विज्ञान आणि शिक्षणाच्या आधुनिक समस्या. अपोप्टोसिस अपोप्टोसिस मार्करचे मूल्यांकन करण्याच्या पद्धती

सेल डिव्हिजन ही सर्वसाधारणपणे एकसमान प्रक्रिया असते ज्याला सेल सायकल म्हणतात. तेथे मोठ्या संख्येने "नियंत्रण बिंदू" आहेत ज्यामध्ये सेलचे सायकलच्या एका टप्प्यातून दुसर्या टप्प्यात संक्रमण नियंत्रित केले जाते. एक किंवा अधिक "चेकपॉईंट" नष्ट केल्याने अनियंत्रित प्रसार आणि सेल मृत्यू, विशेषतः ऍपोप्टोसिस दोन्ही होऊ शकतात. सर्व वैशिष्ट्यपूर्ण चिन्हे (क्रोमॅटोलिसिस, प्रक्षोभक प्रतिसादाची अनुपस्थिती, सेल्युलर कॅनिबलिझम इ.) सह ऍपोप्टोसिसचे आकारशास्त्रीय चित्र एल. ग्रेपर यांनी वर्णन केले आहे आणि "पेशींचे शारीरिक निर्मूलन" असे म्हटले आहे. 1971 मध्ये, जे. केर यांनी इकडे-तिकडे झाडावरून पडणाऱ्या पानांशी साधर्म्य साधून “अपोप्टोसिस” (लॅटिन अरो - विथ, ptosis - to fall) हा शब्द सुचविला. अपोप्टोसिस दरम्यान, तीन टप्पे वेगळे केले जातात - लवकर (पेशीच्या आकारात घट, मोठ्या तुकड्यांमध्ये डीएनए विखंडन), मध्यवर्ती (पुढील डीएनए विखंडन) आणि उशीरा (अपोप्टोटिक बॉडी). अपोप्टोसिस मानवी प्लेसेंटाच्या विकासामध्ये महत्वाची भूमिका बजावते. गर्भधारणा जसजशी वाढत जाते, तसतसे सामान्यपणे कार्यरत प्लेसेंटामध्ये अपोप्टोटिक बदलांमध्ये वाढ होते.

Tertemiz et al.
त्यांच्या कामात असे दिसून आले की अपोप्टोसिस प्लेसेंटल व्हॅस्कुलोजेनेसिसच्या शारीरिक नियमनाच्या यंत्रणेमध्ये सामील आहे. प्लेसेंटाचे व्हॅस्कुलोजेनेसिस गर्भधारणेच्या 21 व्या दिवशी सुरू होते आणि त्यात हेमॅन्गिओब्लास्ट्स आणि एंजियोजेनिक सेल बेटांचा समावेश होतो. हिस्टोलॉजिकल (हेमॅटॉक्सीलिन आणि इओसिनने डागलेल्या स्लाइड्स), इम्युनोहिस्टोकेमिकल (CD31 शोधणे), आण्विक अनुवांशिक (CD31-TUNEL - TdT- मध्यस्थ X-dUTP निक एंड लेबलिंग) पद्धती आणि ट्रान्समिशन मायक्रोकॉपी वापरून प्लेसेंटाच्या व्हॅस्कुलोजेनेसिसचा अभ्यास केला गेला. अभ्यासात असे दिसून आले आहे की एंजियोजेनिक सेल बेटांमध्ये CD31-पॉझिटिव्ह पेशींचा अभाव आहे. तथापि, CD31 अभिव्यक्ती आदिम केशिकांच्या पेशींमध्ये आणि संवहनी क्षेत्रांमध्ये स्थित अनेक स्ट्रोमल पेशींमध्ये आढळून आली. हेमॅटॉक्सिलिन आणि इओसिनने डागलेल्या तयारीच्या आकृतीशास्त्रीय अभ्यासातून या पेशींमध्ये ऍपोप्टोसिसची चिन्हे दिसून आली - कॅरियोपिक्नोसिस आणि अपोप्टोटिक बॉडी. प्लेसेंटामध्ये ऍपोप्टोसिस आणि व्हॅस्कुलोजेनेसिसची तीव्रता थेट प्रमाणात होती.

गर्भधारणा लवकर होणे, एक्टोपिक गर्भधारणा आणि प्रीक्लेम्पसिया यासारख्या गर्भधारणेच्या विकारांमध्ये ऍपोप्टोसिसची पातळी वाढते.
विलस स्ट्रोमामध्ये सायटोट्रोफोब्लास्ट प्रसार आणि भेदभाव आणि रक्तवहिन्यासंबंधीच्या विकासासाठी इंटरव्हिलस स्पेसमधून ऑक्सिजन आणि पोषक तत्वांचा पुरेसा पुरवठा आवश्यक असतो. गर्भधारणेच्या गुंतागुंतांपैकी, गर्भाशयाच्या गर्भाशयात वाढ मंदता हे प्रसूतिपूर्व मृत्यूचे एक प्रमुख कारण आहे. अपोप्टोसिसच्या अनियमनमुळे सिंसिटिओट्रोफोब्लास्ट पेशींची संख्या कमी होते, ज्यामुळे गर्भाला पोषक तत्वांचा पुरवठा कमी होतो आणि गर्भाच्या अंतर्गर्भीय विकासास मंद होतो. लेव्ही वगैरे. इंट्रायूटरिन वाढ मंदता प्रीक्लॅम्पसिया आणि तंबाखूच्या धूम्रपानाशी संबंधित आहे - अशा परिस्थिती ज्यामुळे प्लेसेंटल टिश्यूची ऑक्सिजन उपासमार होते. S. Y. Dai et al च्या कामात. वाईट सवयी नसलेल्या आणि गर्भधारणा नसलेल्या, परंतु अंतर्गर्भीय वाढ मंदावली असलेल्या स्त्रियांच्या नाळेची तपासणी करण्यात आली. लेखकांनी सुचवले की ऑक्सिजन उपासमारीच्या परिस्थितीत प्लेसेंटल पेशींमध्ये ऍपोप्टोटिक बदल हे हायपोक्सिया स्थितीत सक्रिय घटकांद्वारे नियंत्रित केले जाऊ शकतात (हायपोक्सिया-इंड्युसिबल घटक) - एचआयएफ-ला, एचआयएफ-2 ए, एचआयएफ-1 पी.

HIF-1 हा हायपोक्सियाशी सेल अनुकूलता सुनिश्चित करणारा मुख्य घटक आहे.
हे एरिथ्रोपोइसिस, ग्लायकोलिसिस आणि एंजियोजेनेसिससाठी जबाबदार असलेल्या अनेक जनुकांच्या अभिव्यक्तीमध्ये बदल करू शकते. HIF-lp heterodimer सर्व परिस्थितींमध्ये सर्व प्लेसेंटल पेशींमध्ये आढळून येत असताना, HIF-la हा केवळ हायपोक्सिया अंतर्गत आढळतो. कमी सामान्यपणे, ऑक्सिजन उपासमारीच्या परिस्थितीत, HIF-2a, ज्याला EPAS-1 देखील म्हणतात, पेशींमध्ये आढळून येते. HIF-la आणि -2a mRNA गर्भधारणेदरम्यान प्लेसेंटामध्ये आढळतात, परंतु गर्भधारणेच्या अवस्थेनुसार त्यांची पातळी लक्षणीयरीत्या बदलते. HIF-la mRNA ची पातळी स्थिर असताना, HIF-2a mRNA ची पातळी जसजशी गर्भधारणा वाढत जाते तसतसे वाढते. HIF-la च्या विरूद्ध, HIF-2a मुख्यतः एंडोथेलियल पेशींमध्ये व्यक्त केले जाते, जे एंजियोजेनेसिस आणि हेमॅटोपोईसिसमध्ये महत्त्वपूर्ण भूमिका बजावते. मानवी प्लेसेंटामध्ये, HIF-la आणि HIF-2a ची अभिव्यक्ती प्रारंभिक टप्प्यात जास्तीत जास्त व्यक्त केली जाते, जी गर्भधारणेच्या या कालावधीत उद्भवणार्या शारीरिक हायपोक्सियाला सेल प्रतिकार सुनिश्चित करते. याव्यतिरिक्त, प्रीक्लेम्पसियामध्ये या घटकांची वाढलेली अभिव्यक्ती लक्षात घेतली गेली आहे.

अपोप्टोसिसवर या घटकांच्या उत्तेजक प्रभावाचा परिणाम म्हणजे इंट्रायूटरिन वाढ मंदता.
अशा प्रकारे, S. Y. Dai et al यांनी केलेल्या अभ्यासात. इंट्रायूटरिन वाढ मंदता असलेल्या गटामध्ये विलस सिंसिटिओट्रोफोब्लास्टमधील अपोप्टोटिक इंडेक्स 1.45+1.26% होता आणि नियंत्रण गटात 0.18±0.16 होता, जेथे इंट्रायूटरिन वाढ मंदता दिसून आली नाही (p
त्याच वेळी, नियंत्रण गटाच्या (22%) पेक्षा इंट्रायूटरिन ग्रोथ मंदता (50%) असलेल्या गटाच्या प्लेसेंटामध्ये मॅक्रोस्कोपिकली शोधण्यायोग्य इन्फ्रक्शन्स लक्षणीयरीत्या आढळून आले. इंटरव्हिलस स्पेसमध्ये फायब्रिनोइड जमा होण्याचे प्रमाण देखील इंट्रायूटरिन वाढ मंदता असलेल्या गटामध्ये किंचित जास्त होते. ट्रॉफोब्लास्ट घटक आणि रक्त आणि रक्तवहिन्यासंबंधी पेशींच्या माइटोटिक क्रियाकलापांचा गरोदरपणाच्या 6 आणि 12-14 आठवड्यांत अभ्यास केला गेला. लेखकांनी गर्भधारणेच्या 6 आठवड्यांत माइटोटिक आकृत्यांची उपस्थिती आणि साइटोट्रोफोब्लास्ट पेशी आणि एरिथ्रोब्लास्टमध्ये केडी67-पॉझिटिव्ह न्यूक्लीची उपस्थिती नोंदवली. विलस सायटोट्रोफोब्लास्टमध्ये, Ki67-पॉझिटिव्ह न्यूक्लीची संख्या गर्भधारणेच्या 12-14 आठवड्यांनी कमी होते, ती फक्त एक्स्ट्रॅव्हिलस सायटोट्रोफोब्लास्टच्या सेल बेटांवरच राहते. या कालावधीपर्यंत, एरिथ्रोब्लास्ट्समध्ये Ki67 आढळले नाही. गर्भधारणेच्या 6 आठवड्यांत एंडोथेलियल पेशींमध्ये, गर्भधारणेच्या 12-14 आठवड्यांत, माइटोटिक आकृत्या आणि Ki67 अभिव्यक्ती अनुपस्थित होत्या, UEA1 लेक्टिन आढळले. गर्भावस्थेच्या 6 आठवड्यात एंडोथेलियल आणि पेरिव्हस्कुलर पेशींमध्ये माइटोटिक आकृत्या आणि Ki67 अभिव्यक्ती नसणे हे ट्रॉफोब्लास्टपेक्षा मोठ्या प्रमाणात स्ट्रोमल पेशींवर व्हॅस्कुलोजेनेसिसचे थेट अवलंबित्व दर्शवते.

युकेरियोटिक पेशींच्या सेल सायकलचे नियंत्रण किनासेसच्या कुटुंबाद्वारे केले जाते, विशेषत: सायक्लिन-आश्रित किनासेस. गर्भधारणेच्या पहिल्या तिमाहीपासून, सायटोट्रोफोब्लास्टच्या केंद्रकांमध्ये आणि जवळच्या रक्तवाहिन्यांच्या एंडोथेलियममध्ये सायक्लिन डी 1 आढळून येते, ज्याची अभिव्यक्ती गर्भधारणेच्या तिसऱ्या तिमाहीत हळूहळू वाढते. CDK4 हे गर्भधारणेच्या पहिल्या आणि तिसऱ्या तिमाहीत सायटोट्रोफोब्लास्ट न्यूक्लीमध्ये आढळते, तर CDK4-पॉझिटिव्ह एंडोथेलियल पेशी केवळ तिसऱ्या तिमाहीच्या शेवटी आढळतात. हे सूचित करते की D1/CDK4 कॉम्प्लेक्स संपूर्ण गर्भधारणेदरम्यान सायटोट्रोफोब्लास्ट पेशींच्या प्रसाराच्या नियमनमध्ये आणि गर्भधारणेच्या तिसऱ्या तिमाहीत अँजिओजेनेसिसच्या नियंत्रणामध्ये सामील आहे. अंतःस्रावी आणि इम्यूनोलॉजिकल बॅलन्समध्ये व्यत्यय आणि मुक्त रॅडिकल्सच्या संचयनामुळे प्लेसेंटल टिश्यूमध्ये ऍपोप्टोसिस वाढतो. अशाप्रकारे, प्रीक्लेम्पसियासह, सायटोट्रोफोब्लास्टचे भेदभाव आणि गर्भाशयात त्याच्या आक्रमणाची प्रक्रिया विस्कळीत होते, जे मुख्यत्वे ऍपोप्टोसिसमुळे होते. हे ज्ञात आहे की गर्भधारणेदरम्यान प्रौढ प्लेसेंटामध्ये ऍपोप्टोसिस अधिक सामान्य आहे आणि गर्भाच्या वाढीच्या प्रतिबंधामुळे गुंतागुंतीचे आहे आणि p53 प्रथिने या प्रक्रियेच्या नियमनमध्ये मोठी भूमिका बजावते आणि Bcl-2 प्रथिने त्यात भाग घेत नाहीत. असंख्य अभ्यास p53 चे ओव्हरएक्सप्रेशन सूचित करतात आणि परिणामी, कोरियोनिक कार्सिनोमा आणि हायडेटिडिफॉर्म मोलमधील सायटोट्रोफोब्लास्टमधील ऍपोप्टोटिक पेशींमध्ये वाढ होते.

