Листья гф. ОФС.5.1.0003.15 Листья

МАКРОСКОПИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

Макроскопический анализ является одним из важнейших методов фармакогностического анализа, с помощью которого определяется соответствие исследуемого объекта наименованию, под которым он поступил на анализ, т.е. его подлинность. Макроскопический анализ состоит в определении внешних (морфологических) признаков, размеров, цвета, запаха и вкуса (только для неядовитых растений) испытуемого сырья.

Правила анализа для определения подлинности приведены в статьях ГФ XI «Листья», «Травы», «Цветки», «Плоды», «Семена», «Кора», «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы». Порядок проведения анализа можно описать общей схемой:

1. Определить морфологическую группу сырья.

2. Выделить главные диагностические признаки.

3. Проанализировать выделенные признаки.

4. Сравнить полученные данные с описанием, приведенным в разделе «Внешние признаки» НД на анализируемый вид сырья.

5. Сделать заключение о подлинности испытуемого образца.

ВВЕДЕНИЕ В МАКРОСКОПИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

Для удобства классификации ЛРС его делят на морфологические группы, соответствующие органам растений, взятым для заготовки. Данная классификация удобна тем, что для сырья одной морфологической группы приводятся сходные методики заготовки, стандартизации и т.п.

Морфологические группы сырья

1. Folia – Листья.

2. Herba – Травы.

3. Cormi – Побеги.

4. Flores – Цветки.

В период бутонизации Alabastra (бутоны).

5. Fructus – Плоды.

6. Semina – Семена.

7. Cortex – Кора.

8. Radices – Корни, Rhizomata – Корневища, Rhizomatacumradicibus – Корневища с корнями, Bulbi – Луковицы, Tubera – Клубни, Bulbotubera – Клубнелуковицы.

FOLIA – ЛИСТЬЯ

Folium – Лист

Согласно ГФ листьями в фармацевтической практике называют лекарственное сырье, представляющее собой высушенные или свежие листья или отдельные листочки сложного листа. Листья собирают обычно вполне развитые, с черешком или без черешка.

При определении внешних признаков мелкие и кожистые листья обычно исследуют сухими; крупные тонкие листья, которые, как правило, бывают смятыми, предварительно размягчают во влажной камере или путем погружения на несколько секунд в горячую воду, после чего раскладывают на стеклянной пластинке, тщательно расправляя. При этом обращают внимание на форму и размеры листовой пластинки и черешка, отмечают опушение листа (обилие и расположение волосков), характер края и жилкование, наличие эфирномасличных железок и других образований на поверхности листа или наличие вместилищ в мезофилле (лупа 10×). Свежие листья исследуют без предварительной обработки.

Размеры – длину и ширину пластинки листа, длину и диаметр черешка – определяют с помощью измерительной линейки. Цвет определяют с обеих сторон листа на сухом материале при дневном освещении, запах – при растирании листа, вкус – пробуя кусочек сухого листа или его отвар (только у неядовитых объектов).

Основными диагностическими признаками листа являются: форма листовой пластинки простого или листочка сложного листа, характер верхушки, основания и края пластинки, тип жилкования, опушение верхнего и нижнего эпидермиса, цвет в сухом состоянии.

Описание листьев:

Основное отличие сложного листа от простого – наличие нескольких листовых пластинок (простых листочков) на общем черешке. Следует иметь в виду, что некоторые простые листья очень похожи на сложные (рис. 1).

Рис. 1. Типы рассечения пластинки простого листа. Если у листа рассечения на доли не наблюдается, то его называют цельным.

У простого листа описывается форма всего листа, у сложного – отдельных листочков (рис. 2).

Рис. 2. Шаблоны для определения формы пластинок листьев и листочков: 1 – округлый, 2 – почти округлый, 3 – широкоэллиптический, 4 – эллиптический, 5 – продолговатый, 6 – узкоэллиптический, 7 – округлообратнояйцевидный, 8 – почти округлообратнояйцевидный, 9 – широкообратнояйцевидный, 10 – обратнояйцевидный, 11 – узкообратнояйцевидный, 12 – обратноланцетный, 13 – округлояйцевидный, 14 – почти округлояйцевидный, 15 – широкояйцевидный, 16 – яйцевидный, 17 – узкояйцевидный, 18 – ланцетный.

После определения формы листа описывают характер верхушки и основания листовой пластинки (рис. 3).

Рис. 3.Основные типы оснований и верхушек листовых пластинок: А – верхушки : 1 – острая, 2 – оттянутая, 3 – округлая, 4 – туповатая, 5 – усеченная, 6 – выемчатая, 7 – с «насаженным» остроконечием; Б – основания : 1 - узкоклиновидное, 2 – клиновидное, 3 – округлоклиновидное, 4 - низбегающее, 5 – усеченное, 6 – округлое, 7 – выемчатое, 8 – сердцевидное.

Кроме того, существуют особые формы листовых пластинок, описываемые как единое целое, без характеристики верхушки и основания (рис. 4).

Рис. 4. Особые формы листовых пластинок: 1 – игольчатая, 2 – сердцевидная, 3 – почковидная, 4 – стреловидная, 5 – копьевидная, 6 – серповидная.

Определяется характер края листовой пластинки (рис. 5).

Рис. 5. Основные типы края листовой пластинки: 1 – пильчатый, 2 – двоякопильчатый, 3 – зубчатый, 4 – городчатый, 5 - выемчатый, 6 – цельнокрайний

При анализе края листовой пластинки следует учитывать, что существуют промежуточные типы, например, зубчато-выемчатый, зубчато-городчатый и т.д., а также усложнения основного очертания, например, двоякопильчатый, двоякозубчатый и т.д.

Важным диагностическим признаком листьев является тип жилкования (рис. 6).

Рис.6. Основные типы жилкования листьев: 1 – перистокраевое, 2 – перистопетлевидное, 3 – перистосетчатое, 4 – пальчатокраевое, 5 – пальчатопетлевидное, 6 – параллельное, 7 – пальчатосетчатое, 8 – дуговидное.

Для облегчения определения типа жилкования листьев следует помнить, что перистый и пальчатый типы свойственны двудольным растениям, а дуговидное и параллельное жилкование присущи однодольным. У голосеменных (хвойных) тип жилкования – простой, т.е. в листе проходит одна или две жилки. Такой тип жилкования не указывается.

Опушение пластинки

Опушение пластинки – наличие волосков на её верхней и/или нижней стороне. При анализе определяют наличие волосков на верхней и нижней стороне листа, цвет опушения, его плотность (войлочное или редкое), и расположение (сплошное или по жилкам).

Последовательность анализа ЛРС морфологической группы «Листья»

По внешним признакам

I. Анализ сырья в сухом виде. Определяется:

1. Цвет верхней и нижней стороны листа.

2. Опушение.

3. Вкус (только для неядовитых объектов).

4. Запах при растирании или смачивании объекта водой.

II. Анализ после обработки (крупные тонкие листья размягчаются горячей водой, мелкие кожистые листья исследуются сухими). Определяем:

1. Консистенция листа, форма (очертания) листовой пластинки простого листа или листочков сложного листа, степень расчленения листовой пластинки.

2. Наличие или отсутствие черешка (черешковые или сидячие).

3. Край листа или листочков сложного листа.

4. Жилкование.

5. Размеры листа или листочков (в см).

6. Специфические особенности.

