern frühestens 2 Stunden nach dem letzten Wasserlassen, bei Frauen – unter Berücksichtigung der Tage des Menstruationszyklus – Abstriche entnommen. Überschüssiger Schleim oder Eiter wird mit sterilen Wattestäbchen entfernt, das Biomaterial wird mit speziellen Kunststoffsonden gesammelt – dadurch verringert sich die Wahrscheinlichkeit, dass Blut in die Probe gelangt.

Für Männer ist die Durchführung einer Urogenital-Ausschabung sehr schmerzhaft Deshalb wird für die Analyse häufig die erste Harnportion nach einer Nachtretention verwendet, die den größten Anteil an Epithel enthält. Der Urin wird in einem sterilen Behälter mit dicht schließendem Deckel gesammelt und spätestens zwei Stunden nach der Entnahme an das Labor geliefert. Im Labor wird durch Zentrifugation ein Zellsediment des Urins für die weitere Arbeit gewonnen.

Welche Infektionen sind im PCR-12-Komplex enthalten?

Die PCR-Diagnostik wird von erfahrenen Spezialisten aktiv eingesetzt. Am gefragtesten ist die Diagnose von Viren und Infektionen.

Derzeit erweitern Polymerase-Kettenreaktionstechniken die Möglichkeiten der Forschung – die Einführung der Genotypisierung und des Spleißens von Gewebe-DNA-Fragmenten ist weit verbreitet verschiedene Bereiche der modernen Medizin:

• Gynäkologie;
• Urologie;
• Pulmologie;
• Gastroenterologie;
• Hämatologie;
• Onkologie.

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Moderne PCR-Diagnosemethoden entwickeln sich ständig weiter. Die Technik selbst wird verbessert, es entstehen neue PCR-Varianten und neue Testsysteme für Kettenreaktionen. Diese Innovationen machen die Kosten dieser Tests für Patienten erschwinglicher.

PCR-Diagnostik(Polymerase-Kettenreaktion) wird verwendet, um das aktive Stadium der Krankheit in Kombination mit traditionellen Studien zu identifizieren, wenn keine Reaktion mit immunologischen und mikrobiologischen Diagnosemethoden vorliegt.

Eine Zeit lang wurde die PCR-Diagnostik nur zu wissenschaftlichen Zwecken eingesetzt und erst ab dem Ende des 20. und Anfang des 21. Jahrhunderts entwickelte sich diese Analyse zu einer Art „Goldstandard“, der in verschiedenen Bereichen der Medizin große Vorteile brachte .

Was ist das Wesentliche der PCR-Diagnostik?

Die PCR-Diagnostik ermittelt im Gegensatz zu der Diagnostik, die Spuren von Antikörpern (AT) nachweisen kann, nicht nur die Grundursache des pathologischen Zustands, sondern weist mithilfe von Enzymen im Labor auch das Vorhandensein von DNA oder RNA in einem bestimmten Bereich nach.

Die Analyse mit der PCR-Methode ist sehr genau und eliminiert die Möglichkeit falscher Reaktionen, und es ist absolut nicht notwendig, für den Test Blut aus einer Vene zu entnehmen;

Der oben genannten Variante der biologischen Umgebung des Untersuchungsmaterials, das einen vermuteten infektiösen Erreger enthält, können durch die Entscheidung des Arztes mehrere Optionen gleichzeitig zugeordnet werden, darunter:

• Abstrich(Ausfluss aus den Genitalien);
• schleimiges Abkratzen(Mund, Nase, Genitalien);
• Speichel, Sputum oder Pleuraflüssigkeit;
• Prostatasaft, Untersuchung der Prostatasekretion auf das Vorhandensein eines Schädlings;
• Plazentagewebe oder Fruchtwasser;
• allgemeiner Urintest Untersuchung des Sediments (nach Zentrifugation), falls erforderlich, um Mycobacterium tuberculosis zu identifizieren;
• Liquor cerebrospinalis um infektiöse Läsionen des Zentralnervensystems zu identifizieren;
• Sammlung von Zellen oder Geweben(Biopsie) aus Leber, Zwölffingerdarm, Magen usw.