3-15 वर्षे वयोगटातील 45 मुलांची तपासणी करण्यात आली. परिघीय रक्त लिम्फोसाइट्स आणि न्युट्रोफिल्सच्या अपोप्टोसिससाठी अपोप्टोसिस मार्कर - CD95, CD95L, BSL2 निर्धारित करून तत्परता निश्चित करणे हा अभ्यासाचा उद्देश होता. रोगप्रतिकारक पेशींच्या अपोप्टोसिसचे मूल्यांकन करताना, लिम्फोसाइट्सच्या प्रोग्राम केलेल्या सेल मृत्यूसाठी तत्परतेत घट आणि न्यूट्रोफिल ग्रॅन्युलोसाइट्समध्ये वाढ दिसून आली. सर्वात स्पष्ट बदल 7-15 वर्षे वयोगटात नोंदवले जातात ज्यांना 3 वर्षांपेक्षा जास्त काळ रोगाचा अनुभव आहे. प्राप्त केलेला डेटा स्वादुपिंडाच्या ऊतींमधील ऑटोरिएक्टिव लिम्फोसाइट्सच्या प्रोग्राम केलेल्या मृत्यूच्या दडपशाहीचे लक्षण असू शकते, जे रोगप्रतिकारक प्रतिसाद लांबणीवर टाकण्यास योगदान देते. CD95L व्यक्त करणाऱ्या ल्युकोसाइट पेशींच्या प्रमाणात वाढ झाल्याने स्वादुपिंडाच्या आयलेट β पेशींमध्ये इम्युनो-कम्पेटेंट पेशींमध्ये घुसखोरी केलेल्या प्रोग्राम केलेल्या सेल मृत्यू प्रक्रियेत वाढ होऊ शकते.

न्यूट्रोफिल ऍपोप्टोसिस

लिम्फोसाइट ऍपोप्टोसिस

प्रकार 1 मधुमेह मेल्तिस

1. पेकारेवा E. V. रोगाच्या प्रारंभी टाइप 1 मधुमेह असलेल्या रूग्णांमध्ये अपोप्टोसिसचे मार्कर / E. V. Pekareva et al. - 2009. - क्रमांक 4. - पृष्ठ 86-89.

2. पेकारेवा ई. व्ही. टाइप 1 मधुमेह मेल्तिसच्या पॅथोजेनेसिसमध्ये ऍपोप्टोसिसची भूमिका / ई. व्ही. पेकारेवा, टी. व्ही. निकोनोवा, ओ. एम. स्मरनोव्हा // मधुमेह मेल्तिस. – 2010. – क्रमांक 1. – P.45-48.

3. एडेगेट ई. मधुमेह मेल्तिसच्या एटिओलॉजी आणि एपिडेमियोलॉजीवर अपडेट / ई. एडेगेट, पी. स्कॅटनर, ई. डन // एन एनवाय. Acad Sci, 2006. – Vol. 1084. - पृष्ठ 1-29.

4. टाइप 2 मधुमेह मेल्तिस / एस. सुडो एट अल असलेल्या रूग्णांच्या परिधीय रक्तामध्ये न्युट्रोफिल ऍपोप्टोसिसचे नैदानिक महत्त्व. // लॅब हेमॅटॉल. 2007; 13(3):108-12 (कमी).

5. Filep J. G. न्युट्रोफिल ऍपोप्टोसिस: जळजळ वाढण्याचे लक्ष्य / J. G. Filep, E. l. केबीर // जे. सेल बायोकेम. - 2009. - खंड. 108. - पृष्ठ 1039-1046.

6. निरोगी आणि मधुमेही विषयांमध्ये बर्खोल्डेरिया स्यूडोमॅलीला मानवी पॉलीमॉर्फोन्यूक्लियर न्यूट्रोफिल प्रतिसाद / एस. चंचमरोएन एट अल. // रोगप्रतिकार संक्रमित करा. - 2009. - खंड. ७७. – पी. ४५६–४६३ (अपोप्टोसिस कमी झाले आहे).

7. मधुमेह मेल्तिसमध्ये लिम्फोसाइट अपोप्टोसिसचा प्रभाव / के. ए. अवधेश आणि अन्य. // एशियन जर्नल ऑफ मेडिकल सायन्सेस. - 2011. - क्रमांक 2. - पृष्ठ 1-6.

8. प्रकार 1 मधुमेही उंदीर / D. T. Graves et al मध्ये जळजळ अधिक कायम असते. // जे. डेंट. Res., 2005. – व्हॉल. ८४. – पृष्ठ ३२४–३२८.

9. जुलियाना सी. अल्वेस मधुमेह असलेल्या रुग्णांमध्ये संक्रमण: पॅथोजेनेसिसचा आढावा / सी. ज्युलियाना, सी. जेनिन, सी. अल्वेस // भारतीय जे. एंडोक्रिनॉल. मेटाब. - मार्च २०१२. - पुरवठा l1. - क्रमांक 16. - पृष्ठ 27-36.

10. लुओ एच. आर. कॉन्स्टिट्यूटिव्ह न्यूट्रोफिल अपोप्टोसिस: यंत्रणा आणि नियमन / एच. आर लुओ, एफ. लॉइसन // एएम. जे. हेमेटोल. - 2008. - खंड. ८३. – पृष्ठ २८८–२९५.

परिचय

टाइप 1 मधुमेह मेल्तिस (T1DM) हा एक पॉलीजेनिक, मल्टीफॅक्टोरियल रोग आहे जो स्वादुपिंडाच्या β पेशींमध्ये ऑटोअँटीबॉडीज आणि ऑटोरिएक्टिव टी लिम्फोसाइट्सच्या निर्मितीशी संबंधित आहे.

स्वयंप्रतिकार जखमांच्या रोगजननातील अग्रगण्य दुवे म्हणजे रोगप्रतिकारक शक्तीचे नियमन आणि प्रोग्राम केलेले सेल मृत्यू.

जळजळ होण्याच्या ठिकाणी पेशींचे इष्टतम संतुलन राखण्यासाठी, सक्रिय क्लोनचा विस्तार मर्यादित करण्यासाठी आणि स्वयंप्रतिकार प्रतिक्रियांच्या विकासास प्रतिबंध करण्यासाठी नियंत्रित ऍपोप्टोसिस ही आज मुख्य यंत्रणा मानली जाते. त्याच्या अंमलबजावणीमध्ये दोष आढळल्यास, सक्रिय रोगप्रतिकारक पेशी जमा होऊ शकतात, ज्यामुळे स्वयंप्रतिकार रोग उद्भवू शकतात.

अभ्यासाचा उद्देश: मुलांमध्ये टाईप 1 मधुमेह मेल्तिसमधील परिधीय रक्त लिम्फोसाइट्स आणि न्यूट्रोफिल्सवरील ऍपोप्टोसिस CD95, CD95L, Bsl2 च्या सक्रियकरण मार्करचा अभ्यास.

साहित्य आणि संशोधन पद्धती

3-15 वर्षे वयोगटातील टाइप 1 मधुमेह असलेल्या 45 मुलांचे सर्वेक्षण करण्यात आले. गट I मध्ये 3-6 वर्षे वयोगटातील 20 मुले (प्रीस्कूलर), गट II - 7-15 वर्षे वयोगटातील 12 मुले (शालेय मुले), 3 वर्षांपेक्षा कमी कालावधीची आजार असलेली मुले, गट III - 7-15 वर्षे वयोगटातील 13 मुले (शालेय मुले) 3 वर्षांपेक्षा जास्त काळ रोगाचा अनुभव आहे. नियंत्रण गटामध्ये 3-6 (15) आणि 7-15 (15) वर्षे वयोगटातील 30 निरोगी मुलांचा समावेश होता. नावाच्या चिल्ड्रन सिटी क्लिनिकल हॉस्पिटलच्या एंडोक्राइनोलॉजी विभागाच्या आधारे हा अभ्यास करण्यात आला. जी.के. फिलीपस्की, स्टॅव्ह्रोपोल.

प्रोग्राम केलेल्या सेल मृत्यूचे मूल्यांकन करण्यासाठी, अपोप्टोसिसचे मार्कर व्यक्त करणार्या लिम्फोसाइट्स आणि न्यूट्रोफिल ग्रॅन्युलोसाइट्सची संख्या आढळली. फिकोल-पॅक घनता ग्रेडियंट, न्यूट्रोफिल्स - फिकोल-पॅक आणि फिकोल-यूरोग्राफिन (जीई हेल्थकेअर, स्वीडन) या दुहेरी घनतेच्या ग्रेडियंटवर लिम्फोसाइट्स वेगळे केले गेले. सेल निलंबन RPMI-1640 मध्यम (वेक्टर-बेस्ट, रशिया) मध्ये तीन वेळा धुतले गेले. लिम्फोसाइट्स आणि न्यूट्रोफिल्सच्या संस्कृतींमध्ये, CD95, CD95L, Bsl2 व्यक्त करणाऱ्या पेशींची संख्या मोनोक्लोनल ऍन्टीबॉडीज (इनव्हिट्रोजन, यूएसए) वापरून फ्लो सायटोमेट्रीद्वारे मोजली गेली.

डेटाच्या सांख्यिकीय विश्लेषणासाठी, सॉफ्टवेअर पॅकेज "प्राइमर ऑफ बायोस्टॅट 4.0", ॲटेस्टॅट 10.5.1 वापरले गेले. आंतरसमूह फरकांचे मूल्यांकन करण्यासाठी, न्यूमन-क्युल्स आणि डन चाचण्यांच्या गणनेसह वारंवार मोजमापांच्या भिन्नतेचे विश्लेषण वापरले गेले.

परिमाणवाचक मूल्ये गैर-सामान्यपणे वितरीत केली गेली होती आणि मध्यक आणि आंतरक्वांटाइल (25 व्या आणि 75 व्या टक्केवारी) श्रेणी (मी (Q1-Q)) म्हणून सादर केली गेली होती. p वर फरक<0,05.

परिणाम आणि त्याची चर्चा

निरोगी मुलांच्या तुलनेत सर्व गटांच्या रूग्णांमध्ये फॅस रिसेप्टर्स (CD95) व्यक्त करणाऱ्या लिम्फोसाइट्सच्या संख्येत घट झाल्याचे या कामात दिसून आले (तक्ता 1). किमान निर्देशक 7-15 वर्षे वयोगटातील मुलांमध्ये 3 वर्षांपेक्षा जास्त काळ रोगाचा अनुभव असलेल्या मुलांमध्ये दिसून आले (तक्ता 1).

तक्ता 1

टाइप 1 मधुमेह मेल्तिस असलेल्या मुलांमध्ये लिम्फोसाइट ऍपोप्टोसिसचे संकेतक

	क्लिनिकल गट
3-6 वर्षे	T1DM (I) (n=20)	17,7(15,9-19,43) * **	7,4(5,81- 8,94) * **	70,2(68,56-71,76) * **
3-6 वर्षे	नियंत्रण गट	28,0(26,08-30,0)	9,2(8,04- 10,25)	65,9(62,82-69,05)
7-15 वर्षे		20,5(17,94-23,02) * **	11,6(10,12-13,14) * **	70,3(65,72-74,9) * **
		13,9(10,04-17,73) * **	15,6(14,26-16,87) * **	79,5(75,47-83,59) * **
	नियंत्रण गट	26,5 (24,20-28,84)	8,14 (6,49-9,78)	60,3(56,97-63,66)

*- p<0,05 - по сравнению с контрольной группой, **- p<0,05 - по сравнению с группой

अँटी-अपोप्टोटिक मार्कर (Bsl2) च्या अभिव्यक्तीच्या पातळीचे मूल्यांकन करताना, त्याची वाढ सर्व गटांच्या मुलांच्या लिम्फोसाइट्समध्ये दिसून आली, 3 वर्षांपेक्षा जास्त काळ रोग असलेल्या शाळकरी मुलांमध्ये अधिक स्पष्ट होते, जे फास-चे उल्लंघन देखील दर्शवते. प्रकार 1 मधुमेह मेल्तिस असलेल्या मुलांमध्ये अवलंबित ऍपोप्टोसिस, ज्यामुळे लिम्फोसाइट्सच्या ऑटोरिएक्टिव स्वरूपाच्या पेशींच्या मृत्यूची प्रक्रिया मंदावते.

आमचे परिणाम स्वादुपिंडाच्या ऊतींमधील सक्रिय लिम्फोसाइट्सच्या प्रोग्राम केलेल्या मृत्यूच्या दडपशाहीचे अप्रत्यक्ष चिन्ह असू शकतात, जे रोगप्रतिकारक प्रतिसाद वाढविण्यास योगदान देतात.

लिम्फॉइड पेशींच्या अपोप्टोटिक तत्परतेची पातळी रोगाच्या कालावधीवर अवलंबून असते आणि 3 वर्षांपेक्षा जास्त काळ T1DM असलेल्या मुलांमध्ये कमी होते.

हे पूर्वी दर्शविले गेले होते की मधुमेह मेल्तिसमध्ये ऍपोप्टोसिसला लिम्फोसाइट्सचा प्रतिकार असतो, जो स्वयंप्रतिकार प्रतिसादाचे स्वरूप आणि कालावधी स्पष्ट करू शकतो.

मधुमेह असलेल्या मुलांच्या लिम्फोसाइट्सच्या संस्कृतीत, निरोगी मुलांच्या गटाच्या तुलनेत CD95L व्यक्त करणाऱ्या लिम्फोसाइट्सच्या टक्केवारीत वाढ आढळली (तक्ता 1). सर्वाधिक दर 7-15 वर्षे वयोगटातील मुलांमध्ये 3 वर्षांपेक्षा जास्त काळ रोगाचा अनुभव असलेल्या मुलांमध्ये निर्धारित केले गेले (तक्ता 1).

हे ज्ञात आहे की T1DM मध्ये, स्वादुपिंडाच्या आयलेट्समध्ये रोगप्रतिकारक पेशींद्वारे घुसखोरी केली जाते ज्यामुळे साइटोकिन्सची विस्तृत श्रेणी तयार होते, ज्यामध्ये झिल्ली रिसेप्टर्सची विपरित अभिव्यक्ती असते. ग्लुकोज आणि साइटोकिन्सच्या वाढीव एकाग्रतेच्या प्रभावाखाली, β-पेशी त्यांच्या पृष्ठभागावर CD95 व्यक्त करण्यास सुरवात करतात, जी सामान्यपणे व्यावहारिकरित्या अनुपस्थित असते.

लिम्फॉइड पेशींवर CD95L ची वाढलेली अभिव्यक्ती स्वादुपिंडाच्या β-पेशींमध्ये अधिक स्पष्ट ऍपोप्टोटिक प्रक्रियेस आणि त्यानंतरच्या काढण्यामध्ये योगदान देऊ शकते.