FLORES – ЦВЕТКИ

Flos – цветок

Цветками в фармацевтической практике называют лекарственное сырье, представляющее собой высушенные отдельные цветки или соцветия, а также их части. Цветки собирают обычно в начале цветения, некоторые в фазу бутонизации.

В сырье определяют тип соцветия, опушенность; затем сырье размачивают, опуская его на 1 мин в горячую воду, и рассматривают невооруженным глазом или с помощью лупы (10×) строение цветка (или соцветия). Цветок помещают на предметное стекло и под лупой разделяют его препаровальными иглами на отдельные части. Обращают внимание на строение околоцветника – простой (чашечковидный, венчиковидный) или двойной, строение чашечки и венчика и венчика (правильные – актиноморфные или неправильные – зигоморфные), число и форму чашелистиков (или зубчиков венчика), число и строение тычинок, число пестиков, особенности строения завязи.

Размеры – диаметр цветка (соцветия) – определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги на размоченном материале. Цвет сырья определяют при дневном освещении, запах – при растирании, вкус – пробуя кусочек сухого сырья или его отвар (только у неядовитых объектов).

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Листья ОФС.1.5.1.0003.15

Folia Взамен ст. ГФ ХI

Листьями в фармацевтической практике называют лекарственное растительное сырье, представляющее собой высушенные или свежие листья или отдельные листочки сложного листа. Листья собирают обычно вполне развитые, с черешком или без черешка.

Внешние признаки

Цельное и измельченное сырье. Подготовка объектов к анализу:

— мелкие и кожистые листья исследуют сухими;

— крупные, тонкие листья (как правило, смятые) размягчают во влажной камере или путем погружения на несколько минут в горячую воду;

— свежие листья исследуют без предварительной обработки.

Подготовленные к анализу листья раскладывают на стеклянной пластинке, тщательно расправляя, рассматривают невооруженным глазом, с помощью лупы (10×) или стереомикроскопа (8×, 16×, 24× и др.). Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

Строение (простое, сложное — непарноперистосложное, парноперистосложное, дваждыпарноперистосложное, дваждынепарно-перистосложное, пальчатосложное, тройчатосложное и др.) и размеры листовой пластинки.
Форму листовой пластинки (округлая, эллиптическая, широкоэллиптическая, узкоэллиптическая, продолговатая, яйцевидная, широкояйцевидная, узкояйцевидная, обратнояйцевидная, округлообратно-яйцевидная, широкообратнояйцевидная, ланцетная, сердцевидная, стреловидная, копьевидная, серповидная, игольчатая и др.).
Глубину рассечения листовой пластинки (пальчатолопастные, перистолопастные, тройчатолопастные, пальчатораздельные, перисто-раздельные, тройчатораздельные, пальчаторассеченные, перисто-рассеченные, тройчаторассеченные).
Характер основания (округлое, широкоокруглое, узкоокруглое, клиновидное, узкоклиновидное, ширококлиновидное, усеченное, выемчатое, сердцевидное и др.) и верхушки (острая, округлая, туповатая, выемчатая, оттянутая и др.) листовой пластинки.
Характер края листа (цельный, пильчатый, двоякопильчатый, зубчатый, городчатый, выемчатый).
Наличие черешка, его размеры.
Характер поверхности черешка (гладкая, ребристая, бороздчатая и др.).
Наличие влагалища, прилистников (свободные, сросшиеся), характеристика, размеры.
Опушение листа и черешка (обилие и расположение волосков).
Жилкование листа (у однодольных — параллельное, дуговидное; у двудольных — перистое, пальчатое; у папоротников и примитивных семенных растений (гингко) — дихотомическое).
Наличие эфирномасличных железок и других образований на поверхности листа или наличие вместилищ в мезофилле.

Размеры определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги. Измеряют длину и ширину пластинки листа, длину и диаметр черешка.

Цвет определяют с обеих сторон листа на сухом материале при дневном свете.

Запах определяют при растирании.

Вкус определяют, пробуя сухое сырье или водное извлечение листьев (только у неядовитых объектов).

Для измельченных листьев определяют измельченность — размер отверстий сита, через которое проходит смесь частиц.

Порошок. Рассматривают невооруженным глазом, с помощью лупы (10×) или стереомикроскопа (8×, 16×, 24× и др.). Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется). При рассмотрении под лупой или стереомикроскопом обращают внимание на опушенность фрагментов, характер поверхности (гладкая, шероховатая, покрытая железками и др.). Определяют запах и вкус (аналогично цельным и измельченным листьям). Определяют измельченность (размер отверстий сита, через которое проходит смесь частиц).

Микроскопия

Цельные и измельченные листья. Готовят микропрепараты в соответствии с из цельных листьев или кусочков пластинки листа с краем и жилкой, кусочков листа от основания и верхушки, кусочков черешка (если лист имеет черешок), рассматривая их с поверхности. При анализе толстых и кожистых листьев (эвкалипт, толокнянка, брусника) готовят поперечные срезы и «давленые» микропрепараты. При необходимости также готовят поперечные срезы черешков.

Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

Характер кутикулы верхнего и нижнего эпидермиса (ровная; морщинистая, в том числе продольно-морщинистая, поперечно-морщинистая, лучисто-морщинистая; штриховатая; гребневидная и др.).
Форма клеток верхнего и нижнего эпидермиса (изодиаметри-ческая — округлая, квадратная, многоугольная; полигональная — прямоугольная, овальная, ромбовидная, веретеновидная, комбинированная и др.); извилистость стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса (прямые, извилистые, волнистые, зигзагообразные, зубчатые и др.), степень извилистости; утолщенность стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса (равномерная, четковидная).
Наличие устьиц , их форма (круглая, овальная), размеры, частота встречаемости на верхнем и нижнем эпидермисе.
Тип устьичного аппарата :

— аномоцитный тип (беспорядочноклеточный) – аномоцитный (или ранункулоидный) - устьица окружены неопределенным числом клеток, не отличающихся по форме и размерам от остальных клеток эпидермиса;

— диацитный тип (двуклеточный) – устьица окружены двумя околоустьичными клетками, смежные стенки которых перпендикулярны устьичной щели;

— парацитный тип (параллельноклеточный) – с каждой стороны устьица, вдоль его продольной оси расположены по одной или более околоустьичных клеток;

— анизоцитный тип (неравноклеточный) – устьица окружены тремя околоустьичными клетками, из которых одна значительно меньше двух других;

— тетрацитный тип – устьице окружено 4 симметрично расположенными околоустьичными клетками: две клетки параллельны устьичной щели, а две другие примыкают к полюсам замыкающих клеток;

— гексацитный тип — устьице окружено 6 околоустьичными клетками: две пары расположены симметрично вдоль замыкающих клеток, а две клетки занимают полярные положения;

— энциклоцитный тип – побочные клетки образуют узкое кольцо вокруг замыкающих клеток;

— актиноцитный тип – характеризуется несколькими побочными клетками, радиально расходящимися от замыкающих клеток.