Diese Proben werden in einen speziellen Reaktor gegeben und durch wiederholte Verdoppelung (Amplifikation) der zu untersuchenden DNA-Fragmente, durch wiederholte Replikations- und Denaturierungszyklen unter Zugabe spezifischer Enzyme für die Synthese analysiert. Basierend auf der Art der Kettenreaktion identifiziert diese Methode die Art und die individuellen Eigenschaften von DNA oder RNA. Letztendlich ermöglicht der PCR-Prozess bei der vergleichenden Analyse von geklontem genetischem Material die Identifizierung sogar einzelner Zellen eines lebenden Virus und ermöglicht die einfache Unterscheidung von Ureaplasmen von Mykoplasmen oder.

Vor- und Nachteile der PCR-Diagnostik

Diese PCR-Diagnostik hat sowohl Vorteile als auch mehrere Nachteile.

Vorteile der Diagnostik:

• Die Bestimmung des Erregers gibt einen direkten Hinweis auf das Vorhandensein eines atypischen DNA- oder RNA-Abschnitts im Erbgut;
• Die PCR-Diagnostik bietet eine 100-prozentige Genauigkeit, da im Testmaterial Nukleinsäurepartikel (DNA- oder RNA-Fragmente) vorhanden sind, die nur für ein bestimmtes Virus oder Bakterium charakteristisch sind.
• hohe Empfindlichkeit des PCR-Systems im Vergleich zu anderen diagnostischen Methoden. Die PCR-Analyse zur Bestimmung des Vorhandenseins eines Krankheitserregers erfordert eine Zelle eines lebenden Virus (10–100 Zellen in einer Probe), was den Nachweis eines pathogenen Mikroorganismus in einem frühen Stadium der Krankheit ohne ausgeprägte Symptome ermöglicht in fortgeschrittenen Formen;
• Die hochtechnologische automatisierte PCR-Amplifikation erhöht die Geschwindigkeit der Analyse, indem die Tests am Tag der Entnahme durchgeführt werden (wobei nicht mehr als 4–6 Stunden für die Diagnose vorgesehen sind). Dies erhöht die Produktivität und verleiht den Methoden der Kulturforschung eine Überlegenheit;
• Die Vielseitigkeit der Analyse ermöglicht den Nachweis mehrerer Krankheitserreger aus einer biologischen Probe mithilfe von DNA- oder RNA-Genmaterial, das auf verschiedene Weise gesammelt wurde.

Apropos Nachteile Angesichts der Empfindlichkeit des PCR-Systems ist einer der unangenehmen Momente:

• Variabilität von Mikroorganismen. Der Nachteil besteht darin, dass Mikroorganismen durch Mutationen gekennzeichnet sind, die zu einer Veränderung des Genotyps des untersuchten Erregers führen. Und das PCR-Testsystem im amplifizierten Bereich des Genoms kann den Hybrid eines sich bereits entwickelnden Krankheitserregers nicht erkennen, ebenso wie das menschliche Immunsystem ihn nicht erkennt, sodass keine Reaktion zur Feststellung des Vorliegens einer Infektionskrankheit erfolgt. Dafür sind jedoch verschiedene Entwicklungen im Gange, um die PCR-Methode zu verbessern;
• die Möglichkeit, ein falsch positives oder falsch negatives Ergebnis zu erhalten. Um in einem der Schritte der PCR-Diagnostik nicht auf falsche Ergebnisse zu stoßen, muss diese sorgfältig und ohne Unterbrechung des Prozesses unter Einhaltung der Regeln für die Materialsammlung durchgeführt werden. Proben können ihre Struktur verändern oder vollständig zerstört werden, was zu einem falsch negativen oder falsch positiven Ergebnis führen kann. Es versteht sich, dass dieses Ergebnis auftreten kann, wenn die Infektion bereits abgetötet wurde, die toten Zellen jedoch noch keine Zeit hatten, sich zu erneuern, und beim Klonen berücksichtigt wurden. Daher werden in den frühen Stadien nach der Behandlung beispielsweise andere Methoden eingesetzt und nach vollständiger Entfernung inaktiver Infektionserreger aus dem Körper eine Kontrollanalyse mit der PCR-Methode durchgeführt. Und der behandelnde Arzt trifft die endgültige Entscheidung über die Zweckmäßigkeit einer Therapie unter Berücksichtigung aller Vor- und Nachteile.

Vorbereitung auf die PCR-Diagnostik und Bedingungen für die Durchführung von Tests

Es lohnt sich, auf die einfache Vorbereitung der PCR zu achten; für ein genaueres Ergebnis ist es notwendig, alle Empfehlungen des behandelnden Arztes strikt zu befolgen und mindestens einige unbestreitbare Bedingungen einzuhalten.