अलिकडच्या वर्षांत, हे दर्शविले गेले आहे की न्यूट्रोफिल ग्रॅन्युलोसाइट्स स्वयंप्रतिकार दाह निर्मितीमध्ये सक्रिय भाग घेतात. ऑटोएंटीजेन्सचे स्थानिकीकरण आणि निर्मूलन करण्याच्या उद्देशाने न्यूट्रोफिल्सची प्रतिक्रिया मुख्यत्वे रोगप्रतिकारक प्रणालीवरील प्रतिजैविक प्रभावाची शक्ती आणि कालावधी तसेच पेशींच्या कार्यात्मक क्रियाकलापांच्या प्रारंभिक स्तरावर अवलंबून असते.

आम्हाला आढळले आहे की मुलांमध्ये मधुमेह होण्याच्या कोर्समध्ये अपोप्टोसिस (CD95) चे मार्कर व्यक्त करण्याच्या न्युट्रोफिलच्या टक्केवारीत वाढ होते आणि त्यांच्या पृष्ठभागावर अँटी-अपोप्टोटिक प्रथिने Bsl2 असल्या पेशींचे प्रमाण कमी होते (टेबल 2).

टेबल 2

टाइप 1 मधुमेह मेल्तिस असलेल्या मुलांमध्ये न्यूट्रोफिल ऍपोप्टोसिसचे संकेतक

	क्लिनिकल गट
3-6 वर्षे	T1DM (I) (n=20)	75,1(71,49-78,72) * **	9,5 (8,63- 10,32) * **	3,68 (3,46-3,90 * **
3-6 वर्षे	नियंत्रण गट	59,2 (56,31- 62,01)	7,35 (6,58- 8,12)
7-15 वर्षे	T1DM, रोगाचा अनुभव 3 वर्षांपेक्षा कमी (II) (n=12)	77,6(71,15-83,99) * **	9,5(8,14-10,92) * **	3,99(2,9- 5,08) * **
	T1DM, रोगाचा 3 वर्षांपेक्षा जास्त अनुभव (III) (n=13)	87,9(84,24-91,63) * **	12,1(10,22-13,96) * **	2,78(2,36-3,19) * **
	नियंत्रण गट	58,43(54,95- 1,90)

*- p<0,05 - по сравнению с контрольной группой, **- p<0,05 - по сравнению с группой III (न्यूमॅन-क्युल्स चाचणी, डन चाचणी).

तुलनात्मक आंतरगट वैशिष्ट्यांसह, कमाल CD95 मूल्ये (p<0,05) и минимальные Bsl2 (p<0,05) отмечены у детей 7-15 лет с длительностью заболевания более 3-х лет.

त्यांच्या पृष्ठभागावर CD95L असलेल्या पॉलिमॉर्फोन्यूक्लियर ल्युकोसाइट्सच्या टक्केवारीत वाढ आढळून आली. 3 वर्षांपेक्षा जास्त काळ रोगाचा इतिहास असलेल्या शाळकरी मुलांमध्ये सर्वाधिक दर दिसून आले.

साहित्यात सादर केलेल्या मधुमेह मेल्तिसमधील पीएमएन अपोप्टोसिसच्या अभ्यासाचे परिणाम विरोधाभासी आहेत. T1DM आणि T2DM मध्ये परिधीय रक्त न्यूट्रोफिल्सच्या ऍपोप्टोसिसच्या दरात वाढ झाल्याचा पुरावा आहे.

तथापि, बऱ्याच अभ्यासांमध्ये असे आढळून आले आहे की टाइप 1 मधुमेह असलेल्या रूग्णांमध्ये न्यूट्रोफिल ग्रॅन्युलोसाइट्सच्या ऍपोप्टोसिसमध्ये घट झाली आहे, विशेषत: हायपरग्लाइसेमियाच्या परिस्थितीत, ज्यामुळे ऊतकांच्या नुकसानासह दीर्घकाळ जळजळ होण्याची प्रक्रिया सुरू होते आणि प्रकार असलेल्या रूग्णांमध्ये दीर्घकाळापर्यंत बॅक्टेरियाच्या संसर्गाची शक्यता असते. 1 मधुमेह.

आमचे परिणाम सूचित करतात की T1DM असलेल्या रूग्णांमध्ये ऍपोप्टोसिससाठी PMN ची वाढलेली प्रवृत्ती असते, जी सक्रिय न्यूट्रोफिल्सचे "अतिरिक्त" काढून टाकण्याच्या उद्देशाने संरक्षणात्मक प्रतिक्रियेचे प्रकटीकरण असू शकते, ज्याच्या निर्मितीमुळे ऊतींचे नुकसान वाढते.

न्यूट्रोफिल ग्रॅन्युलोसाइट्सच्या अपोप्टोटिक संभाव्यतेत वाढ हे रोगाच्या इम्युनोपॅथोजेनेसिसमध्ये पीएमएनच्या सक्रिय सहभागाचे प्रतिबिंब आहे.

मधुमेह असलेल्या रूग्णांमध्ये न्युट्रोफिल ग्रॅन्युलोसाइट्सवर CD95L ची वाढलेली अभिव्यक्ती केवळ स्वादुपिंडाच्या पेशीच नाही तर त्यांच्या स्वतःच्या ल्युकोसाइट पेशी देखील नष्ट करण्यास कारणीभूत ठरू शकते.

अशाप्रकारे, टाइप 1 मधुमेह मेल्तिस असलेल्या मुलांमध्ये इम्युनो-कम्पेटेंट पेशींच्या ऍपोप्टोसिसचे मूल्यांकन करताना, लिम्फोसाइट्सच्या प्रोग्राम केलेल्या सेल मृत्यूसाठी तत्परतेत घट आणि पॉलिमॉर्फोन्यूक्लियर ल्यूकोसाइट्समध्ये वाढ स्थापित केली गेली.

सर्वात स्पष्ट बदल 7-15 वर्षे वयोगटातील 3 वर्षांपेक्षा जास्त कालावधीच्या रोगाच्या अनुभवासह नोंदवले जातात. सर्व गटांच्या मुलांमध्ये, त्यांच्या पृष्ठभागावर CD95L व्यक्त करणाऱ्या ल्युकोसाइट पेशींच्या प्रमाणात वाढ आढळून आली.

हे ज्ञात आहे की पीएमएन हे जन्मजात आणि अनुकूली प्रतिकारशक्ती यांच्यातील दुवा आहेत आणि बॅक्टेरियाच्या वाढीस प्रतिबंध करणारा पदार्थ संरक्षणात अग्रगण्य भूमिका बजावतात.

त्यांच्या अपोप्टोटिक क्रियाकलापांमध्ये वाढ झाल्यामुळे मुलाची कमी वय-संबंधित प्रतिकारशक्ती आणि संसर्गजन्य रोगांची संवेदनशीलता होऊ शकते.

अपोप्टोसिसच्या प्रेरणास संवेदनशील लिम्फॉइड पेशींची संख्या कमी होणे हे प्रोग्राम केलेल्या पेशींच्या मृत्यूचे दडपशाही आणि लिम्फोसाइट्सच्या सक्रिय स्वरूपाचे अशक्त निर्मूलनाचे अप्रत्यक्ष लक्षण आहे.

निष्कर्ष

1. टाइप 1 मधुमेह मेल्तिसने ग्रस्त असलेल्या मुलांमध्ये, परिधीय रक्त लिम्फोसाइट्सच्या ऍपोप्टोसिसची तयारी कमी होते, न्यूट्रोफिल ग्रॅन्युलोसाइट्समध्ये वाढ होते, जी सीडी 95 आणि बीएसएल 2 च्या अभिव्यक्तीमध्ये बदलांसह असते आणि कालावधीवर अवलंबून असते. रोग.

2. T1DM मधील लिम्फोसाइट्स आणि न्यूट्रोफिल ग्रॅन्युलोसाइट्सवर CD95L ची वाढलेली अभिव्यक्ती अग्नाशयी आयलेट β-पेशींमध्ये इम्युनो-सक्षम पेशींमध्ये घुसलेल्या प्रोग्राम केलेल्या सेल मृत्यूच्या वाढीव प्रक्रियेस कारणीभूत ठरू शकते.

पुनरावलोकनकर्ते:

श्चेटिनिन ई.व्ही., डॉक्टर ऑफ मेडिकल सायन्सेस, प्राध्यापक, सेंट स्टेट मेडिकल युनिव्हर्सिटीच्या वैज्ञानिक आणि नावीन्यपूर्ण कार्यासाठी उप-रेक्टर, रशियन फेडरेशनच्या आरोग्य मंत्रालयाच्या उच्च व्यावसायिक शिक्षण "स्टॅव्ह्रोपोल स्टेट मेडिकल युनिव्हर्सिटी" च्या एचबीओ विभागाचे प्रमुख , स्टॅव्ह्रोपोल.

गोलुबेवा एम.व्ही., डॉक्टर ऑफ मेडिकल सायन्सेस, प्रोफेसर, एचबीओ उच्च व्यावसायिक शैक्षणिक संस्था "स्टॅव्ह्रोपोल स्टेट मेडिकल युनिव्हर्सिटी" च्या रशियन फेडरेशनच्या आरोग्य मंत्रालयाच्या मुलांच्या संसर्गजन्य रोग विभागाचे प्रमुख, स्टॅव्ह्रोपोल.

ग्रंथसूची लिंक

बार्यचेवा एल.यू., एर्दनी-गोरियाएवा एन.ई. मुलांमध्ये टाइप 1 मधुमेहातील रोगप्रतिकारक पेशींच्या अपोप्टोसिसचे मार्कर // विज्ञान आणि शिक्षणाच्या आधुनिक समस्या. - 2013. - क्रमांक 4.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=9953 (प्रवेश तारीख: 07/18/2019). "अकादमी ऑफ नॅचरल सायन्सेस" या प्रकाशन गृहाने प्रकाशित केलेली मासिके आम्ही तुमच्या लक्षात आणून देत आहोत.

अपोप्टोसिससेल मृत्यूचे एक प्रोग्राम करण्यायोग्य, अनुवांशिक मध्यस्थी स्वरूप आहे, ज्यामध्ये बाह्य किंवा अंतर्गत सिग्नल सेलला एंजाइम तयार करण्यासाठी किंवा सक्रिय करण्यासाठी प्रेरणा देतात ज्यामुळे ते आत्म-नाश होते. मॉर्फोलॉजिकलदृष्ट्या, एपोप्टोसिस हे पेशींचे संकोचन, केंद्रकांचे संक्षेपण आणि विखंडन, सायटोस्केलेटनचा नाश आणि सेल झिल्लीचे बुलस प्रोट्रुजन द्वारे दर्शविले जाते. अपोप्टोसिसचे वैशिष्ट्य म्हणजे प्रक्रिया पूर्ण होईपर्यंत मरणारी पेशी त्याच्या पडद्याची अखंडता राखते आणि त्यानंतरच त्याच्या पडद्याचा नाश हा जवळच्या फागोसाइट्सना उर्वरित तुकड्या शोषून घेण्याचा आणि सेल्युलर ऱ्हासाची प्रक्रिया पूर्ण करण्यासाठी सिग्नल असतो. ऍपोप्टोटिक पेशी ज्यांना तात्काळ फॅगोसाइटोसिस होत नाही ते लहान, झिल्ली-बांधलेले तुकडे बनतात ज्याला “अपोप्टोटिक बॉडीज” म्हणतात. एपोप्टोसिसचे एक महत्त्वाचे वैशिष्ट्य म्हणजे मरणा-या पेशी काढून टाकणे जळजळ विकसित न करता होते.

अपोप्टोसिस शारीरिक प्रक्रियांमध्ये महत्वाची भूमिका बजावते: ऑर्गनोजेनेसिस, भ्रूण विकास, संरचनेचे नियमन आणि प्रौढ जीवांच्या ऊतींमधील पेशींची संख्या, शरीरातील विविध हार्मोनल बदल. विविध पॅथॉलॉजिकल प्रक्रियांमध्ये ऍपोप्टोसिसची भूमिका देखील महत्त्वपूर्ण आहे. ट्यूमरच्या वाढीमध्ये याचा पूर्णपणे अभ्यास केला गेला आहे.

ऍपोप्टोसिसची प्रक्रिया दोन टप्प्यात विभागली जाऊ शकते:

· अपोप्टोटिक सिग्नलची निर्मिती आणि वहन - निर्णय घेण्याचा टप्पा;

· सेल्युलर स्ट्रक्चर्सचे विघटन - इफेक्टर फेज.

ऍपोप्टोसिस यंत्रणेची अंमलबजावणी अंतर्जात सेल्युलर एंजाइम - सिस्टीन प्रोटीसेस (कॅस्पेसेस) च्या सक्रियतेशी संबंधित आहे. कॅस्पेसेस पेशींमध्ये (प्रोकास्पेसेस) निष्क्रिय अवस्थेत असतात. सक्रियता त्यांच्या प्रोटीओलाइटिक क्लीवेजद्वारे आणि सक्रिय सबयुनिट्सच्या निर्मितीसह त्यानंतरच्या डायमरायझेशनद्वारे होते. कॅस्पेसचे लक्ष्य सेलच्या विविध महत्त्वपूर्ण कार्यांसाठी जबाबदार प्रथिने आहेत. सध्या, 14 प्रकारच्या कॅस्पेसचे वर्णन केले गेले आहे, जे त्यांच्या कार्यात्मक वैशिष्ट्यांनुसार 3 गटांमध्ये विभागले जाऊ शकतात:

साइटोकिन्सचे सक्रिय करणारे (कॅस्पेस 1, 4, 5, 13)

कॅस्पेसेस - इफेक्टर कॅस्पेसेसच्या सक्रियतेचे प्रेरक (कॅस्पेसेस 2, 8, 9, 10)

· इफेक्टर कॅस्पेसेस - ऍपोप्टोसिसचे कलाकार (3, 6, 7)

ऍपोप्टोसिसच्या यंत्रणेसाठी जबाबदार असलेल्या झिल्ली सेल्युलर रिसेप्टर्सपैकी एक फॅस रिसेप्टर (CD95/APO1) नावाचे प्रोटीन आहे. फास रिसेप्टरसाठी लिगँड हे प्रोटीन फॅस लिगँड (फॅस-एल) आहे, जे ट्यूमर-नेक्रोटिक घटकांच्या कुटुंबाशी संबंधित आहे आणि एकतर झिल्ली प्रोटीनच्या स्वरूपात किंवा विद्रव्य स्वरूपात सादर केले जाऊ शकते. फॅस रिसेप्टरचे फास लिगँडशी बंधनकारक केस्पेस इंड्युसरच्या सक्रियतेसह ऍपोप्टोसिस यंत्रणा सक्रिय होते. इफेक्टर कॅस्पेसेसच्या त्यानंतरच्या सक्रियतेसह, प्रोटीओलाइटिक प्रतिक्रियांची एक साखळी सुरू होते, ज्याचा उद्देश सेलचा अपोप्टोटिक "विघटन" आहे: डीएनए विखंडन, सेलच्या स्ट्रक्चरल प्रोटीनचे थेट विघटन, प्रथिने संश्लेषणाचे विघटन. अशाप्रकारे, ऍपोप्टोसिसमध्ये इफेक्टर कॅस्पेसेसच्या सहभागामुळे आसपासच्या पेशींसह ऍपोप्टोटिक सेल फुटणे, साइटोस्केलेटनची पुनर्रचना, डीएनए दुरुस्ती आणि प्रतिकृतीची क्षमता कमी होणे, अणु झिल्ली फुटणे आणि डीएनए नष्ट होणे, सेल चिन्हांकित करणारे सिग्नल सोडणे. apoptosis, आणि apoptotic शरीरात सेलचे विभाजन. हा योगायोग नाही की इफेक्टर कॅस्पेसेसला "एक्सिक्युशनर कॅस्पेस" म्हणतात.