Наличие водяных устьиц (отличаются крупным размером и расположены обычно на верхушке листа или зубчика, над гидатодой).
Погруженность устьиц в эпидермис (выступающие над эпидермисом, погруженные в эпидермис).
Наличие и строение волосков на верхнем и нижнем эпидермисе (простые и головчатые, одно- и многоклеточные, одно-, дву- и многорядные, пучковые, разветвленные и неразветвленные), их размеры , особенности мест их присоединения (наличие розетки), утолщенность стенок (толстые, тонкие стенки), характер кутикулы (ровная, бородавчатая, штриховатая).
Наличие железок на верхнем и нижнем эпидермисе, их строение, размеры.
Наличие секреторных каналов, млечников, вместилищ (в паренхиме под эпидермисом).
Наличие и строение кристаллических включений (одиночные кристаллы различной формы, друзы, рафиды, стилоиды, цистолиты, кристаллический песок и др.), их локализация (в паренхиме под эпидермисом, в паренхиме в виде кристаллоносной обкладки вокруг проводящих пучков и групп волокон, редко в клетках эпидермиса), размеры .
Наличие включений запасных питательных веществ : слизи, инулина и др. (в паренхиме под эпидермисом, реже в клетках эпидермиса).
Структура мезофилла (форма клеток, однородность, расположение, наличие аэренхимы).
Строение листа (дорсовентральный, изолатеральный).
Строение проводящей системы листа (форма главной жилки; количество, форма, расположение проводящих пучков в жилке; структура проводящих пучков — расположение флоэмы и ксилемы, наличие механических тканей).
Наличие механической ткани (колленхима, склеренхимные волокна, каменистые клетки, лубяные волокна и др.).
Строение черешка: на поперечном срезе черешка листа указывают его форму в средней, базальной и апикальной части (округлая, треугольная, желобчатая, серповидная, слегка крыловидная, широко-крылатая), число и расположение проводящих пучков, наличие механической ткани (колленхимы, склеренхимы).

Порошок. Готовят микропрепараты порошка листьев в соответствии с . В микропрепаратах порошка рассматривают фрагменты листьев с главной и второстепенными жилками, фрагменты листьев с краем листовой пластинки, фрагменты верхушки листа, фрагменты в поперечном сечении, фрагменты черешка. В изучаемых частицах порошка отмечают все проявляющиеся анатомо-диагностические признаки, перечисленные для цельных и измельченных листьев. Обращают внимание на то, что ряд элементов (волоски, железки, кристаллы, друзы и пр.) может быть отделен от частиц листа; в порошке наблюдается много фрагментов тканей и отдельных элементов: волоски и их фрагменты, железки, отдельные кристаллы оксалата кальция и фрагменты кристаллоносной обкладки, механические клетки — волокна, склереиды, фрагменты секреторных каналов, вместилищ, млечников и др.

В порошке с размером частиц свыше 0,5 мм в рассматриваемых фрагментах можно различить практически все признаки, характерные для цельного и измельченного сырья. Некоторые элементы эпидермиса могут быть в виде обломков волосков, железок и др.; из-за разрушения клеток могут встречаться отдельные кристаллы, друзы и др.

Еще более затруднено выделение анатомо-диагностических признаков в порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее
0,5 мм. Здесь также могут быть фрагменты различных участков эпидермиса листа, однако по возможности больше внимания следует уделить единичным элементам: отдельным волоскам, железкам, кристаллам, особенностям клеток и пр.

В порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм обращают внимание на особенности строения клеток и наличие единичных элементов эпидермиса и мезофилла листа – отдельных волосков, железок, их фрагментов, кристаллов и др.

Описание основных диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом.

Люминесцентная микроскопия

Рассматривают сухой порошок, реже поперечный срез листа, приготовленный из цельного или измельченного сырья после предварительного размягчения во влажной камере. Наблюдается собственная (первичная) флуоресценция сырья в ультрафиолетовом свете. Наиболее яркое свечение имеют кутикула, клеточные оболочки механических тканей, элементов ксилемы, волосков, содержимое отдельных клеток или тканей мезофилла, эпидермиса листа в зависимости от их химического состава. Листья некоторых растений характеризуются ярким и специфическим свечением содержимого железок, секреторных каналов и вместилищ в зависимости от химического состава содержимого.

Качественные микрохимические и гистохимические реакции

Качественные реакции

проводят с извлечением из листьев по методикам, приведенным в фармакопейных статьях или нормативной документации.

Хроматография

Проводят анализ извлечений с помощью различных хроматографических методик с использованием стандартных образцов. Чаще всего хроматографически в извлечениях из листьев определяют компоненты эфирных масел, флавоноиды и др.

Спектр (УФ-спектр)

Анализ проводят в извлечении из листьев при наличии соответствующих указаний в фармакопейной статье или нормативной документации. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы) и минимум(ы) поглощения.

В цельном, измельченном сырье и порошке определяют:

— возможно определение экстрактивных веществ в соответствии с требованиями ;

— влажность в соответствии с требованиями ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»;

— измельченность и содержание примесей

Масса содержимого упаковки

должна соответствовать требованиям .

Зараженность вредителями запасов

Радионуклиды

Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Тяжелые металлы

Определение проводят в соответствии с .

Остаточные количества пестицидов

Определение проводят в соответствии с на стадии производственного процесса.

Микробиологическая чистота

Определение проводят в соответствии с требованиями .

Количественное определение

Определение содержания действующих веществ (индивидуальных веществ или суммы веществ в пересчете на индивидуальное) проводят различными химическими, физико-химическими или другими валидированными методами анализа в соответствии с требованиями фармакопейных статей или нормативной документации.

Косвенным методом количественного определения является определение экстрактивных веществ, извлекаемых определенным для сырья экстрагентом, в соответствии с требованиями .

Упаковка

В соответствии с требованиями .

Маркировка

В соответствии с требованиями . Маркировка вторичной упаковки должна включать указание «Продукция прошла радиационный контроль».

Транспортирование

В соответствии с требованиями .

Хранение

В соответствии с требованиями . В сухом, защищенном от света месте.

Срок годности

Срок годности должен быть обоснован фактическими данными определения стабильности по всем показателям качества лекарственного растительного сырья, заложенного на хранение в каждом из видов упаковки.

text_fields

arrow_upward

Рис. 7.1. Толокнянка обыкновенная — Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng.

Листья толокнянки — folia uvae ursi
— Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng.
Сем. вересковые — Ericaceae
Другие названия: медвежьи ушки, медвежий виноград, толокнянка боровая, мучница, толокница, костянка, толоконка

Сильно ветвистый низкорослый вечнозеленый кустарничек с простертыми побегами длиной до 2 м (рис. 7.1).
Листья очередные обратнояйцевидные, в основании клиновидные, постепенно переходящие в короткий черешок, мелкие, слегка блестящие, кожистые.
Цветки беловато-розовые, напоминают бубенчики, собраны в поникающие короткие верхушечные кисти.
Венчик кувшинчатой формы, спайнолепестный с пятизубчатым отгибом. Тычинок 10.
Пестик с верхней пятигнездной завязью.
Плод – ценокарпная несъедобная мучнистая костянка красного цвета, с 5 косточками.
Цветет в мае — июне, плоды созревают в июле — августе.

Распространение

text_fields

arrow_upward

Распространение. Лесная зона европейской части, Сибири и Дальнего Востока России, а также на Кавказе и в Карпатах. Основные районы заготовок, где встречаются продуктивные заросли, — Литва, Белоруссия, Псковская, Новгородская, Вологодская, Ленинградская и Тверская области России. За последнее время выявлены заросли в новых районах: Красноярском крае, Иркутской области и Якутии.