Abhängig von der Methode zum Sammeln des Untersuchungsmaterials ist Folgendes zu beachten:

• zur Diagnostik mit venösem Blut Der Patient muss auf nüchternen Magen getestet werden, wobei auch die Aufnahme von Flüssigkeit ausgeschlossen ist.
• für einen Abstrich Es ist notwendig, mindestens ein paar Tage lang auf Geschlechtsverkehr zu verzichten; die Genitalhygiene darf am Abend durchgeführt werden, jedoch nicht am Tag des Tests. Es lohnt sich, den optimalen Zeitpunkt für die Durchführung der Studie zu wählen und dabei Folgendes zu berücksichtigen: zwei Tage vor oder nach dem Menstruationszyklus;
• für jede Methode der Materialsammlung Sie sollten die Einnahme antibakterieller Medikamente einige Wochen vor dem Test nach Rücksprache mit Ihrem Arzt abbrechen, da dies die Zuverlässigkeit des Ergebnisses beeinträchtigen kann;
• für einen Urintest Um das Vorhandensein von Krankheitserregern festzustellen, ist es nicht nur notwendig, Sterilität und Hygiene aufrechtzuerhalten, sondern auch die Qualität des gesammelten Forschungsmaterials sicherzustellen, was genauere Informationen liefert. Daher ist es zulässig, mit der Urinsammlung 2-3 Stunden nach dem letzten Urinieren zu warten oder eine Morgenprobe zu verwenden, die mit hoher Wahrscheinlichkeit das Vorhandensein eines entzündlichen Prozesses anzeigt.

Anwendung von PCR und erkannte Krankheiten

Bei der Suche nach den Erregern vieler Krankheiten sollten die oben genannten Empfehlungen nicht außer Acht gelassen werden und eine verordnete ärztliche Untersuchung mittels der PCR-Diagnosemethode kann nicht nur einen Erwachsenen, sondern auch ein kleines, ungeborenes Kind im Mutterleib davor schützen schwerwiegende Komplikationen.

Tatsächlich ist es in den meisten Fällen die weibliche Hälfte der Bevölkerung, die an bestimmten Arten von Viren (HPV) leidet, was die Wahrscheinlichkeit von Gebärmutterhalskrebs oder Unfruchtbarkeit deutlich erhöht. Und angesichts der möglichen negativen Auswirkungen auf den Schwangerschaftsverlauf und die Entwicklung des Fötus sollte berücksichtigt werden, dass verschiedene Gruppen von Mikroorganismen, die sexuell übertragbar sind oder eine Immunschwäche aufweisen, schwer der einen oder anderen Gruppe von Krankheitserregern zuzuordnen sind, da sie stehen in engem Zusammenhang (z. B. TORCH-Infektionen und sexuell übertragbare Krankheiten). Aber die Polymerase-Kettenreaktion ist in der Lage, eine Fremdstruktur zu finden und so den spezifischen Typ viraler DNA im weiblichen Körper zu identifizieren.

Durch die Dekodierung der Analyseergebnisse können Sie das Vorliegen von Krankheiten bestätigen oder widerlegen. Da eine solche Analyse ein breites Spektrum an Krankheitserregern abdeckt, ist sie für die rechtzeitige Erkennung vieler Infektionen von großer Bedeutung, wie zum Beispiel:

• Nachweis einer HIV-Infektion. Schwerwiegende Beeinträchtigung der Immunität durch eine Infektion, die hauptsächlich immunkompetente Zellen betrifft, die sich auf der Oberfläche des Immunsystems an CD4-Rezeptoren befinden, die anschließend ihre Fähigkeit verlieren, sich vor Infektionen zu schützen, und nicht mehr auf das Vorhandensein viraler RNA im Blutplasma reagieren. Im Falle eines positiven Ergebnisses bei einer anonymen Untersuchung wird diese unter Hinzufügung weiterer Studien wiederholt;
• Virushepatitis, am häufigsten Hepatitis C(enthält einen RNA-Erreger), der aufgrund seiner einfachen Portabilität mit anderen Methoden schwer zu diagnostizieren ist, da die PCR-Methode optimaler für die Erkennung des Erregers im Blut oder in der Leberbiopsie ist. manifestiert sich in einem späten Stadium und bildet einen bösartigen Entzündungsprozess. Es ist jedoch zu bedenken, dass ein positives Ergebnis beim Test auf das Vorhandensein von Antikörpern im Blut (AB) und ein negatives Ergebnis der PCR-Analyse ein Hinweis auf das Vorhandensein des Virus im Körper sein kann sehr geringe Menge oder die betroffenen Zellen befinden sich im Genom der Leberzellen in einem Wartestadium und gelangen nicht in den Blutkreislauf. In solchen Fällen wird eine Reihe wiederholter Studien zur endgültigen Diagnose und Behandlungsmethode durchgeführt.
• onkogene Viren wie HPV(humanes Papillomavirus) mit mehr als 100 verschiedenen Virustypen, sexuell übertragbar oder bei medizinischen Eingriffen; die Infektion eines Neugeborenen durch die Mutter erfolgt über den Geburtskanal, wenn sie Trägerin einer Papillomavirus-Infektion ist;
• STI(sexuell übertragbare Infektionen);
• Geeignet zur Erkennung aller sexuell übertragbaren Krankheiten(, Gardnerellose) und TORCH-Infektionen;
• zeigt mit großer Genauigkeit an Vorliegen einer Mononukleose-Infektion, gekennzeichnet durch eine Schädigung des lymphatischen und retikuloendothelialen Systems (vergrößerte Lymphknoten, Milz, Leber), kann mittels PCR-Diagnostik anhand von Blutserum als Untersuchungsmaterial nachgewiesen werden. Je nach äußeren Parametern kann sich die Filatov-Krankheit durch Hautausschläge, Galle auf der Haut und einen weißen Belag auf der Zunge äußern.
• , Eindringen in das Blut von AIDS-Patienten und solchen, die sich einer Organtransplantation unterzogen haben, wobei Medikamente zur Unterdrückung des Immunsystems eingesetzt werden;
• herpetische Infektion, stellt die eine oder andere Art von Herpes dar, die die Genitalien, die Schleimhaut der Augen oder die Haut befallen kann;
• Tuberkulose. Bei Vorliegen der Hauptsymptome der Erkrankung wird nach den Ergebnissen der Bronchoskopie ein PCR-Test verordnet, der eine wesentlich schnellere Diagnose des aktiven Stadiums der Tuberkulose ermöglicht als mit der bakteriologischen oder bakterioskopischen Methode;
• virale Infektionskrankheiten wie z durch Zecken übertragene Enzephalitis(Borreliose). Es ist gekennzeichnet durch eine Schädigung der Zellen des Nervensystems, eine Vergiftung, eine Entzündung des Gehirns und die anschließende Entwicklung einer Lähmung. Zum Nachweis des Antigens mittels PCR-Diagnostik werden Blut und Liquor entnommen, um das RNA-Virus zu isolieren.
• Nachweis einer Helicobacter pylori-Infektion(was zu chronischer Gastritis, Magengeschwüren, Magentumoren führt) Mithilfe der PCR-Diagnostik können Sie DNA (genetisches Material) von Helicobacter pylori in einer Biopsie, im Kot und im Speichel nachweisen und Stämme nach dem Grad der Bösartigkeit unterscheiden.

Die PCR-Diagnostik von Infektionen entwickelt sich rasant und wird erfolgreich in der Onkologie, Gynäkologie, Urologie, Gastroenterologie, Virologie eingesetzt und die Liste wächst stetig, beschränkt sich aber nicht nur auf die Suche nach Erregern von Infektionskrankheiten. Neben anderen praktischen Anwendungen der PCR-Methode kann man auch den Einsatz von Forschung zur Feststellung der Vaterschaft und zur Identifizierung von Personen hervorheben.

Die Diagnose von Infektionskrankheiten – bakterieller und viraler Natur – zielt auf die frühzeitige Identifizierung von Krankheitserregern ab, was eine frühzeitige und wirksame Therapie ermöglicht. Die modernste Methode zur Diagnose von Infektionen ist die PCR oder Polymerase-Kettenreaktion. Was ist diese Methode und wozu dient sie?

Die Essenz der Polymerasereaktion

Jeder Mikroorganismus und jedes Virus enthält in seiner Struktur DNA- oder RNA-Moleküle. Für jeden von ihnen sind diese Verbindungen einzigartig. Wenn Sie also Nukleinsäuren in einer Blutuntersuchung bei Kindern oder Erwachsenen isolieren, können Sie eine Diagnose mit absoluter Genauigkeit stellen.