एपोप्टोसिसचा अभ्यास करण्याच्या पद्धती खूप वैविध्यपूर्ण आहेत. सुरुवातीला, ऍपोप्टोसिस निर्धारित करण्याचा सर्वात सामान्य मार्ग म्हणजे काढलेल्या डीएनए अंशाचा इलेक्ट्रोफोरेसीस होता, ज्यामुळे मोलद्वारे कमी आण्विक वजन डीएनएची स्वतंत्रता ओळखणे शक्य होते. वस्तुमान (इंटरन्यूक्लियोसोमल डीएनए डिग्रेडेशनचा परिणाम म्हणून). मॉर्फोलॉजिकल अभ्यासामध्ये, TUNEL पद्धत डीएनए ब्रेक शोधण्यासाठी वापरली जाते, जी डीएनए ब्रेकच्या साइट्समध्ये लेबल केलेल्या ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्सच्या इन्सर्टच्या निर्मितीवर आधारित आहे, ज्याची निर्मिती टीडीटी एन्झाइमद्वारे उत्प्रेरित केली जाते.

सध्या, लिम्फोसाइट ऍपोप्टोसिस रेकॉर्ड करण्यासाठी फ्लो सायटोमेट्रीवर आधारित पद्धती वाढत्या प्रमाणात वापरल्या जातात. या गटामध्ये फ्लोरोसेंट डाई - प्रोपिडियम आयोडाइड वापरून पेशी (हायपोडिप्लोइड पेशी) द्वारे डीएनएचा काही भाग नष्ट झाल्याचा शोध घेण्यावर आधारित पद्धत समाविष्ट आहे, ज्याचे खाली वर्णन केले आहे. अपोप्टोसिस निश्चित करण्यासाठी फ्लो सायटोमेट्रीवर आधारित इतर पद्धती देखील वापरल्या जातात. लिम्फोसाइट ऍपोप्टोसिस प्रारंभिक टप्प्यावर फ्लोरोक्रोम-लेबल केलेले ऍनेक्झिन V वापरून शोधले जाऊ शकते, जे ऍपोप्टोसिस अंतर्गत असलेल्या पेशींच्या पडद्यावर दिसणाऱ्या फॉस्फेटिडाईलसेरिनला बांधते. ऍपोप्टोसिस विकसित करण्याच्या लिम्फोसाइट्सच्या "प्रवृत्ती" ची अंदाजे कल्पना त्यांच्या पृष्ठभागावर आणि प्रोटॉनकोजेन बीसीएल -2 च्या माइटोकॉन्ड्रियामध्ये फॅस रिसेप्टर (CD95) ची अभिव्यक्ती निर्धारित करून मिळवता येते.

रूग्णांच्या क्लिनिकल आणि इम्यूनोलॉजिकल तपासणी दरम्यान ऍपोप्टोसिसचे मूल्यांकन करण्याचे नैदानिक महत्त्व निःसंशय आहे, कारण त्याची कमजोरी अनेक रोगांशी संबंधित आहे. ऍपोप्टोसिस कमकुवत होणे हे स्वयंप्रतिकार रोगांच्या निर्मितीमुळे होते (लिम्फोसाइट्सच्या ऑटोस्पेसिफिक क्लोन काढण्याच्या प्रक्रियेच्या व्यत्ययामुळे). म्हणून, ऍपोप्टोसिसच्या कमकुवतपणाचे रेकॉर्डिंग सिस्टमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस, संधिवातसदृश संधिवात, तसेच ऑटोइम्यून लिम्फोप्रोलिफेरेटिव्ह सिंड्रोम सारख्या ऑटोइम्यून रोगांच्या रोगजनक यंत्रणेबद्दल माहितीचा स्त्रोत म्हणून काम करू शकते, जे रिसेप्टर्सचे चिन्ह निर्धारित करणार्या जनुकांच्या उत्परिवर्तनांवर आधारित आहे. . दुर्बल ऍपोप्टोसिस ही घातक प्रक्रियांच्या विकासातील एक महत्त्वाची यंत्रणा आहे. ट्यूमर पेशींमध्ये, p53 जनुकाचे उत्परिवर्तन अनेकदा आढळून येते, एक प्रथिने एन्कोडिंग करते जे दुरुस्त न केलेल्या डीएनए ब्रेक्स आणि क्रोमोसोमल उत्परिवर्तनांच्या उपस्थितीबद्दल सिग्नल जाणवते, ज्यामुळे ऍपोप्टोसिसचा विकास होतो. परिणामी, अनुवांशिकदृष्ट्या सदोष पेशी टाकून दिल्या जात नाहीत आणि ट्यूमर निर्मितीचा स्रोत बनतात.

इतर अनेक रोगांमध्ये, उलटपक्षी, ऍपोप्टोसिसमध्ये वाढ दिसून येते. हे संसर्गजन्य प्रक्रियांमध्ये आढळते (टी पेशींचा मोठ्या प्रमाणात ऍपोप्टोसिस बहुतेकदा मायक्रोबियल सुपरअँटिजेन्समुळे होतो), सेप्सिस आणि एड्ससह विविध विषाणूजन्य रोग. अपोप्टोसिस अनेक रक्त रोग आणि प्राथमिक इम्युनोडेफिशियन्सीमध्ये वाढविले जाते, जेव्हा ते पेशींच्या अस्तित्वाच्या घटकांच्या अपर्याप्त उत्पादनामुळे होते, ज्याची भूमिका साइटोकिन्सद्वारे खेळली जाते. अशा प्रकारे, IL-7 जनुकाच्या उत्परिवर्तन किंवा साइटोकाइन रिसेप्टर्सच्या सामान्य γ-साखळीशी संबंधित गंभीर संयुक्त इम्युनोडेफिशियन्सीपैकी एक प्रकारात, IL-7 च्या कमतरतेमुळे लिम्फॉइड पूर्ववर्तींचा मृत्यू होतो.

तथापि, सर्वात सामान्यतः "सक्रिय ऍपोप्टोसिस" चे मूल्यांकन आहे, जे लिम्फोसाइट्स जेव्हा मायटोजेन्सद्वारे उत्तेजित होतात तेव्हा ते सहन करतात. वस्तुस्थिती अशी आहे की ऍपोप्टोसिस, प्रसारासह, सक्रियकरण उत्तेजनांना लिम्फोसाइट्सच्या प्रतिसादाचा एक प्रकार आहे. भेदभावाच्या सुरुवातीच्या टप्प्यावर, अपोप्टोटिक प्रतिसाद प्रबळ होतो आणि त्याचा परिणाम म्हणजे प्रेरक प्रतिजनास सहनशीलता निर्माण होते. प्रौढ लिम्फोसाइट्स उत्तेजित होण्याला प्रामुख्याने प्रसाराद्वारे प्रतिसाद देतात (जे रोगप्रतिकारक प्रतिसादाच्या विकासासाठी प्रारंभिक टप्पा आणि पूर्व शर्त म्हणून काम करते), परंतु ऍपोप्टोसिसच्या सक्रियतेमध्ये त्यांच्या प्रवेशाची एक विशिष्ट संभाव्यता राहते. ऍपोप्टोसिस हे प्रसारासाठी प्रक्रिया पर्याय म्हणून कार्य करत असल्याने, त्यांचे गुणोत्तर हे सिग्नल सक्रिय करण्यासाठी सेलच्या प्रतिसादाच्या प्रभावीतेचे मोजमाप म्हणून काम करू शकते. माइटोजेनला लिम्फोसाइट प्रतिसादामध्ये ऍपोप्टोसिसचे योगदान जितके जास्त असेल, प्रतिजन-विशिष्ट रोगप्रतिकारक संरक्षण कमी प्रभावी होईल. अशा प्रकारे, माइटोजेन्सद्वारे लिम्फोसाइट्सच्या सक्रियतेदरम्यान ऍपोप्टोसिसचे निर्धारण हे सर्वात माहितीपूर्ण आहे, त्याच उत्तेजनासाठी पेशींच्या वाढीच्या प्रतिसादाच्या समांतर मूल्यांकनाच्या अधीन आहे.

ऍपोप्टोसिसच्या प्रक्रियेदरम्यान, आण्विक स्तरावर सेलमध्ये प्रतिक्रियांची एक जटिल साखळी उद्भवते, ज्यामुळे चयापचय प्रक्रिया आणि पेशींच्या फेनोटाइपिक वैशिष्ट्यांमध्ये बदल होतात. हे बदल बायोकेमिकल, मायक्रोस्कोपिक किंवा सायटोमेट्रिक पद्धतींद्वारे निर्धारित केले जाऊ शकतात आणि अपोप्टोसिसचे मार्कर म्हणून वापरले जातात.

एपोप्टोसिसच्या सुरुवातीच्या मार्करांपैकी एक म्हणजे पेशीच्या सायटोप्लाज्मिक झिल्लीवरील देखावा. एनेक्सिन रिसेप्टर्स. अपोप्टोटिक पेशींमध्ये, फॉस्फोलिपिड फॉस्फेटिल्डिसेरिन (पीडी) पुनर्स्थित आणि सेल झिल्लीच्या पृष्ठभागावर स्थानिकीकरण केले जाते. झिल्लीच्या पृष्ठभागावर PS चे स्थानिकीकरण पासून सुरू होते
अपोप्टोसिसचा प्रारंभिक टप्पा पूर्ण सेल ऱ्हास होण्यापूर्वी. पुन: संयोजक-
ny annexin V प्रोटीन (35-36 kDa), ज्याची उच्च आत्मीयता आहे
Ca +2 आयनच्या उपस्थितीत PS ला प्रतिकार. पृष्ठभागावरील एफएसशी संपर्क साधत आहे
ty पेशी, annexin V, fluorochrome मध्ये संयुग्मित, सर्व्ह करते
अपोप्टोसिसचे चिन्हक. Annexin V चा वापर सहसा सह संयोजनात केला जातो
प्रोपिडियम आयोडाइड (पीआय), जे एकाच वेळी ओळखण्याची परवानगी देते
अखंड पेशी (ॲनेक्सिन V आणि PI नकारात्मक दोन्ही), पेशी
"लवकर" एपोप्टोसिसमध्ये आहेत (ॲनेक्सिन व्ही पॉझिटिव्ह,
PI साठी नकारात्मक), आणि उशीरा ऍपोप्टोसिसमधील पेशी किंवा
नेक्रोसिसमध्ये (अनेक्सिन V आणि PI दोन्हीसाठी सकारात्मक).

CD95 Fas, किंवा APO-1, एक ट्रान्समेम्ब्रेन ग्लायकोप्रोटीन (45 kDa) आहे जो ट्यूमर नेक्रोसिस फॅक्टर (TNF-α) रिसेप्टर कुटुंबाचा सदस्य आहे. CD95 प्रतिजन हे थायमोसाइट्स, CD4 + , CD8 + परिधीय रक्तातील लिम्फोसाइट्स आणि काही प्रमाणात B लिम्फोसाइट्स आणि NK पेशींवर लक्षणीय प्रमाणात व्यक्त केले जाते. हे प्रतिजन ग्रॅन्युलोसाइट्स आणि मोनोसाइट्सवर देखील व्यक्त केले जाते, परंतु त्याची अभिव्यक्ती प्लेटलेट्स आणि एरिथ्रोसाइट्सवर आढळत नाही. CD95 रिसेप्टर सामान्य ऊती आणि ट्यूमरच्या पेशींवर देखील दिसून येतो. Fas ligand (Fas-L, CD95L) द्वारे CD95 चे बंधन ते व्यक्त करणाऱ्या पेशींमध्ये ऍपोप्टोसिस प्रेरित करते. CD95 च्या मोनोक्लोनल ऍन्टीबॉडीजमुळे फ्लो सायटोमेट्री किंवा फ्लोरोसेन्स मायक्रोस्कोपी वापरून ऍपोप्टोसिससाठी तयार पेशींची संख्या ओळखणे शक्य होते.

CD95L (Fas-L)– Fas ligand म्हणतात, एक झिल्ली प्रोटीन आहे (40 kDa). CD95L (sFas-L) चे विद्रव्य रूप देखील आहे, जे रिसेप्टर्सच्या (TNF-α) कुटुंबातील प्रथिने (26 kDa) आहे. हा प्रतिजन सायटोटॉक्सिक ई लिम्फोसाइट्स आणि एनके पेशींद्वारे व्यक्त केला जातो आणि अनेक ट्यूमर पेशींवर देखील आढळून आला आहे. CD95 रिसेप्टरला Fas-L चे बंधन लक्ष्य पेशींमध्ये ऍपोप्टोसिसच्या प्रक्रियेस प्रेरित करते. CD95L ला मोनोक्लोनल ऍन्टीबॉडीज फ्लो सायटोमेट्री किंवा फ्लोरोसेन्स मायक्रोस्कोपी वापरून ऍपोप्टोसिससाठी तयार पेशींची लोकसंख्या ओळखणे शक्य करतात.