Местообитание. Преимущественно в сухих лиственничных и сосновых лесах (борах) с лишайниковым покровом (беломошники), а также на открытых песчаных местах, приморских дюнах, скалах, на гарях и вырубках. Светолюбивое растение. Встречается рассеянно, больших зарослей не образует.

Лекарственное сырье

text_fields

arrow_upward

Внешние признаки

Рис. 7.2. Брусника (А) и толокнянка (Б):
1 – побег; 2 – лист (вид снизу); 3 – лист (вид сверху).

Цельное сырье

Листья мелкие, кожистые, плотные, ломкие, цельнокрайные, обратнояйцевидной или продолговато-обратнояйцевидной формы, на верхушке закругленные, иногда с небольшой выемкой, к основанию клиновидно суженные, с очень коротким черешком (рис. 7.2, Б). Длина листьев 1-2,2 см, ширина 0,5-1,2 см.
Жилкование сетчатое. Листья с верхней стороны темно-зеленые, блестящие, с ясно заметными вдавленными жилками, с нижней стороны немного светлее, матовые, голые.
Запах отсутствует. Вкус сильно вяжущий, горьковатый.

Измельченное сырье

Кусочки листьев различной формы от светло-зеленого до темно-зеленого цвета, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 3 мм.
Запах отсутствует. Вкус сильно вяжущий, горьковатый.

Микроскопия

При рассмотрении листа с поверхности видны многоугольные клетки эпидермиса с прямыми и довольно толстыми стенками. Устьица крупные, округлые, с широко раскрытой устьичной щелью, окружены 8 (5-9) клетками эпидермиса (энциклоцитный тип). Крупные жилки сопровождаются обкладкой с кристаллами кальция оксалата в виде призм, их сростков и друз. У основания листа часто встречаются слегка изогнутые 2-3-клеточные волоски (рис. 7.3).

Рис. 7.3. Микроскопия листа толокнянки:

эпидермис верхней (А) и нижней (Б) стороны листа с поверхности:
1 – клетка эпидермиса;
2 – устьице;
В – волосок;
Г – призматические кристаллы вдоль жилки (в клетках обкладки).

Числовые показатели. Цельное сырье. Арбутина, определяемого йодометрическим титрованием, не менее 6 %; влажность не более 12 %; золы общей не более 4 %; золы, нерастворимой в 10 % растворе кислоты хлористоводородной, не более 2 %; побуревших и потемневших с обеих сторон листьев не более 3 %; других частей растения (веточки, плоды) не более 4 %; органической примеси не более 0,5 %; минеральной примеси не более 0,5 %. Измельченное сырье. Арбутина не менее 6 %; влажность не более 12 %; золы общей не более 4 %; золы, нерастворимой в 10 % растворе кислоты хлористоводородной, не более 2 %; побуревших и потемневших кусочков листьев не более 3 %; частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3 мм, не более 5 %; органической примеси не более 0,5 %; минеральной примеси не более 0,5 %.

Заготовка и хранение сырья

text_fields

arrow_upward

Заготовка. Сбор листьев следует проводить в два срока: весной — до цветения или в самом начале цветения (с конца апреля до середины июня) и осенью — с момента созревания плодов до их осыпания (с конца августа до середины октября). После отцветания начинается прирост молодых побегов; листья, собранные в это время, при сушке буреют и, кроме того, содержат небольшое количество арбутина. При заготовке сырья облиственные побеги (веточки) отрезают специальным ножом или отрубают мотыгой. Отрубленные ветви собирают, отряхивают от песка и мха и транспортируют к месту сушки.

Разрешены к заготовке верхушечные побеги (Cormi Uvae ursi) длиной 20-30 см, которые срезают ножом или ножницами, что повышает производительность труда сборщиков. Однако в фармацевтической практике данный вид сырья практически не встречается.

Охранные мероприятия. Не допускается обрывание веток и выдергивание растений руками. С целью сохранения зарослей необходимо чередовать участки сбора, используя один и тот же массив не чаще 1 раза в 5 лет. Целесообразно создавать заказники для толокнянки.

Сушка. В естественных условиях: на чердаках или под навесом. Сырье раскладывают рыхло, тонким слоем, периодически ворошат. Высохшие веточки обмолачивают, отбирают, отбрасывают стебли, почерневшие листья. Измельченное сырье и минеральную примесь отвеивают на сите. Выход сухого сырья 50 % по отношению к свежесобранному. Допускается искусственная сушка при температуре не выше 50 °С.

Стандартизация. ГФ XI, вып. 2, ст. 26 и Изменения № 1, 2.

Хранение. В сухом, хорошо проветриваемом помещении, упаковав в мешки. Срок годности 5 лет.

Состав толокнянки

text_fields

arrow_upward

Химический состав . Действующее вещество – фенологликозид арбутин, представляющий собой бета -D-глюкопиранозид гидрохинона (8-16 %). Листья богаты дубильными веществами гидролизуемой группы (от 7,2 до 41,6 %). В меньшем количестве содержатся метиларбутин, гидрохинон, галлоиларбутин, а также тритерпеноиды — кислота урсоловая (0,4-0,7 %), флавоноиды, катехины, фенолкарбоновые кислоты – галловая, эллаговая. В листьях толокнянки много йода (2,1-2,7 мкг/кг). Гликозид арбутин под влиянием фермента арбутазы гидролизуется на гидрохинон и глюкозу.

Качественные реакции. Используется водный отвар листьев: отвар (1:20) при взбалтывании с кристалликом железа закисного сульфата постепенно образует темно-фиолетовый осадок (арбутин); отвар листьев толокнянки при добавлении раствора квасцов железоаммонийных дает черно-синее окрашивание (дубильные вещества гидролизуемой группы), а отвар листьев брусники — черно-зеленое окрашивание (дубильные вещества конденсированной группы).

Свойства и применение толокнянки

text_fields

arrow_upward

Фармакотерапевтическая группа. Диуретическое, антисептическое средство.

Фармакологические свойства. Антисептическое действие листьев толокнянки обусловлено гидрохиноном, образующимся в организме при гидролизе арбутина и выделяющимся с мочой. Моча при этом окрашивается в зеленый или темно-зеленый цвет. Мочегонное действие препаратов толокнянки связано также с гидрохиноном. Дубильные вещества, содержащиеся в отваре толокнянки, оказывают вяжущее действие в желудочно-кишечном тракте.

Применение. Отвар листьев толокнянки применяют при заболеваниях мочевыводящих путей (мочекаменная болезнь, циститы, уретриты) как дезинфицирующее и диуретическое средство. При приеме больших доз возможны рвота, тошнота, понос и другие побочные явления. Листья толокнянки несколько раздражают эпителий мочевыделительной системы, поэтому их комбинируют с растениями, оказывающими противовоспалительное, кровоостанавливающее и мочегонное действие.

Лекарственные средства

text_fields

arrow_upward

Толокнянки листья, сырье измельченное. Диуретическое, антисептическое средство.
В составе мочегонных сборов (сборы мочегонные № 1-2; сбор урологический (мочегонный); сбор «Бруснивер-Т»; сбор «Гербафоль») и антиалкогольного сбора «Стопал».
Урифлорин, таблетки по 0,3 г (порошок листьев толокнянки). Диуретическое, антисептическое средство.