Leider ist die DNA-Konzentration in Blutproben oder anderen biologischen Materialien recht gering und kann mit herkömmlichen Diagnosemethoden nicht bestimmt werden. Um dieses Problem zu lösen, wurde die Polymerase-Kettenreaktion erfunden.

Das Wesen der PCR liegt in der speziellen Aufbereitung einer Blutprobe, wodurch die Konzentration der darin enthaltenen DNA-Moleküle ansteigt, deren Typbestimmung anschließend eine Bestimmung des Erregertyps und eine Diagnose ermöglicht.

So spenden Sie Blut für die PCR

Bei der Vorbereitung auf den Test sollten Sie sich an allgemeine Empfehlungen halten: Unmittelbar vor dem Bluttest weder trinken noch essen. Um Blut für die PCR zu spenden, müssen Sie diese Anforderungen jedoch nicht strikt einhalten, da die Genauigkeit der Studie nicht davon abhängt, ob die Analyse bei vollem oder leerem Magen durchgeführt wurde.

Welche Krankheiten können mittels PCR nachgewiesen werden?

Mittels PCR lassen sich nahezu alle viralen und bakteriellen Erkrankungen nachweisen. Zur Analyse wird nicht nur Blut verwendet, sondern auch andere biologische Materialien: Sperma, Speichel, Abstriche aus der Harnröhre und dem Gebärmutterhals. Ein Bluttest ist aufschlussreich, wenn der Erreger einer bestimmten Krankheit in das menschliche Blut gelangt. Daher wird die Blut-PCR bei folgenden Erkrankungen verschrieben:

• Virushepatitis A, B, C, D und TT;
• Cytomegalovirus;
• Herpesinfektion (Herpesviren Typ 1, 2 und 4);
• HIV-Infektion
• Enterovirus-Infektion;
• Gürtelrose;
• Röteln;
• Toxoplasmose;
• infektiöse Mononukleose;
• Listeriose.

Wenn wir die Möglichkeit der Durchführung einer PCR anderer Biomaterialien in Betracht ziehen, sollte Folgendes zur Liste der mittels PCR nachgewiesenen Krankheiten hinzugefügt werden:

• Gardnerellose;
• Salmonellose;
• (etwa 100 verschiedene Stämme des humanen Papillomavirus);
• Trichomoniasis;

Besonders relevant ist derzeit die PCR-Untersuchung des Blutes schwangerer Frauen auf das sogenannte Zytomegalievirus, Toxoplasmose, Röteln usw. Dies liegt daran, dass die genannten Krankheiten zu Störungen in der Entwicklung des Fötus führen können.

Vorteile der PCR

Nachteile der Analyse

PCR ist eine hochtechnologische Forschungsmethode und stellt hohe Anforderungen an die Laborausrüstung. Der Raum, in dem die Analyse durchgeführt wird, muss mit einem biologischen Filter ausgestattet sein, da sich ständig Hautpartikel und Speichel mit DNA-Molekülen in der Luft befinden. Die Nichtbeachtung der Arbeitstechnik mit Biomaterialien kann zu falschen Ergebnissen führen.

Bluttest – Interpretation bei Erwachsenen (PCR)

Die Interpretation der Ergebnisse dieser Studie ist nicht schwierig, da es keine Tabelle mit PCR-Bluttestnormen gibt. Im Ergebnisformular dürfen nur zwei Sätze erscheinen:

• negatives Ergebnis – der Erreger, für den die Analyse durchgeführt wurde, wurde nicht identifiziert;
• positives Ergebnis – der Körper enthält den Erreger der angegebenen Krankheit.

Sie sollten wissen, dass die PCR auch dann positiv sein kann, wenn keine klinischen Krankheitssymptome vorliegen! Die Interpretation eines PCR-Bluttests bei Kindern unterscheidet sich nicht von der bei Erwachsenen.

Wer muss sich auf PCR testen lassen?

Jeder kann Blut für Tests spenden. Eine direkte Indikation für die Studie ist ein Verdacht auf sexuell übertragbare Infektionen (Gardnerellose, HIV-Infektion). Im Falle eines versehentlichen ungeschützten Sexualkontakts hilft nur die PCR, eine frühzeitige Diagnose zu stellen, wenn eine Person mit einer Krankheit infiziert ist. Schwangere Frauen sind verpflichtet, Blut für den TORCH-Komplex zu spenden. Und auch nur Frauen.