Bcl-2- एक प्रथिने (26 kDa), ज्याची ओव्हरएक्सप्रेशन ऍपोप्टोसिस अवरोधित करते. Bcl-2 हे मायटोकॉन्ड्रियावर स्थानिकीकरण केलेले इंट्रासेल्युलर प्रोटीन आहे; म्हणून, मोनोक्लोनल ऍन्टीबॉडीज वापरून ते शोधण्यासाठी, पेशीच्या पडद्याचे प्राथमिक पारगम्यीकरण करणे आवश्यक आहे.

कामाचा शेवट -

हा विषय विभागाशी संबंधित आहे:

रोगप्रतिकारक स्थितीचे मूल्यांकन करण्याच्या पद्धती - वैद्यकीय, बालरोग आणि वैद्यकीय-रोगप्रतिबंधक विद्याशाखांच्या विद्यार्थ्यांसाठी पाठ्यपुस्तक

कुर्स्क स्टेट मेडिकल युनिव्हर्सिटी फेडरल एजन्सी फॉर हेल्थ अँड सोशल डेव्हलपमेंट.. क्लिनिकल इम्युनोलॉजी आणि ऍलर्जोलॉजी विभाग..

आपल्याला या विषयावर अतिरिक्त सामग्रीची आवश्यकता असल्यास, किंवा आपण जे शोधत आहात ते आपल्याला सापडले नाही, तर आम्ही आमच्या कार्यांच्या डेटाबेसमधील शोध वापरण्याची शिफारस करतो:

प्राप्त सामग्रीचे आम्ही काय करू:

ही सामग्री आपल्यासाठी उपयुक्त असल्यास, आपण सामाजिक नेटवर्कवरील आपल्या पृष्ठावर ती जतन करू शकता:

या विभागातील सर्व विषय:

रोगप्रतिकारक स्थिती आणि त्याचे मूल्यांकन करण्याच्या पद्धती
रोगप्रतिकारक स्थिती (IS) हा प्रयोगशाळेच्या पॅरामीटर्सचा एक संच आहे जो रोगप्रतिकारक प्रणालीच्या पेशींच्या परिमाणात्मक आणि कार्यात्मक क्रियाकलापांचे वैशिष्ट्य आहे. आयपी निर्देशक उच्च आहेत

इम्यूनोलॉजिकल संशोधनाच्या वस्तू आणि पद्धती
अभ्यासाच्या वस्तू अभ्यासाच्या पद्धती इम्युनोकम्पेटेंट पेशींची फीनोटाइपिक वैशिष्ट्ये फ्लो सायटोफ्लोरोमेट्री IMM

लिम्फोसाइट्स
रोगप्रतिकारक प्रणालीच्या पेशींचा भाग म्हणून, खरे इम्युनोसाइट्स लिम्फोसाइट्सचे सर्व प्रकार आहेत. इतर प्रकारचे ल्युकोसाइट्स (न्यूट्रोफिल्स, इओसिनोफिल्स, बेसोफिल्स, मोनोसाइट्स), मॅक्रोफेज, प्लेटलेट्स, मास्ट पेशी

MFS पेशी
परिधीय रक्त मोनोसाइट्स आणि टिश्यू मॅक्रोफेजेस प्लुरिपोटेंट स्टेम पेशींपासून प्राप्त होतात. एकदा रक्तप्रवाहात, मोनोसाइट्स 2-3 दिवसात ऊतींमध्ये स्थिर होतात, जिथे ते ऊतकांमध्ये बदलतात.

प्रतिजैविक ऑक्सिजन-आश्रित प्रणाली
जीवाणूनाशक ग्लुकोज + NADP + → पेंटोज फॉस्फेट + NADPH सायटोक्रोम b245 NADP + O2 ͛

मध्यस्थ पेशी
ग्रॅन्युलोसाइट्स हे पॉलीमॉर्फोन्यूक्लियर ल्युकोसाइट्स आहेत जे रक्तामध्ये फिरतात आणि मोनोसाइट-मॅक्रोफेज पेशींप्रमाणे, अस्थिमज्जातील मायलॉइड स्टेम सेलमधून उद्भवतात. ग्रॅनूचे तीन प्रकार आहेत

लिम्फोसाइट इम्युनोफेनोटाइपिंग पद्धती
लिम्फोसाइट्सचा अभ्यास करताना, परिधीय रक्तातील त्यांची संख्या आणि कार्यात्मक क्रियाकलापांचे मूल्यांकन केले जाते. पेशींच्या संख्येचे निर्धारण आणि वरील भिन्नता प्रतिजन लक्षात घेऊन केले जाते

मोनोन्यूक्लियर सेल फ्रॅक्शनचे पृथक्करण
मोनोन्यूक्लियर पेशींना वेगळे करण्याची पद्धत वेगवेगळ्या रक्तपेशींच्या विविध उलाढालीवर आधारित आहे. विशिष्ट घनतेच्या ग्रेडियंटचा वापर मोनोन्यूक्लियर पेशी (लिम्फोसाइट्स, मोनोसाइट्स, रक्त पेशी) वेगळे करणे शक्य करते.

Cytometry प्रवाह
फ्लो सायटोमेट्री पद्धत पेशींच्या ऑप्टिकल गुणधर्मांचे मोजमाप करण्यावर आधारित आहे. क्वार्ट्ज फ्लो सेलमध्ये लॅमिनार फ्लोमध्ये पेशी एकट्याने ओळखल्या जातात, जिथे ते केंद्रित प्रकाशातून जातात

अप्रत्यक्ष इम्युनोफ्लोरेसेन्स पद्धत
अप्रत्यक्ष इम्युनोफ्लोरेसेन्स ही फ्लोरोक्रोम लेबल असलेल्या मोनोक्लोनल अँटीबॉडीजच्या वापरावर आधारित एक पद्धत आहे, जी ल्युमिनेसेंट मायक्रोस्कोपी दरम्यान पेशींच्या विशिष्ट ल्युमिनेसेन्सचा विचार करून परिणामांचे मूल्यांकन करते.

इम्युनोसायटोकेमिकल पद्धत
इम्युनोसाइटोकेमिकल पद्धती पेरोक्सिडेस आणि अल्कलाइन फॉस्फेट सारख्या एन्झाइमच्या वापरावर आधारित आहेत. सध्या, सर्वात सामान्यतः वापरली जाणारी पद्धत पीए (पेरोक्सिडेज-अँटीपेरोक्सिडेस), सेंट.

लिम्फोसाइट्सच्या कार्यात्मक क्रियाकलापांचा अभ्यास करण्याच्या पद्धती
लिम्फोसाइट्सच्या कार्यात्मक क्रियाकलापांचे मूल्यांकन खालील प्रभावांद्वारे केले जाते: प्रतिजन ओळखण्याची क्षमता, सक्रियकरण, प्रसार आणि पेशींचे भेदभाव. लिम्फोसाइट ओळखण्याची क्षमता

लिम्फोसाइट स्फोट परिवर्तन प्रतिक्रिया
परदेशी प्रतिजन किंवा गैर-विशिष्ट माइटोजेनसह लिम्फोसाइटचा संपर्क सक्रियकरण आणि ब्लास्ट ट्रान्सफॉर्मेशन रिॲक्शन (BTLR) सोबत असतो, म्हणजे. लहान लिम्फोसाइट्सच्या स्फोटात संक्रमणासह सेल प्रसार

लिम्फोसाइट्सची मिश्रित संस्कृती
वेगवेगळ्या हॅप्लोटाइपचे MHC-II रेणू असलेल्या लिम्फोसाइट्सच्या सह-शेतीमुळे त्यांचे स्फोट परिवर्तन आणि प्रसार होतो. प्रतिसाद देणाऱ्या पेशी टी-लिम्फोसाइट्सच्या आहेत आणि परदेशी द्वारे उत्तेजित होतात

रक्त प्लाझ्मा प्रथिने
मानवी प्लाझ्मामध्ये दोनशेहून अधिक प्रथिने उपस्थित आहेत, त्यापैकी बहुतेक वेगळे केले गेले आहेत आणि संरचनात्मक आणि कार्यात्मकपणे वर्णन केले आहेत. प्लाझ्मा प्रथिने प्रामुख्याने ग्लायकोप्रोटीन्सद्वारे दर्शविली जातात. इलेक्ट्रोफो सह

ग्लोब्युलिन
α1-antitrypsin एक α1-ग्लोब्युलिन आहे जो सीरम अँटीप्रोटीज क्रियाकलापाच्या 80% पेक्षा जास्त आहे आणि α-बँडचा प्रमुख घटक आहे. मठ्ठा सोडा मध्ये

ग्लोब्युलिन
हॅप्टोग्लोबिनचे अर्धे आयुष्य 2-4 दिवस असते. सीरममध्ये हॅप्टोग्लोबिनची सामान्य सामग्री 0.3 - 2.0 g/l आहे. सीरममध्ये मुक्त हिमोग्लोबिन बांधणे हे त्याचे मुख्य कार्यात्मक महत्त्व आहे

प्रथिने इलेक्ट्रोफोरेसीस पद्धती
इलेक्ट्रोफोरेसीसचा वापर सीरम प्रथिनांचे अर्ध-परिमाणात्मक निर्धारण आणि पॅराप्रोटीन शोधण्यासाठी मोठ्या प्रमाणावर केला जातो. इलेक्ट्रोफोरेसीस सीरमसह केले जाते, प्लाझ्मा नाही, म्हणून

इम्युनोग्लोबुलिन
इम्युनोग्लोबुलिन (Ig) ही विशिष्ट प्रथिने आहेत जी रोगप्रतिकारक प्रणालीद्वारे परदेशी प्रतिजनांच्या प्रतिक्रियेच्या परिणामी तयार होतात आणि रक्ताच्या सीरममध्ये आणि इतर जैविक द्रवपदार्थांमध्ये जमा होतात.

मानवी इम्युनोग्लोबुलिन
मालमत्ता IgM IgG IgA IgD IgE आण्विक फॉर्म पेंटॅमर

इम्युनोग्लोबुलिन निर्धारित करण्याच्या पद्धती
रक्ताच्या सीरममध्ये आणि इतर जैविक द्रवपदार्थांमधील विविध वर्गांच्या Ig च्या सामग्रीचे परिमाणात्मक निर्धारण करण्यासाठी, जेलमध्ये पर्जन्य प्रतिक्रिया स्टेज करण्यासाठी विविध पर्यायांचा मोठ्या प्रमाणावर वापर केला जातो.

पॅराप्रोटीन्स
पॅराप्रोटीन्स हे इम्युनोग्लोब्युलिन किंवा त्याचे तुकडे असतात जे प्लाझ्मा पेशींद्वारे तयार होतात जे बी लिम्फोसाइट्स (मोनोक्लोन) च्या एका विशिष्ट सेल लाइनमधून तयार होतात. पॅराप्रोटीन्स अनेकदा अयशस्वी होतात

क्रायोग्लोबुलिन
क्रायोग्लोबुलिन हे पॅथॉलॉजिकल प्लाझ्मा प्रथिने (10-80 mg/ml) असतात, ज्यात 37°C पेक्षा कमी तापमानात जेलीसारखी स्थिती बनण्याची गुणधर्म असते. बहुतेक क्रायोग्लोबुलिन पॉलीक्लोनल कॉम्प्लेक्स असतात

रोगप्रतिकारक कॉम्प्लेक्स निश्चित करण्यासाठी पद्धती
Ig ला प्रतिजनाशी जोडणे ही एक शारीरिक प्रक्रिया आहे जी शरीरातून प्रतिजन काढून टाकण्याच्या उद्देशाने रोगप्रतिकारक कॉम्प्लेक्स (IC) तयार करते. तथापि, काही अटींनुसार

प्रणालीगत संयोजी ऊतक रोगांच्या निदानामध्ये ऑटोअँटीबॉडीजचे निर्धारण
आधुनिक संकल्पनांनुसार, ऑटोइम्युनिटी म्हणजे ज्या परिस्थितींमध्ये प्रतिपिंडे किंवा संवेदनशील लिम्फोसाइट्स शरीरात स्वतःच्या ऊतींच्या सामान्य प्रतिजनांविरुद्ध दिसतात.

ऑटोइम्यून रोगांचे मुख्य सेरोलॉजिकल मार्कर
प्रतिजन मूळ नाव आण्विक रचना कार्य निदान मूल्य

अप्रत्यक्ष इम्युनोफ्लोरेसेन्स प्रतिक्रियामध्ये एएनएचे निर्धारण
विशिष्ट चाचणीमध्ये, रुग्णाच्या सीरममध्ये प्रतिजैविक सब्सट्रेट्स (प्राणी यकृत किंवा मूत्रपिंड ऊतक, Hep-2 सेल कल्चर) उपस्थित पदार्थांना विशेषतः बांधले जाते.

अप्रत्यक्ष इम्युनोफ्लोरेसेन्स
ल्युमिनेसेन्सचे वैशिष्ट्य प्रतिजन विशिष्टता क्लिनिकल महत्त्व परिधीय किंवा सीमांत dsDNA, l

सॉलिड-फेज ELISA द्वारे ANA आणि ENA चे निर्धारण
ELISA ANA (UBI MAGIWELL) साठी चाचणी प्रणाली - अँटीन्यूक्लियर ऍन्टीबॉडीजच्या तपासणी विश्लेषणासाठी विहिरींमध्ये सॉर्ब केलेल्या कॉम्प्लेक्समध्ये ऍन्टीबॉडीजच्या विस्तृत श्रेणीचे अर्ध-परिमाणात्मक निर्धारण प्रदान करते.

स्वयंप्रतिकार रोग
पॅथॉलॉजीचा प्रकार इम्यूनोलॉजिकल संशोधनाचे परिणाम. प्रतिपिंडांचे प्रकार आणि त्यांची वारंवारता (%)

सायटोकाइन प्रणाली
सायटोकिन्स हा रोगप्रतिकारक प्रणालीच्या विद्रव्य पेप्टाइड मध्यस्थांचा एक वर्ग आहे जो त्याच्या विकासासाठी, कार्यासाठी आणि शरीराच्या इतर प्रणालींशी संवाद साधण्यासाठी आवश्यक आहे. ते परिभाषित करतात

इंटरल्यूकिन्स
IL-1 हा एक इम्युनोरेग्युलेटरी मध्यस्थ आहे जो दाहक प्रतिक्रिया, ऊतींचे घाव आणि संक्रमण (प्रोइनफ्लेमेटरी साइटोकाइन) दरम्यान सोडला जातो. IL-1 प्रसार आणि भिन्नता उत्तेजित करते

इंटरफेरॉन
इंटरफेरॉन (IFN) हे अँटीव्हायरल क्रियाकलाप असलेले प्रथिन म्हणून शोधले गेले आहे. IFN चा अँटीव्हायरल प्रभाव टप्प्यावर व्हायरसची इंट्रासेल्युलर प्रतिकृती रोखण्याच्या क्षमतेमुळे होतो.