Министерство здравоохранения Российской Федерации

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

Высшего образования

ПЕРВЫЙ МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ

УНИВЕРСИТЕТ имени И.М.СЕЧЕНОВА

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

КАФЕДРА ФАРМАКОГНОЗИИ

Руководство к практическим занятиям

По фармакогнозии

Тема: Освоение методик фармакогностического анализа

Москва 2016

ТЕМА 1

МЕТОДИКИ ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА

На практических занятиях студент получает умения и практические навыки для решения профессиональных задач по анализу цельного лекарственного растительного сырья в соответствии с государственными стандартами качества.

Для реализации компетенций по контролю качества студенты должны пользоваться Государственной фармакопеей РФ (http://www.femb.ru/feml), которая отражает современные требования к качеству всех лекарственных средств, включая лекарственное растительное сырье и лекарственные растительные препараты, методы определения качества и нормы. Федеральный закон № 61 «Об обращении лекарственных средств» включает главу 3 «Государственная фармакопея».

В Федеральный государственный образовательный стандарт по специальности «Фармация» включена профессиональная компетенция:

Ø способность и готовность проводить анализ и оценивать качество лекарственного растительного сырья (используемые органы растения, гистологическая структура, химический состав действующих и других групп биологически активны веществ);

дата_______ ЗАНЯТИЕ 1

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДЛИННОСТИ ЦЕЛЬНЫХ ЛИСТЬЕВ

Самостоятельная работа (подготовка к занятию)

Задание 1. Проанализируйте ОФС. 1.5.1.0001.15 «Лекарственное растительное сырье. Фармацевтические субстанции растительного происхождения», ОФС.1.5.3.0004.15 «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах», ОФС. 1.5.1.0003.15 «Листья. Folia» Запишите определения понятий:

«Лекарственное растение » -___________________

«Лекарственное растительное сырье » - _________

«Фармацевтическая субстанция растительного происхождения» -

«Подлинность » - _____________________________

Лекарственное растительное сырье «Листья » - ____

Какой документ регламентирует проведение анализа лекарственного растительного сырья «листья»? ___

Задание 2. Зарисуйте форму листьев ландыша майского, крапивы двудомной, толокнянки обыкновенной, наперстянки шерстистой.

Задание 3. Зарисуйте жилкование листьев подорожника большого и наперстянки крупноцветковой.

Задание 4. Зарисуйте край листа наперстянки пурпуровой, мяты перечной, ландыша майского, мать-и-мачехи.

Задание 5. Зарисуйте типы устьичных комплексов листьев брусники обыкновенной, мяты перечной, вахты трехлистной, красавки обыкновенной, ландыша майского и приведите их названия.

Задание 6. Зарисуйте типы простых и головчатых волосков и приведите примеры ЛРС «листья», где они встречаются.

Простые волоски	Головчатые волоски
Строение	Рисунок	ЛРС	Строение	Рисунок	ЛРС
одноклеточные, гладкие			одноклеточная головка на одноклеточной ножке
Одноклеточные «ретортовидные»			двуклеточная головка на одноклеточной ножке
2–4-клеточные, с бородавчатой поверхностью			одноклеточная головка на многоклеточной ножке
3–4-клеточные, верхняя клетка длинная, сильно изогнутая			многоклеточная головка на одноклеточной ножке
			многоклеточная головка на многоклеточной ножке

Запишите, в какой ткани располагаются волоски:________________________________

Задание 7. Зарисуйте типы включений оксалата кальция в листьях крапивы двудомной, ландыша майского, кассии (сенны) остролистной, красавки обыкновенной.

Запишите, в какой ткани располагаются включения оксалата кальция: ____________

Задание 8. Зарисуйте секреторные структуры, встречающиеся в листьях мяты перечной, полыни горькой, эвкалипта прутовидного и укажите место их нахождения.

«Входной контроль сдан» ___________________ «____»________ 20___ г.

(подпись преподавателя)

РАБОТА НА ЗАНЯТИИ

Обратите внимание:

Ø Подлинность ЛРС «листья» во время занятия устанавливают в соответствии с разделами ФС «Внешние признаки» и «Микроскопия».

Ø При изучении внешних признаков листьев размеры и форму (кроме кожистых листьев) определяют визуально на размоченном сырье, остальные признаки – на сухом сырье. Запах устанавливают при растирании сырья. Вкус определяют только у неядовитых растений в водном извлечении или при разжевывании сырья (не глотая).

Ø При микроскопическом анализе образца необходимо установить локализацию диагностических признаков по тканям (эпидермис, мезофилл).

Ø Нормативной документацией пользуются только на заключительном этапе анализа сырья для сравнения полученных результатов и написания заключения о соответствии подлинности предложенного образца. При несоответствии образца сырья требованиям ФС необходимо указать, по каким разделам имеется несоответствие.

Задача 1. Проведите анализ предложенного образца сырья по разделам «Внешние признаки»» и «Микроскопия» НД. Оформите протокол анализа.

ПРОТОКОЛ АНАЛИЗА

На анализ поступило цельное лекарственное растительное сырье (русское, латинское названия )_____

Производящее(ие) растение (я) (русское, латинское названия )________________________

Семейство (русское, латинское названия )__________

Качество анализируемого ЛРС регламентирует (название, номер )_____________________

Сырье представляет собой_______________________

Задание 1. Проведите макроскопический анализ сырья и опишите его внешние признаки в виде таблицы:

Задание 2. Проведите микроскопический анализ сырья.

1. Запишите методику приготовления микропрепарата листа с поверхности: _________

2. Приготовьте микропрепарат листа _________________ с поверхности, изучите его, зарисуйте анатомическое строение и приведите обозначения признаков.

3. Заполните таблицу распределения диагностических признаков по тканям:

4. Сделайте заключение о соответствии лекарственного растительного сырья разделам «Внешние признаки» и «Микроскопия» ФС.

Заключение. Поступившее на анализ сырье ________ ___соответствует (не соответствует) требованиям статьи_____ ГФ ХIII, разделы «Внешние признаки» и «Микроскопия».

Задача 2. Ознакомьтесь с образцами гербария лекарственного растительного сырья мать-и-мачехи обыкновенной, подорожника большого, видов эвкалипта, шалфея лекарственного, мяты перечной, брусники обыкновенной, толокнянки обыкновенной, крапивы двудомной.

«Протокол занятия зачтен» ___________________ «____»________ 20___ г.

(подпись преподавателя)

Справочные материалы

Государственная фармакопея Российской Федерации XIII издания, т. 2

ОФС.1.5.1.0001.15 Лекарственное растительное сырье. Фармацевтические субстанции

растительного происхождения

Требования настоящей общей фармакопейной статьи распространяются на лекарственное растительное сырье и фармацевтические субстанции растительного происхождения.

Основные термины и определения

Лекарственное растительное сырье - свежие или высушенные растения, либо их части, используемые для производства лекарственных средств организациями-производителями лекарственных средств или изготовления лекарственных средства аптечными организациями, ветеринарными аптечными организациями, индивидуальными предпринимателями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность.

Фармацевтическая субстанция растительного происхождения - стандартизованное лекарственное растительное сырье, а также вещество/вещества растительного происхождения и/или их комбинации, продукты первичного и вторичного синтеза растений, в том числе, полученные из культуры растительных клеток, суммы биологически активных веществ растений, продукты, полученные путем экстракции, перегонки, ферментации или другим способом переработки лекарственного растительного сырья, и применяемые для профилактики и лечения заболеваний.

Лекарственный растительный препарат - лекарственный препарат, произведенный или изготовленный из одного вида лекарственного растительного сырья или нескольких видов такого сырья и реализуемый в расфасованном виде во вторичной (потребительской) упаковке.

Лекарственное растительное сырье может быть представлено различными морфологическими группами: трава, листья, цветки, плоды, семена, кора, почки, корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы и другие.

По измельченности лекарственное растительное сырье может быть:

Цельное;

Измельченное;

Порошок.

Различают лекарственное растительное сырье по наличию основных групп биологически активных веществ, используемых для стандартизации лекарственного растительного сырья, например, сырье, содержащее флавоноиды, сердечные гликозиды, алкалоиды, антрацен производные, дубильные вещества и др.

По назначению лекарственное растительное сырье разделяют на сырье:

Используемое для производства лекарственных растительных

препаратов (например, измельченные в пачках цветки, порошок в фильтр- пакетах);

Используемое для изготовления лекарственных растительных

препаратов (например, настоев, отваров).

ПРОИЗВОДСТВО

Лекарственное растительное сырье и фармацевтические субстанции растительного происхождения получают от культивируемых или дико растущих растений. Для обеспечения качества лекарственного растительного сырья и фармацевтических субстанций растительного происхождения необходимо соблюдать соответствующие правила культивирования, заготовки, сушки, измельчения и условий хранения. В лекарственном растительном сырье и фармацевтических субстанциях

растительного происхождения допускается содержание посторонних примесей, как органического (части других неядовитых растений), так и минерального (земля, песок, камешки) происхождения в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Лекарственное растительное сырье и фармацевтические субстанции растительного происхождения, используемые для производства и изготовления лекарственных средств, должны соответствовать требованиям соответствующих фармакопейных статей или нормативной документации.

Для проведения анализа с целью определения соответствия качества лекарственного растительного сырья и фармацевтических субстанций растительного происхождения и получаемых из них лекарственных растительных препаратов требованиям фармакопейной статьи или нормативной документации установлены единые требования к отбору проб (в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»).

При изготовлении из лекарственного растительного сырья и фармацевтических субстанций растительного происхождения настоев и отваров определяется коэффициент водопоглощения и расходный коэффициент в соответствии с требованиями ОФС «Определение коэффициента водопоглощения и расходного коэффициента лекарственного растительного сырья».

ПОКАЗАТЕЛИ КАЧЕСТВА И МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ

Подлинность. Лекарственное растительное сырье идентифицируют по макроскопическим (внешним) и микроскопическим (анатомическим) признакам (в соответствии с требованиями ОФС на морфологическую группу сырья и ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»), а также определяют наличие в анализируемом лекарственном растительном сырье основных групп биологически активных веществ, подтверждающих его подлинность (в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и растительных препаратах»). Для этого используют методы физико-химического, химического, гистохимического и микрохимического анализа.

Измельченность. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Влажность. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Зола общая. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола общая». Не распространяется на культуру растительных клеток.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте». Не распространяется на культуру растительных клеток.

Органическая и минеральная примесь. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Не распространяется на культуру растительных клеток.

Зараженность вредителями запасов. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов». Данный показатель оценивается в процессе хранения лекарственного растительного сырья и при его поступлении в переработку.

Тяжелые металлы. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» на стадии технологического процесса.

Микробиологическая чистота. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Содержание биологически активных веществ, обусловливающих фармакологическое действие лекарственного растительного сырья, определяют методом, указанным в фармакопейной статье или нормативной документации. Методики, используемые для количественного определения основных групп биологически активных веществ должны быть валидированы.

В зависимости от назначения лекарственного растительного сырья для одного и того же вида лекарственного растительного сырья могут быть приведены нормы содержания одной, двух и более групп биологически активных веществ.

В лекарственном растительном сырье проводят количественное определение:

Экстрактивных веществ - в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах»;

Эфирного масла - в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах»;

Жирного масла - в соответствии с требованиями ОФС «Масла жирные растительные»;

Дубильных веществ - в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Других групп биологически активных веществ в соответствии с требованиями фармакопейных статей или нормативной документации.

Содержание биологически активных веществ, относящихся к ядовитым и сильнодействующим веществам (сердечных гликозидов, алкалоидов и др.), указывают с обозначением двух пределов «не менее» и «не более». В случае завышенного содержания этих групп биологически активных веществ в лекарственном растительном сырье допускается его дальнейшее использование для производства лекарственных препаратов, которое рассчитывается по формуле:

где т - количество лекарственного растительного сырья, необходимое для производства лекарственных растительных препаратов, г;

А - прописанное количество лекарственного растительного сырья, г:

Б - фактическое количество единиц действия в сырье или содержание биологически активных действующих веществ в 1 г сырья в %;

В - стандартное содержание единиц действия в сырье или содержание биологически активных действующих веществ в 1 г сырья в %.

Упаковка, маркировка и транспортирование. Осуществляется в соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных и препаратов ».

Хранение. Осуществляется в соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». В случае использования дезинфицирующих, дезинсектирующих и других средств при хранении лекарственного растительного сырья, необходимо подтвердить, что они не оказывают влияния на сырье и практически полностью удаляются после обработки.

ОФС. 1.5.1.0003.15 Листья. Folia.

Внешние признаки. Цельное и измельченное сырье. Подготовка объектов к анализу:

Мелкие и кожистые листья исследуют сухими;

Крупные, тонкие листья (как правило, смятые) размягчают во влажной камере или путем погружения на несколько минут в горячую воду;

Свежие листья исследуют без предварительной обработки.

Подготовленные к анализу листья раскладывают на стеклянной пластинке, тщательно расправляя, рассматривают невооруженным глазом, с помощью лупы (10х) или стереомикроскопа (8*, 16*, 24* и др.). Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

1. Строение (простое, сложное - непарноперистосложное, парноперисгосложное, дваждыпарноперистосложное, дваждынепарно- перистосложное, пальчатосложное, тройчатосложное и др.) и размеры листовой пластинки.

2. Форму листовой пластинки (округлая, эллиптическая, широкоэллиптическая, узкоэллиптическая, продолговатая, яйцевидная, широкояйцевидная, узкояйцевидная, обратнояйцевидная, округлообратнояйцевидная, широкообратнояйцевидная, ланцетная, сердцевидная, стреловидная, копьевидная, серповидная, игольчатая и др.).

3. Глубину рассечения листовой пластинки (пальчатолопастные, перистолопастные, тройчатолопастные, пальчатораздельные, перистораздельные, тройчатораздельные, пальчаторассеченные, перисто- рассеченные, тройчаторассеченные).

4. Характер основании (округлое, широкоокруглое, узкоокруглое, клиновидное, узкоклиновидное, ширококлиновидное, усеченное, выемчатое, сердцевидное и др.) и верхушки (острая, округлая, туповатая, выемчатая, оттянутая и др.) листовой пластинки.

5. Характер края листа (цельный, пильчатый, двоякопильчатый, зубчатый, городчатый, выемчатый).

6. Наличие черешка, его размеры.

7. Характер поверхности черешка (гладкая, ребристая, бороздчатая и др.).

8. Наличие влагалища, прилистников (свободные, сросшиеся), характеристика, размеры.

9. Опушение листа и черешка (обилие и расположение волосков).

10. Жилкование листа (у однодольных - параллельное, дуговидное; у двудольных - перистое, пальчатое; у папоротников и примитивных семенных растений (гингко) - дихотомическое).