ट्यूमर नेक्रोसिस घटक
ट्यूमर नेक्रोसिस फॅक्टर (TNF) हा ग्राम-नकारात्मक जीवाणूंच्या प्रतिसादात शरीराद्वारे तयार केलेला मुख्य मध्यस्थ आहे. ग्राम-नकारात्मक बॅक्टेरियाचा सक्रिय पदार्थ एलपीएस आहे, सेल सिस्टमचा एक घटक.

कॉलनी-उत्तेजक घटक
रोगप्रतिकारक प्रतिसादाच्या विकासादरम्यान तयार झालेल्या अनेक साइटोकिन्सचा अस्थिमज्जा पूर्ववर्तींच्या भेदावर उत्तेजक प्रभाव पडतो. या साइटोकिन्सना कॉलनी-उत्तेजक साइटोकिन्स म्हणतात.

वाढीचे घटक
ट्रान्सफॉर्मिंग ग्रोथ फॅक्टर (TGFβ) हे संबंधित पेप्टाइड्सचे एक कुटुंब आहे ज्यामध्ये वाढ आणि मॉर्फोजेनेसिसचे नियमन करणाऱ्या सामान्य प्रक्रियांवर अनेक प्रभाव पडतात. TGFβ - मुख्य साइटोकाइन

साइटोकिन्स निर्धारित करण्याच्या पद्धती
विविध जैविक द्रवपदार्थांमध्ये साइटोकाइन्सची सामग्री निर्धारित करणे हे इम्युनो-सक्षम पेशींच्या कार्यात्मक क्रियाकलापांचे मूल्यांकन करण्यासाठी आणि रोगप्रतिकारक प्रतिसादाचे नियमन करण्यासाठी खूप महत्वाचे आहे. वेगळ्या शब्दांत

पूरक प्रणाली
पूरक प्रणाली ही रक्तातील सीरम प्रथिनांची एक जटिलता आहे जी स्वयं-संघटन करण्यास सक्षम आहे आणि ह्युमरल प्रतिकारशक्ती आणि फॅगोसाइटोसिसच्या प्रतिक्रियांचे मध्यस्थी करू शकते. अशी सध्या माहिती आहे

पूरक क्रियाकलाप निश्चित करण्यासाठी पद्धती
मेंढीच्या एरिथ्रोसाइट्सचा वापर करून हेमोलिसिस प्रतिक्रियामध्ये पूरकांची एकूण क्रिया (टायटर) निर्धारित केली जाते. चाचणी सीरममध्ये समाविष्ट असलेल्या पूरकांमुळे संवेदनशील मेंढ्यांमध्ये हेमोलिसिस होतो

50% HE वर पूरक टायटर
हेमोलिसिस,% के हेमोलिसिस,% के हेमोलिसिस,% के हेमोलिसिस,% के

पूरक घटकांचे निर्धारण
पूरक घटक निश्चित करण्यासाठी, ELISA आणि turbidimetric पद्धत वापरली जाते, ज्याची अंमलबजावणी निदान चाचणी प्रणालींशी संलग्न निर्देशांमध्ये वर्णन केली आहे. क्लिनिकल सराव मध्ये

पूरक घटक
पूरक घटक क्लिनिकल अभिव्यक्ती C1 ची कमतरता सामान्यतः वैद्यकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण विकारांना कारणीभूत ठरत नाही, कारण ती खातो.

ग्रॅन्युलोसाइट्सच्या फागोसाइटिक क्रियाकलापांचा अभ्यास करण्याच्या पद्धती
ग्रॅन्युलोसाइट फंक्शनचे सर्वात महत्वाचे वैशिष्ट्य म्हणजे त्यांच्या फॅगोसाइटिक क्रियाकलापांचे मूल्यांकन. त्याची घट सीरम ऑप्टोनिझिंग घटकांच्या कमतरतेचा परिणाम असू शकते (अँटीबॉडीज, पूरक

NST चाचणी
नायट्रोब्ल्यू टेट्राझोलियम चाचणी (NBT चाचणी) तथाकथित सक्रिय ग्रॅन्युलोसाइट्स आणि मोनोसाइट्स ओळखण्यासाठी वापरली जाते. फागोसाइट्सचे सक्रियकरण ऑक्सिडेटिव्ह प्रतिक्रियांमध्ये तीव्र वाढीवर आधारित आहे

संशोधन कार्यप्रणाली
आवश्यक अभिकर्मक आणि साहित्य: KN 42 OPO 44 0, Na 42 OPO 44 0, NaCI, ग्लुकोज, नायट्रोब्ल्यू टेट्राझोलियम, हेपरिन, मिथाइल अल्कोहोल, मिथिलीन ग्रीनचे 1% जलीय द्रावण (असल्यास

मायलोपेरॉक्सिडेसचे निर्धारण
हायड्रोजन पेरोक्साईडच्या उपस्थितीत मायलोपेरॉक्सिडेस अनेक सब्सट्रेट्स (बेंझिडाइन, ऑर्थोफेनिल्डियामाइन) ऑक्सिडाइझ करते, ज्याची रंग प्रतिक्रिया असते. मायलोपेरॉक्सिडेस हे फेज ग्रॅन्युल्समध्ये असलेले एन्झाइम आहे

केमिल्युमिनेसन्स
उत्स्फूर्त ल्युमिनेसेन्स जो रासायनिक अभिक्रियांदरम्यान प्रतिक्रिया करणाऱ्या पदार्थांच्या उर्जेमुळे होतो त्याला केमिल्युमिनेसेन्स (CL) म्हणतात. सजीवांच्या सर्व ऊती आणि पेशींमध्ये ते अंतर्भूत असते, जोपर्यंत ते असतात

IgE सामग्रीचे निर्धारण
बहुतेक एटोपिक रोगांमध्ये रोगप्रतिकारक स्थितीच्या विशिष्ट पॅरामीटर्सचे मूल्यांकन करण्यासाठी इम्यूनोलॉजिकल पद्धतींपैकी, एकूण IgE चे प्रमाण निश्चित करणे हे सर्वात महत्वाचे आहे. तथापि, मी सहमत आहे

बेसोफिल डिग्रॅन्युलेशन चाचणी
ऍलर्जीच्या रूग्णांमध्ये, IgE चा एक महत्त्वपूर्ण भाग त्यांच्या Fc रिसेप्टर्सद्वारे विविध ल्यूकोसाइट्सद्वारे बांधला जातो. ऍन्टीबॉडीज असलेल्या पेशींची उपस्थिती संबंधित ऍलर्जीनसाठी त्यांचे संवेदना दर्शवते. बी

बेसोफिल सेल्युलर प्रतिजन उत्तेजित चाचणी - CAST
IgE-मध्यस्थ ऍलर्जीक प्रतिक्रियांच्या बाबतीत, ट्रिगरिंग यंत्रणा ऍलर्जीनला बेसोफिल्स किंवा मास्ट पेशींच्या पृष्ठभागावर विशिष्ट IgE रेणूंशी जोडण्यापासून सुरू होते. इ

ल्युकोसाइट स्थलांतर प्रतिबंधात्मक प्रतिक्रिया
प्रतिक्रिया संशयित ऍलर्जीनला संवेदनशील लिम्फोसाइट्स ओळखण्यासाठी केली जाते. संवेदनशील लिम्फोसाइट्स, विशिष्ट ऍलर्जीनशी संवाद साधताना, मध्यस्थ सोडतात (FPML

कार्य क्रमांक १
एक 23 वर्षीय रुग्ण चेहरा आणि पाय वर स्थानिकीकृत वारंवार उकळणे तक्रार. वारंवार सर्दी (वर्षातून 7-8 वेळा), ओठांवर हर्पेटिक पुरळ लक्षात घ्या.

समस्या क्रमांक 2
रुग्ण एन., 22 वर्षांचा, वारंवार तीव्र श्वसन व्हायरल इन्फेक्शन्स (वर्षातून 7 वेळा) च्या तक्रारींसह इम्यूनोलॉजिस्टकडे वळला, अनेकदा क्रॉनिक ऑब्स्ट्रक्टिव्ह ब्राँकायटिसच्या तीव्रतेसह. बॅक्टेरियाच्या वाढीस प्रतिबंध करणारा पदार्थ आयोजित

कार्य क्रमांक 3
रुग्ण टी., 27 वर्षांचा, वारंवार तीव्र श्वसन व्हायरल इन्फेक्शन्स, ट्रेकोब्रॉन्कायटिस, अशक्तपणा आणि अस्वस्थता याबद्दल डॉक्टरांचा सल्ला घेतो. विश्लेषणावरून असे दिसून आले की वर्षभरात त्याला सहा वेळा, दोनदा एआरव्हीआयचा त्रास झाला

समस्या क्रमांक 4
रुग्ण के, 45 वर्षांचा. निदान: सिस्टेमिक ल्युपस एरिथेमॅटोसस. इम्यूनोलॉजिकल अभ्यासातून समोर आले: ल्युकोसाइट्स - 5.5 x 109/l लिम्फोसाइट्स -37%, abs. 2.03 x 109

समस्या क्रमांक 5
5 वर्षांचे मूल, वारंवार आणि दीर्घकालीन आजारी मुलांच्या गटाशी संबंधित आहे, महिन्यातून एकदा ARVI पुन्हा येणे, तीव्र संसर्गाचे केंद्रबिंदू (क्रोनिक सायनुसायटिस, एडेनोइडायटिस), वाढलेली ग्रीवाच्या लिम्फ नोड्स

इम्यूनोलॉजिकल तपासणी दरम्यान
पहिल्या स्तरावरील चाचण्या एकूण पांढऱ्या रक्त पेशींची संख्या. ल्युकोफॉर्मुला टी-लिम्फोसाइट्स बी-लिम्फोसाइट्स

सामान्य रक्त विश्लेषण
नॉर्म SI युनिट हिमोग्लोबिन M F 130.0-160.0 120.0-140.0 g/l

रोगप्रतिकारक प्रणाली पेशींचे मुख्य सीडी मार्कर
CD मार्कर सेल लोकसंख्या % CD2 T आणि NK पेशी

मुलांमध्ये लिम्फोसाइट उप-लोकसंख्या
लिम्फोसाइट्स 4-5 दिवस - 3 महिने 4-8 महिने 1-2 वर्षे 2-5 वर्षे 5 वर्षांमध्ये सर्व

प्रौढांच्या रक्ताच्या सीरममध्ये इम्युनोग्लोबुलिनची पातळी
IgM IgG IgA IgE 1.3 - 1.7 g/l 12 - 14 g/l 2.1 - 2.9 g/l

ऍलर्जी MAST पॅनेल (एकाधिक ऍलर्जोसॉर्बेंट चाचणी) विविध गटांच्या ऍलर्जीनसाठी विशिष्ट इम्युनोग्लोबुलिन ओळखण्यासाठी
फूड आयजी ई पॅनेल रशियन विस्तारित आयजी ई पॅनेल फूड आयजी जी पॅनेल रशियन युनिव्हर्सल आयजी ई पॅनेल

अटींची शब्दसूची
ॲविडिटी म्हणजे अँटीबॉडीला प्रतिजन बांधण्याची ताकद, जी प्रतिपिंडांची आत्मीयता आणि संयोजीपणा द्वारे निर्धारित केली जाते. Agglutination - एकत्रित करणे

संक्षेप आणि चिन्हांची यादी
AG - प्रतिजन AOK - प्रतिपिंड-निर्मिती सेल APC - प्रतिजन-प्रस्तुत सेल AT - प्रतिपिंड VLS - अपरिहार्य लिम्फॅटिक वाहिका VVC - व्हायरस-संक्रमित

मार्कोवा ए.ए. १काश्किना ई.आय. १रुबत्सोव्ह व्ही.एस. 1 Lyakisheva R.V. १

1 सेराटोव्ह स्टेट मेडिकल युनिव्हर्सिटीचे नाव. मध्ये आणि. रझुमोव्स्की, सेराटोव्ह

अल्सरेटिव्ह कोलायटिस असलेल्या 61 रूग्णांमध्ये ऍपोप्टोसिस आणि प्रसार मार्करच्या अभिव्यक्तीचे विश्लेषण केले गेले, रोगाचा कालावधी, तीव्रता आणि कोलनमध्ये दाहक प्रक्रियेचे स्थानिकीकरण यावर अवलंबून. तुलना गटात 15 व्यावहारिकदृष्ट्या निरोगी लोकांचा समावेश होता. क्लिनिकल, प्रयोगशाळा, एंडोस्कोपिक आणि मॉर्फोलॉजिकल पद्धती वापरून रुग्णांची तपासणी करण्यात आली. कोलन म्यूकोसाच्या बायोप्सी नमुन्यांमध्ये, इम्युनोहिस्टोकेमिकल मार्कर Ki-67, P53, BAX आणि CEA ची अभिव्यक्ती निर्धारित केली गेली. अभ्यासामध्ये निरोगी व्यक्तींच्या गटाच्या तुलनेत अल्सरेटिव्ह कोलायटिस असलेल्या रुग्णांमध्ये कोलन म्यूकोसाच्या वाढीच्या क्रियाकलापात सांख्यिकीयदृष्ट्या लक्षणीय घट, तसेच प्रसार प्रक्रियेत घट आणि कालावधी आणि तीव्रता म्हणून अपोप्टोसिस मार्करच्या अभिव्यक्तीमध्ये वाढ झाल्याचे दिसून आले. रोगाच्या क्लिनिकल अभिव्यक्तींमध्ये वाढ झाली आहे.

विशिष्ट अल्सरेटिव्ह कोलायटिस

अपोप्टोसिस आणि प्रसाराचे चिन्हक

1. अरुइन एल.आय., कपुलर एल.एल., इसाकोव्ह व्ही.ए. पोट आणि आतड्यांसंबंधी रोगांचे मॉर्फोलॉजिकल निदान. – एम.: ट्रायडा-एक्स, 1998. – 496 पी.