11. Наличие эфирномасличных железок и других образований на поверхности листа или наличие вместилищ в мезофилле.

Размеры определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги. Измеряют длину и ширину пластинки листа, длину и диаметр черешка.

Цвет определяют с обеих сторон листа на сухом материале при дневном свете.

Запах определяют при растирании.

Вкус определяют, пробуя сухое сырье или водное извлечение листьев (только у неядовитых объектов).

Для измельченных листьев определяют измельченность - размер отверстий сита, через которое проходит смесь частиц.

Порошок. Рассматривают невооруженным глазом, с помощью лупы (10х) или стереомикроскопа (8 * , 16*, 24* и др.). Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется). При рассмотрении под лупой или стереомикроскопом обращают внимание на опушенность фрагментов, характер поверхности (гладкая, шероховатая, покрытая железками и др.). Определяют запах и вкус (аналогично цельным и измельченным листьям). Определяют измельченность (размер отверстий сита, через которое проходит смесь частиц).

Микроскопия. Цельные и измельченные листья. Готовят микропрепараты в соответствии с ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» из цельных листьев или кусочков пластинки листа с краем и жилкой, кусочков листа от основания и верхушки, кусочков черешка (если лист имеет черешок), рассматривая их с поверхности. При анализе толстых и кожистых листьев (эвкалипт, толокнянка, брусника) готовят поперечные срезы и «давленые» микропрепараты. При необходимости также готовят поперечные срезы черешков.

Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

1. Характер кутикулы верхнего и нижнего эпидермиса (ровная; морщинистая, в том числе продольно-морщинистая, поперечно-морщинистая, лучисто-морщинистая; штриховатая; гребневидная и др.).

2. Форма клеток верхнего и нижнего эпидермиса (изодиаметрическая - округлая, квадратная, многоугольная; полигональная - прямоугольная, овальная, ромбовидная, веретено видная, комбинированная и др.); извилистость стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса (прямые, извилистые, волнистые, зигзагообразные, зубчатые и др.), степень извилистости; утолщенность стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса (равномерная, четковидная).

3. Наличие устьиц, их форма (круглая, овальная), размеры, частота встречаемости на верхнем и нижнем эпидермисе.

4. Тип устьичного аппарата:

Аномоцитный тип (беспорядочноклеточный) - аномоцитный (или ранункулоидный) - устьица окружены неопределенным числом клеток, не отличающихся по форме и размерам от остальных клеток эпидермиса;

Диацитный тип (двуклеточный) - устьица окружены двумя околоустьичными клетками, смежные стенки которых перпендикулярны устьичной щели;

Парацитный тип (параллельноклеточный) - с каждой стороны устьица, вдоль его продольной оси расположены по одной или более околоустьичных клеток;

Анизоцитный тип (неравноклеточный) - устьица окружены тремя околоустьичными клетками, из которых одна значительно меньше двух других;

Тетрацитный тип - устьице окружено 4 симметрично расположенными околоустьичными клетками: две клетки параллельны устьичной щели, а две другие примыкают к полюсам замыкающих клеток;

Гексацитный тип - устьице окружено 6 околоустьичными клетками: две пары расположены симметрично вдоль замыкающих клеток, а две клетки занимают полярные положения;

Энциклоцитный тип - побочные клетки образуют узкое кольцо вокруг замыкающих клеток;

Актиноцитный тип - характеризуется несколькими побочными клетками, радиально расходящимися от замыкающих клеток.

5. Наличие водяных устьиц (отличаются крупным размером и расположены обычно на верхушке листа или зубчика, над гидатодой).

6. Погруженность устьиц в эпидермис (выступающие над эпидермисом, погруженные в эпидермис).

7. Наличие и строение волосков на верхнем и нижнем эпидермисе (простые и головчатые, одно- и многоклеточные, одно-, дву- и многорядные, пучковые, разветвленные и неразветвленные), их размеры, особенности мест их присоединения (наличие розетки), утолщенность стенок (толстые, тонкие стенки), характер кутикулы (ровная, бородавчатая, ш гриховатая).

8. Наличие железок на верхнем и нижнем эпидермисе, их строение, размеры.

9. Наличие секреторных каналов, млечников, вместилищ (в паренхиме под эпидермисом).

10. Наличие и строение кристаллических включений (одиночные кристаллы различной формы, друзы, рафиды, стилоиды, цистолиты, кристаллический песок и др.), их локализация (в паренхиме под эпидермисом, в паренхиме в виде кристаллоносной обкладки вокруг проводящих пучков и групп волокон, редко в клетках эпидермиса),

11. Наличие включений запасных питательных веществ: слизи, инулина и др. (в паренхиме под эпидермисом, реже в клетках эпидермиса).

12. Структура мезофилла (форма клеток, однородность, расположение, наличие аэренхимы).

13. Строение листа (дорсовентральный, изолатеральный).

14. Строение проводящей системы листа (форма главной жилки; количество, форма, расположение проводящих пучков в жилке; структура проводящих пучков - расположение флоэмы и ксилемы, наличие механических тканей).

15. Наличие механической ткани (колленхима, склеренхимные волокна, каменистые клетки, лубяные волокна и др.).

16. Строение черешка: на поперечном срезе черешка листа указывают его форму в средней, базальной и апикальной части (округлая, треугольная, желобчатая, серповидная, слегка крыловидная, ширококрылатая), число и расположение проводящих лучков, наличие механической ткани (колленхимы, склеренхимы).

Порошок. Готовят микропрепараты порошка листьев в соответствии с ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». В микропрепаратах порошка рассматривают фрагменты листьев с главной и второстепенными жилками, фрагменты листьев с краем листовой пластинки, фрагменты верхушки листа, фрагменты в поперечном сечении, фрагменты черешка. В изучаемых частицах порошка отмечают все проявляющиеся анатомо-диагностические признаки, перечисленные для цельных и измельченных листьев. Обращают внимание на то, что ряд элементов (волоски, железки, кристаллы, друзы и пр.) может быть отделен от частиц листа; в порошке наблюдается много фрагментов тканей и отдельных элементов: волоски и их фрагменты, железки, отдельные кристаллы оксалата кальция и фрагменты кристаллоносной обкладки, механические клетки - волокна, склереиды, фрагменты секреторных каналов, вместилищ, млечников и др.

Еще более затруднено выделение анатомо-диагностических признаков в порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм. Здесь также могут быть фрагменты различных участков эпидермиса листа, однако по возможности больше внимания следует уделить единичным элементам: отдельным волоскам, железкам, кристаллам, особенностям клеток и пр.

В порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм обращают внимание на особенности строения клеток и наличие единичных элементов эпидермиса и мезофилла листа - отдельных волосков, железок, их фрагментов, кристаллов и др.

Описание основных диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом.

Люминесцентная микроскопия. Рассматривают сухой порошок, реже поперечный срез листа, приготовленный из цельного или измельченного сырья после предварительного размягчения во влажной камере. Наблюдается собственная (первичная) флуоресценция сырья в ультрафиолетовом свете. Наиболее яркое свечение имеют кутикула, клеточные оболочки механических тканей, элементов ксилемы, волосков, содержимое отдельных клеток или тканей мезофилла, эпидермиса листа в зависимости от их химического состава. Листья некоторых растений характеризуются ярким и специфическим свечением содержимого железок, секреторных каналов и вместилищ в зависимости от химического состава содержимого.

Качественные микрохимические и гистохимические реакции

проводят в микропрепаратах листьев (на поперечных срезах, препаратах с поверхности, в порошке), чаще всего с целью обнаружения толстой кутикулы, эфирного масла (может быть представлено в виде капель или заключено во вместилища и/или канальцы), а также слизей в соответствии с требованиями ОФС «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Качественные реакции проводят с извлечением из листьев но методикам, приведенным в фармакопейных статьях или нормативной документации.

Хроматографии. Проводят анализ извлечений с помощью различных хроматографических методик с использованием стандартных образцов. Чаще всего хроматографически в извлечениях из листьев определяют компоненты эфирных масел, флавоноиды и др.

Спектр (УФ-спектр). Анализ проводят в извлечении из листьев при наличии соответствующих указаний в фармакопейной статье или нормативной документации. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы) и минимум(ы) поглощения.

В цельном, измельченном сырье и порошке определяют:

Возможно определение экстрактивных веществ в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах»;

Влажность в соответствии с требованиями ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»;

хлористоводородной кислоте, в соответствии с требованиями ОФС «Зола общая» и ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»;

Измельченность и содержание примесей в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельченности и

Масса содержимого упаковки должна соответствовать требованиям ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Зараженность вредителями запасов. Определение проводят в соответствии с ОФС

«Определение степени зараженности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Собранные во время цветения и высушенные листья дикорастущего и культивируемого многолетнего травянистого растения подорожника большого - Plantago major, сем. подорожниковых - Plantaginaceae.

Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные или частично измельченные листья, скрученные, широкояйцевидные или широкоэллиптические, цельнокрайние или слегка зубчатые, с 3-9 продольными дугообразными жилками, суженные в широкий черешок различной длины. В месте обрыва черешка видны длинные остатки темных нитевидных жилок. Длина листьев с черешком до 24 см, ширина 3-11 см.

Цвет зеленый или буровато - зеленый. Запах слабый. Вкус слабо - горьковатый.

Фиалки трава ГФ XIII ФС.2.5.0044.15

Violae herba Взамен ГФ XI, вып. 2, ст. 62

Собранная в фазу массового цветения и высушенная трава одно- или двухлетних дикорастущих травянистых растений фиалки трехцветной – Viola tricolor . и фиалки полевой – Viola arvensis, сем. фиалковых – Violaceaе.

Внешние признаки. Цельное сырье. Смесь цельных или частично измельченных олиственных стеблей с цветками и плодами разной степени развития, отдельных стеблей, листьев, цветков, плодов. Стебли простые или ветвистые, слаборебристые, внутри полые, длиной до 25 см. Листья очередные, обычно черешковые, простые, с 2 крупными лировидными перисторассеченными или перистораздельными прилистниками; нижние – широкояйцевидные, верхние – продолговатые, по краю тупозубчатые или крупногородчатые, длиной до 6 см, шириной до 2 см. Цветки одиночные, неправильные. Чашечки из 5 зеленых овальных или ланцетовидных чашелистиков. Венчик из 5 неравных лепестков, нижний крупнее остальных со шпорцем у основания. У фиалки полевой лепестки короче чашечки или почти равны ей, у фиалки трехцветной – лепестки длиннее чашечки. Плод – одногнездная продолговато-яйцевидная коробочка, раскрывающаяся 3 створками. Семена мелкие, овальные, гладкие.

Цвет листьев – зеленый, стеблей – зеленый, светло-зеленый или желтовато-зеленый, верхних лепестков у фиалки трехцветной – темно-фиолетовый, светло-фиолетовый или синий, у фиалки полевой – светло-желтый или белый, иногда слабо-фиолетовый, средних лепестков у фиалки трехцветной – фиолетовый, сине-фиолетовый или желтый, у фиалки полевой – светло-желтый, нижних лепестков у фиалки трехцветной – желтый с 5 – 7 темными продольными полосами, по краю фиолетовый, у фиалки полевой – желтый, у основания с 5 – 7 темными продольными полосами, по краю светло-желтый; плодов – зеленый, желтовато-зеленый, зеленовато-желтый;семян – светло-коричневый. Запах слабый. Вкус водного извлечения сладковатый, слизистый.

Солодки корни ГФ XIII ФС.2.5.0040.15

Glycyrrhizae radices Взамен ГФ X, ст. 573 (изм. № 1 от 17.02.1999)

Собранные в разное время года неочищенные (naturales) или очищенные (mundatae) от пробки корни и подземные побеги многолетних дикорастущих травянистых растений солодки голой - Glycyrrhiza glabra и солодки уральской - Glycyrrhiza uralensis, сем. бобовых - Fabaceae.

Внешние признаки. Цельное сырье.Куски корней и подземных побегов цилиндрической формы различной длины и толщины. Встречаются куски корней, переходящие в сильно разросшееся корневище более 10 см толщиной.

Поверхность неочищенных корней и побегов продольно-морщинистая, покрытая серовато-коричневой или коричневой пробкой; очищенное сырье снаружи от светло-желтого до коричневато-желтого цвета с незначительными остатками пробки; излом от светло-желтого до желтовато-оранжевого цвета, зернисто-волокнистый.

При рассмотрении под лупой (10×) или стереомикроскопом (16×) на поперечном срезе корней и подземных побегов видны многочисленные широкие сердцевинные лучи и вытянутые группы сосудов, придающие хорошо заметное лучистое строение. Вдоль сердцевинных лучей часто образуются радиальные трещины. У побегов имеется небольшая сердцевина, у корней сердцевины нет. Запах слабый. Вкус водного извлечения сладкий, приторный, слегка раздражающий.

Трава термопсиса ланцетного ГФ XI, вып. 2, ст. 59

HERBA THERMOPSIDIS LANCEOLATAE

Собранная в начале цветения до появления плодов и высушенная трава дикорастущего многолетнего травянистого растения термопсиса ланцетного - Thermopsis lanceolata, сем. бобовых -Fabaceae.

Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные или частично измельченные стебли с листьями и цветками. Стебли простые или ветвистые, бороздчатые, слабоопушенные, длиной до 30 см. Листья очередные, тройчатые на коротких черешках (4-7 мм), с продолговатыми или продолговато - ланцетными листочками длиной 30-60 мм, шириной 5-12 мм. Сверху почти голые, снизу покрытые прижатыми волосками. Прилистники ланцетовидные, почти вдвое короче дольки листа, опушены прижатыми волосками. Цветки собраны мутовками в негустую верхушечную кисть. Чашечка колокольчатая, пятизубчатая с неравными по длине зубцами, опушена прижатыми волосками. Венчик мотыльковый, длиной 25-28 мм, верхний лепесток (флаг) с почти округлым отгибом, на верхушке с глубоким и узким вырезом; два боковых лепестка (крылья) лишь немного короче флага; нижние сросшиеся лепестки (лодочка) в 1,5-2 раза шире крыльев. Тычинок 10, все свободные; пестик 1 с длинным столбиком и шелковисто - опушенной завязью.

Цвет стеблей и листьев серовато - зеленый, цветков - желтый. Запах слабый, своеобразный. Вкус не определяется.

Тема 4.4. Лекарственное растительное сырье, регулирующее систему пищеварение:

Лекарственное растительное сырье, влияющее на секрецию пищеварительных желез.