2. गॅस्ट्रोएन्टेरोलॉजी आणि हेपॅटोलॉजी: निदान आणि उपचार: डॉक्टरांसाठी मार्गदर्शक / एड. ए.व्ही. कालिनिना, ए.एफ. लॉगिनोव्हा, ए.आय. खझानोव्हा. - दुसरी आवृत्ती, सुधारित. आणि अतिरिक्त – M.: MEDpress-inform, 2011. – 864 p.: आजारी.

3. ब्राउन डी. गॅटर के. मोनोक्लोनल अँटीबॉडी Ki-67: हिस्टोपॅथॉलॉजी // हिस्टोपॅथॉलॉजीमध्ये त्याचा वापर. - 1990. - क्रमांक 17. -

4. ब्रुनो एस., डॅरिन्कीविच झेड. सेल सायकल अवलंबित अभिव्यक्ती आणि HL-60 पेशींमध्ये Ki-67 अँटीबॉडीद्वारे आढळलेल्या आण्विक प्रोटीनची स्थिरता // सेल. जीवनपूरक. - 1992. - क्रमांक 25. -

5. सामान्य मानवी कोलोनिक म्यूकोसाच्या क्रिप्ट्समधील प्रत्येक पेशी स्थानावर निर्धारित केलेल्या प्रसार मार्करची तुलना (BrdUrd, Ki-67, PCNA) / M. Bromley, D. Rew, A. Becciolini

इत्यादी. //युरो. जे. हिस्टोकेम. - 1996. - खंड. ४०. – पृष्ठ ८९–१००.

6. Holt P.R., Moss S.F., Kapetanakis A.M. Ki-67 हे कोलनमध्ये अधिक चांगले वाढणारे मार्कर नंतर पेशी आण्विक प्रतिजन वाढवणारे आहे का? कर्करोग. एपिडिमिओल // बायोमार्कर्स. मागील – १९९७. –

क्र. ६. – पृष्ठ १३१–१३५.

7. मॅककॉर्मिक डी., चोंग सी., हॉब्स सी. आणि इतर. मोनोक्लोनल अँटीबॉडी MIB-1 // हिस्टोपॅथॉलॉजीसह निश्चित आणि मेण-एम्बेडेड विभागात Ki-67 प्रतिजन शोधणे. – १९९३. –

क्रमांक 22. – पृष्ठ 355–360.

8. रीड जे.सी. बीसीएल-2 आणि प्रोग्राम्ड सेल डेथचे नियमन // जे. सेल. बायोल. - 1994. - खंड. 124. - पृष्ठ 1-6.

नॉनस्पेसिफिक अल्सरेटिव्ह कोलायटिस (UC) हा गॅस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रॅक्टच्या सर्वात गंभीर आजारांपैकी एक आहे, ज्यामुळे रुग्णांचे अपंगत्व आणि मृत्यू होतो.

अलिकडच्या दशकांमध्ये, जगभरातील विविध देशांमध्ये यूसीच्या घटनांमध्ये वाढ झाली आहे, जे मुख्यत्वे या पॅथॉलॉजिकल प्रक्रियेच्या सुधारित निदानामुळे आहे.

सध्या, UC चे निदान क्ष-किरण, एंडोस्कोपिक आणि हिस्टोलॉजिकल संशोधन पद्धती वापरून एकात्मिक दृष्टीकोन वापरते. कोलन म्यूकोसाच्या स्थितीचे मूल्यांकन करण्याचा एक आश्वासक मार्ग म्हणजे इम्युनोहिस्टोकेमिस्ट्री म्हणजे प्रसार आणि अपोप्टोसिसच्या चिन्हकांच्या निर्धारणासह.

इम्युनोहिस्टोकेमिकल संशोधनाच्या पद्धतींपैकी, ऍपोप्टोसिस मार्कर bcl आणि p53 चा सर्वात व्यापक वापर आढळला आहे. हे ज्ञात आहे की बीसीएल कुटुंबातील प्रथिने एकतर अपोप्टोसिस इंड्युसर (बॅड, बॅक्स, बाक, इ.) किंवा अपोप्टोसिस इनहिबिटर (Bcl-2, Bcl-XL, BOO, इ.) आहेत. हे लक्षात घ्यावे की अनेक रूपांतरित पेशींमध्ये p53 प्रथिने आढळतात. त्याची कार्ये खराब झालेल्या अनुवांशिक माहितीचे पेशींच्या एका पिढीतून दुसऱ्या पिढीमध्ये हस्तांतरण रोखण्यासाठी आहेत, ज्यामध्ये अपोप्टोसिसच्या प्रारंभासह आहे. p53 च्या उच्च सामग्रीमुळे सेलमधील बॅक्सच्या एकाग्रतेत वाढ होते आणि बीसीएल -2 ची एकाग्रता कमी होते, ज्यामुळे ऍपोप्टोसिसमुळे सेल मृत्यू होतो.

प्रसाराचे चिन्हक म्हणून अनेक प्रतिजन वापरले जातात. Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA) केवळ पेशींच्या प्रसारामध्येच नाही, तर नुकसान झाल्यानंतर DNA दुरुस्तीमध्ये देखील सामील आहे, ज्यामुळे हे प्रतिजन सशर्तपणे सेल सायकलसाठी विशिष्ट बनते, कारण DNA दुरुस्ती विश्रांतीच्या टप्प्यात केली जाऊ शकते. सेल सायकल टप्प्यांशी विश्वासार्हपणे संबंधित आणखी एक प्रतिजन म्हणजे Ki-67. या प्रथिनाची अभिव्यक्ती प्रीसिंथेटिक टप्प्यात होते, संपूर्ण पेशी चक्रात वाढते आणि माइटोटिक टप्प्यात झपाट्याने कमी होते. हे प्रथिन, पीसीएनएच्या विपरीत, डीएनए दुरुस्तीमध्ये गुंतलेले नाही. Ki-67 च्या अभिव्यक्तीमुळे विश्रांतीचा टप्पा वगळता सेल सायकलच्या सर्व टप्प्यांमधील पेशी ओळखणे शक्य होते.

अभ्यासाचा उद्देश अल्सरेटिव्ह कोलायटिस असलेल्या रुग्णांमध्ये ऍपोप्टोसिस आणि प्रसार मार्करच्या अभिव्यक्तीचे विश्लेषण करणे, रोगाचा कालावधी, तीव्रता आणि दाहक प्रक्रियेचे स्थानिकीकरण यावर अवलंबून आहे.

साहित्य आणि संशोधन पद्धती

मुख्य गटात 19 ते 66 वर्षे वयोगटातील UC असलेले 61 रुग्ण (27 महिला आणि 34 पुरुष), तुलना गट - 15 व्यावहारिकदृष्ट्या निरोगी लोक. क्लिनिकल, प्रयोगशाळा, एंडोस्कोपिक, मॉर्फोलॉजिकल पद्धती, तसेच कोलन म्यूकोसाच्या बायोप्सीची इम्युनोहिस्टोकेमिकल तपासणी वापरून रुग्णांची तपासणी केली गेली.

क्लिनिकल अभिव्यक्तीची तीव्रता, रोगाचा कालावधी आणि दाहक प्रक्रियेचे स्थानिकीकरण यावर अवलंबून यूसी असलेल्या रुग्णांना गटांमध्ये विभागले गेले.

पेशींची प्रसरणशील क्रिया सूत्र वापरून प्रलिफेरेटिव्ह इंडिकेटर Ki-67 द्वारे निर्धारित केली गेली:

कुठे एक्स- सूक्ष्मदर्शकाच्या दृश्याच्या क्षेत्रात केंद्रकांची संख्या. मतमोजणी किमान 10 दृश्य क्षेत्रांमध्ये करण्यात आली.

अपोप्टोसिसचे मूल्यांकन कोलनच्या वरवरच्या आणि ग्रंथीच्या एपिथेलियममध्ये p53 आणि BAX प्रोटीनच्या अभिव्यक्तीद्वारे केले गेले. UC मधील कोलन म्यूकोसातील पुनरुत्पादक प्रक्रियांचे मूल्यांकन करण्यासाठी, कर्करोग भ्रूण प्रतिजन (CEA) ची अभिव्यक्ती निर्धारित केली गेली.

संशोधन परिणाम आणि चर्चा

इम्युनोहिस्टोकेमिकल अभ्यासाने या मार्करच्या अभिव्यक्तीचे अवलंबित्व UC च्या कालावधीवर, त्याच्या नैदानिक अभिव्यक्तीची तीव्रता आणि कोलनमध्ये दाहक प्रक्रियेचा प्रसार निश्चित केला आहे.

फरकांची समानता आणि वितरणाच्या सामान्यतेसाठी चाचणी केल्यानंतर प्राप्त डेटावर सांख्यिकीय प्रक्रिया करताना, हे सिद्ध झाले की नमुना सामान्य वितरणाच्या कायद्याशी सुसंगत नाही, म्हणून गटांची तुलना करण्यासाठी नॉनपॅरामेट्रिक निकष वापरले गेले. परिमाणवाचक वैशिष्ट्यांचे वर्णन करण्यासाठी, मध्य, वरच्या आणि खालच्या चतुर्थकांचा वापर केला गेला.

अशा प्रकारे, निरोगी व्यक्तींमध्ये, Ki-67 PI 54 (46;67) होते, जे कोलन पेशी (टेबल) ची उच्च वाढीव क्रिया दर्शवते.

निरोगी लोकांमध्ये आणि अल्सरेटिव्ह कोलायटिस असलेल्या रुग्णांमध्ये कोलन म्यूकोसाच्या एपिथेलियल पेशींचा प्रसार निर्देशांक Ki-67, त्याचा कालावधी, तीव्रता आणि स्थानिकीकरण यावर अवलंबून

विश्लेषण केलेले गट	Ki-67 मूल्ये	फरकांचे महत्त्व
तुलना गट		फरकांचे महत्त्व
रोगाचा कालावधी		р 0 ≤ ०.००१ आर 1 ≤ 0,02 р 0 ≤ ०.००१ आर 1 ≥ 0,05
विद्युत् प्रवाहाची तीव्रता मध्यम-जड		р ० ≤ ०.००४ आर 2 ≤ 0,05 р ० ≤ ०.००४ आर 2 ≤ 0,02
घाव स्थानिकीकरण दूरस्थ डावखुरा एकूण		р 0 ≤ 0.002 आर 3 ≥ 0,05 р 0 ≤ 0.002 आर 3 ≥ 0,05

टिपा:

आर 0 - नियंत्रण गटातील फरकांचे महत्त्व;
आर 1 - 1 वर्षापेक्षा कमी कालावधीच्या रोगासह फरकांचे महत्त्व;
आर 2 - रोगाच्या सौम्य कोर्ससह मतभेदांचे महत्त्व;
आर 3 - रोगाच्या दूरस्थ स्थानिकीकरणासह फरकांचे महत्त्व.

निरोगी व्यक्तींमध्ये BAX अभिव्यक्ती 80% प्रकरणांमध्ये अनुपस्थित होती आणि 20% मध्ये मार्करची कमी अभिव्यक्ती होती. CEA अभिव्यक्ती 50% प्रकरणांमध्ये दिसून आली आणि ती देखील कमी होती.

सर्व रूग्ण, रोगाच्या कालावधीनुसार, 3 गटांमध्ये विभागले गेले: 1 ला UC सह 1 वर्षापर्यंत टिकतो, दुसरा 1 ते 5 वर्षांचा कालावधी आणि तिसरा - 5 वर्षांपेक्षा जास्त.

तक्त्यावरून खालीलप्रमाणे, गट 1 च्या तुलनेत 1 ते 5 वर्षे रोग कालावधी असलेल्या रुग्णांच्या गटामध्ये Ki-67 PI मध्ये वाढ ( आर≤ ०.०२), कोलनच्या श्लेष्मल झिल्लीमध्ये पुनरुत्पादक प्रक्रिया प्रतिबिंबित करणाऱ्या पेशींच्या वाढीव वाढीव क्रियाकलापांद्वारे स्पष्ट केले जाऊ शकते. 1 वर्षापर्यंत अल्सरेटिव्ह कोलायटिस असलेल्या रूग्णांच्या गटातील कमी Ki-67 PI, ज्याचे प्रमाण 31(25;36) आहे, हे रोगाच्या प्रारंभी आतड्यांसंबंधी श्लेष्मल त्वचा मध्ये वाढीव प्रक्रियांमध्ये स्पष्टपणे घट दर्शवू शकते.

रोगाच्या कालावधीनुसार p53 निर्देशकाचा अभ्यास करताना, या प्रथिनेच्या अभिव्यक्तीचा कोणताही नमुना उघड झाला नाही, तथापि, निरोगी व्यक्तींचा समूह आणि रोगाचा कालावधी असलेल्या रुग्णांच्या गटामध्ये या मार्करच्या अभिव्यक्तीमध्ये फरक आहे. 1 वर्ष ते 5 वर्षे ( आर≤ ०.०५) आणि ५ वर्षांपेक्षा जास्त ( आर ≤ 0,03).

कोलनच्या वरवरच्या आणि ग्रंथींच्या उपकला दोन्हीमध्ये BAX अभिव्यक्ती आढळून आली. असे आढळून आले की पृष्ठभागावरील उपकला आणि ग्रंथींच्या उपकलामध्ये या मार्करची अभिव्यक्ती प्रत्येक वैयक्तिक प्रकरणात जवळजवळ सारखीच असते. 100% प्रकरणांमध्ये UC रूग्णांमध्ये BAX अभिव्यक्ती आढळून आली होती; आर ≤ 0,01).

सीईए अभिव्यक्तीच्या तीव्रतेची तुलना करताना, रोगाच्या वाढत्या कालावधीसह लक्षणीय वाढ नोंदवली गेली. तुलना गटात, सीईए अभिव्यक्ती केवळ वेगळ्या प्रकरणांमध्ये प्रकट झाली ( आर ≤ 0,003).

UC च्या नैदानिक अभिव्यक्तीच्या तीव्रतेवर अवलंबून, Ki-67 PI मध्ये बदल देखील आढळले (टेबल पहा). मध्यम रोग असलेल्या रुग्णांमध्ये Ki-67 PI कमी झाले ( आर≤ ०.०५) आणि गंभीर स्वरूप ( आर≤ ०.०२) सौम्य कोर्स असलेल्या रुग्णांच्या तुलनेत, निरोगी व्यक्तींचा गट आणि कोणत्याही तीव्रतेच्या UC असलेल्या रुग्णांमध्ये देखील फरक होता ( आर ≤ 0,004).

p53 मार्कर अभिव्यक्तीतील बदल तीव्रतेच्या तीव्रतेवर अवलंबून असतात (12.5% सौम्य; 35.7% मध्यम तीव्रतेसाठी आणि 50% तीव्रतेसाठी). निरोगी व्यक्तींच्या गटांमध्ये आणि UC चे मध्यम आणि गंभीर स्वरूप असलेल्या रुग्णांमध्ये सांख्यिकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण फरक प्राप्त झाला आर ≤ 0,03).

BAX आणि CEA 100% प्रकरणांमध्ये व्यक्त केले गेले; तथापि, UC च्या नैदानिक अभिव्यक्तीच्या तीव्रतेवर या चिन्हकांच्या अभिव्यक्तीच्या तीव्रतेचे कोणतेही अवलंबन आढळले नाही. क्लिनिकल अभिव्यक्ती (p≤0.01) च्या तीव्रतेकडे दुर्लक्ष करून, तुलना गट आणि UC असलेल्या रुग्णांमध्ये मार्कर अभिव्यक्तीमधील फरक स्थापित केला गेला.

दाहक प्रक्रियेच्या स्थानिकीकरणावर Ki-67 PI च्या अवलंबित्वाचे विश्लेषण करताना, निरोगी लोकांच्या तुलनेत UC असलेल्या रुग्णांच्या गटात मार्कर अभिव्यक्तीमध्ये लक्षणीय वाढ दिसून आली ( आर≤ ०.००२), तथापि, मुख्य गटातील तुलनात्मक विश्लेषणामध्ये, मार्कर अभिव्यक्ती आणि प्रक्रियेच्या भिन्न स्थानिकीकरणांमध्ये सांख्यिकीयदृष्ट्या महत्त्वपूर्ण फरक प्राप्त झाला नाही ( आर ≥ 0,05).

सर्व रुग्णांमध्ये p53 अभिव्यक्ती आढळली नाही. डिस्टल कोलायटिस असलेल्या रूग्णांमध्ये, 18% रूग्णांमध्ये डाव्या बाजूच्या कोलायटिससह, केवळ 20% प्रकरणांमध्ये सकारात्मक परिणाम प्राप्त झाला. एकूण आतड्याच्या नुकसानासह, p53 अभिव्यक्ती 100% प्रकरणांमध्ये आढळली ( आरडिस्टल कोलायटिसच्या तुलनेत ≤ 0.03). हे नोंद घ्यावे की एपिथेलियल मेटाप्लासियाच्या चिन्हे असलेल्या भागात अभिव्यक्ती सर्वात तीव्र होती.

एकूण कोलायटिस असलेल्या गटामध्ये BAX अभिव्यक्तीची तीव्रता डिस्टल कोलायटिसच्या तुलनेत लक्षणीयरीत्या जास्त होती ( आर ≤ 0,03).

सीईए अभिव्यक्ती दाहक प्रक्रियेच्या स्थानावर अवलंबून नव्हती, परंतु तुलना गटाच्या तुलनेत यूसी असलेल्या रूग्णांमध्ये ते लक्षणीय प्रमाणात जास्त होते ( आर ≤ 0,03).

नॉनस्पेसिफिक अल्सरेटिव्ह कोलायटिसमध्ये, कोलन म्यूकोसाच्या एपिथेलियल पेशींची वाढणारी क्रिया लक्षणीयरीत्या कमी असते आणि ऍपोप्टोसिसचे प्रमाण दाहक बदलांच्या अनुपस्थितीत जास्त असते.

नॉन-स्पेसिफिक अल्सरेटिव्ह कोलायटिसच्या कालावधीत वाढ होण्याबरोबरच कोलन म्यूकोसाच्या एपिथेलियमची कमी वाढणारी क्रिया असते, ज्यामुळे त्याची दुरुस्ती बिघडू शकते.

अल्सरेटिव्ह कोलायटिसच्या नैदानिक अभिव्यक्तींच्या वाढत्या तीव्रतेसह, कोलन एपिथेलियल पेशींच्या वाढीच्या क्रियाकलापांच्या प्रमाणातच घट होत नाही, तर ऍपोप्टोसिस सक्रियतेच्या दरातही वाढ होते.

जेव्हा प्रक्षोभक प्रक्रिया कोलनच्या समीप भागांमध्ये पसरते, तेव्हा ऍपोप्टोसिस दरांमध्ये वाढ आढळून आली.

पुनरावलोकनकर्ते:

श्वार्ट्स यु.जी., डॉक्टर ऑफ मेडिकल सायन्स, प्राध्यापक, प्रमुख. फॅकल्टी थेरपी विभाग, सेराटोव्ह स्टेट मेडिकल युनिव्हर्सिटीचे नाव V.I. रझुमोव्स्की" रशियाचे आरोग्य आणि सामाजिक विकास मंत्रालय, सेराटोव्ह;

फेडोरिना टी.ए., डॉक्टर ऑफ मेडिकल सायन्सेस, प्रोफेसर, प्रमुख. सामान्य आणि क्लिनिकल पॅथॉलॉजी विभाग: पॅथॉलॉजिकल ऍनाटॉमी, पॅथॉलॉजिकल फिजियोलॉजी, समारा स्टेट मेडिकल युनिव्हर्सिटी, रशियाचे आरोग्य आणि सामाजिक विकास मंत्रालय, समारा.

हे काम 9 डिसेंबर 2011 रोजी संपादकाला मिळाले.

ग्रंथसूची लिंक

मार्कोवा ए.ए., काश्किना ई.आय., रुबत्सोव व्ही.एस., लियाकिशेवा आर.व्ही. अपॉप्टोसिसच्या चिन्हकांच्या अभिव्यक्तीची वैशिष्ट्ये आणि गैर-विशिष्ट अल्सेरेटिव्ह कोलायटिस असलेल्या रुग्णांमध्ये प्रसार // मूलभूत संशोधन. - 2012. - क्रमांक 2. - पृष्ठ 79-82;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=29400 (प्रवेश तारीख: 07/18/2019). "अकादमी ऑफ नॅचरल सायन्सेस" या प्रकाशन गृहाने प्रकाशित केलेली मासिके आम्ही तुमच्या लक्षात आणून देत आहोत.

180-200 न्यूक्लियोटाइड्सच्या आकाराच्या पटीत CAD (कॅस्पेस सक्रिय DNase). ऍपोप्टोसिसच्या परिणामी, अपोप्टोटिक बॉडी तयार होतात - अखंड ऑर्गेनेल्स आणि न्यूक्लियर क्रोमॅटिनचे तुकडे असलेले झिल्ली वेसिकल्स. हे शरीर शेजारच्या पेशी किंवा मॅक्रोफेजेस फॅगोसाइटोसिसद्वारे वेढलेले असतात. सेल्युलर एन्झाईम्समुळे एक्सट्रासेल्युलर मॅट्रिक्स प्रभावित होत नसल्यामुळे, मोठ्या संख्येने ऍपोप्टोटिक पेशींसह, जळजळ दिसून येत नाही.

ऍपोप्टोसिसची प्रक्रिया शरीरातील पेशींच्या संख्येच्या शारीरिक नियमनासाठी, जुन्या पेशींचा नाश करण्यासाठी, त्यांच्या प्रतिजनांवर (ऑटोअँटीजेन्स) प्रतिक्रिया नसलेल्या लिम्फोसाइट्सच्या निर्मितीसाठी, वनस्पतींच्या पानांच्या शरद ऋतूतील गळतीसाठी आवश्यक आहे. किलर टी-लिम्फोसाइट्सचा सायटोटॉक्सिक प्रभाव, शरीराच्या भ्रूण विकासासाठी (पक्ष्यांच्या भ्रूणांमधील बोटांमधील त्वचेचा पडदा गायब होणे) आणि इतर.

सामान्य पेशी ऍपोप्टोसिसच्या व्यत्ययामुळे अनियंत्रित सेल प्रसार आणि ट्यूमरचा देखावा होतो.

1. ऍपोप्टोसिसचा अर्थ

अपोप्टोसिस हा बहुतेक बहुपेशीय जीवांच्या जीवनाचा अविभाज्य भाग आहे. विकास प्रक्रियेत हे विशेषतः महत्त्वपूर्ण भूमिका बजावते. उदाहरणार्थ, टेट्रापॉड्सचे हातपाय कुदळाच्या आकाराच्या वाढीच्या रूपात तयार होतात आणि बोटांची निर्मिती त्यांच्यामधील पेशींच्या मृत्यूमुळे होते. यापुढे आवश्यक नसलेल्या पेशी देखील ऍपोप्टोसिसच्या अधीन असतात, अशा प्रकारे मेटामॉर्फोसिस दरम्यान टॅडपोल्समधील शेपटी विशेषतः नष्ट होते. भ्रूण विकासादरम्यान कशेरुकांच्या मज्जातंतूंच्या ऊतींमध्ये, अर्ध्याहून अधिक न्यूरॉन्स तयार झाल्यानंतर लगेच ऍपोप्टोसिसने मरतात.

पेशींची “गुणवत्ता” नियंत्रित करण्यासाठी ॲपोप्टोसिस देखील प्रणालीचा एक भाग आहे, ते आपल्याला चुकीच्या पद्धतीने स्थित, खराब झालेले, गैर-कार्यक्षम किंवा शरीरासाठी संभाव्य धोकादायक असलेल्या नष्ट करण्यास अनुमती देते. एक उदाहरण बी-लिम्फोसाइट्स आहे, जे उपयुक्त प्रतिजन-विशिष्ट रिसेप्टर्स वाहून न घेतल्यास किंवा ऑटोरिएक्टिव असल्यास ते मरतात. संक्रमणादरम्यान सक्रिय झालेल्या बहुतेक लिम्फोसाइट्स देखील ऍपोप्टोसिसवर मात केल्यानंतर मरतात.

प्रौढ जीवांमध्ये, सेल प्रसार आणि ऍपोप्टोसिसचे एकाचवेळी नियमन संपूर्ण व्यक्ती आणि त्याच्या वैयक्तिक अवयवांचे आकार राखणे शक्य करते. उदाहरणार्थ, हेपॅटोसाइट्सच्या प्रसारास उत्तेजन देणारे फेनोबार्बिटल औषध घेतल्यानंतर, उंदरांचे यकृत मोठे होते. तथापि, या पदार्थाची क्रिया थांबल्यानंतर लगेचच, सर्व अतिरिक्त पेशी ऍपोप्टोसिसमधून जातात, परिणामी यकृत सामान्य आकारात परत येते.

अपोप्टोसिस देखील उद्भवते जेव्हा पेशी मोठ्या प्रमाणात अंतर्गत नुकसान "जाणते" जे ते दुरुस्त करू शकत नाही. उदाहरणार्थ, डीएनएचे नुकसान झाल्यास, हे घडू नये म्हणून कोशिका कर्करोगात बदलू शकते, सामान्य परिस्थितीत ती "आत्महत्या" करते; व्हायरसने संक्रमित झालेल्या मोठ्या संख्येने पेशी देखील ऍपोप्टोसिसमुळे मरतात.

2. अपोप्टोटिक पेशींचे मार्कर

अपोप्टोसिस मार्कर

TUNEL पद्धतीचा वापर करून अपोप्टोटिक पेशींमध्ये डीएनए विखंडन शोधणे, उंदीर यकृताच्या ऊतींचे एक नमुना, अपोप्टोटिक सेलचे केंद्रक तपकिरी रंगाचे असते, ऑप्टिकल मायक्रोस्कोपी.

ऍग्रोज जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस वापरून अपोप्टोटिक पेशींमध्ये डीएनए विखंडन शोधणे. डावीकडे: अपोप्टोटिक पेशींपासून डीएनए विलग - "डीएनएची शिडी" दृश्यमान आहे; मध्य: मार्कर; केस: उपचार न केलेल्या पेशींमधून डीएनए नमुना नियंत्रित करा. सेल लाइन H4IIE (रॅट हेपॅटोमा), एपोप्टोसिस इंड्यूसर - पॅराक्वॅट, एथिडियम ब्रोमाइड वापरून व्हिज्युअलायझेशन.

शीर्ष: फ्लोरोसेंट डाई (Hoechst 34580) सह डाग करून क्रोमॅटिन कंडेन्सेशन आणि विखंडन शोधणे. मध्य: ॲनेक्सिन व्ही सह डाग करून प्लाझमॅलेमाच्या बाहेरील थरामध्ये फॉस्फॅडिडीलसेरीनचे स्थानांतर शोधणे. तळाशी: अपोप्टोटिक पेशींचे तेज-क्षेत्र मायक्रोग्राफ. सेल लाइन - जुर्कट, अपोप्टोसिस इंड्युसर - TRAIL, confocalआणि प्रकाश ऑप्टिकल मायक्रोस्कोपी.

एपोप्टोसिसमुळे मरणाऱ्या पेशी अनेक आकृतिबंध वैशिष्ट्यांद्वारे ओळखल्या जाऊ शकतात. ते लहान आणि अधिक दाट (पायक्नोसिस), गोलाकार बनतात आणि स्यूडोपोडिया गमावतात, त्यांच्यातील सायटोस्केलेटन नष्ट होते, विभक्त पडदा विघटित होतो, क्रोमॅटिन कंडेन्सेस आणि तुकडे होतात. पेशींच्या पृष्ठभागावर मोठ्या संख्येने वेसिकल्स दिसतात; जर पेशी पुरेसे मोठे असतील तर ते झिल्लीने वेढलेल्या तुकड्यांमध्ये विघटित होतात - अपोप्टोटिक बॉडी.

अपोप्टोटिक पेशींमध्ये, मॉर्फोलॉजिकल पेशींव्यतिरिक्त, मोठ्या प्रमाणात जैवरासायनिक बदल देखील होतात. डीएनएचे भाग न्यूक्लियोसोममधील लिंकर क्षेत्रांमध्ये विशेष न्यूक्लीजद्वारे समान लांबीच्या तुकड्यांमध्ये कापले जातात. म्हणून, इलेक्ट्रोफोरेसीस वापरून ऍपोप्टोटिक सेलचे सर्व डीएनए वेगळे करताना, एक वैशिष्ट्यपूर्ण "शिडी" पाहिली जाऊ शकते. DNA विखंडन शोधण्याची दुसरी पद्धत म्हणजे TUNEL पद्धतीचा वापर करून त्याचे मुक्त टोक टॅग करणे ( ट erminal deoxynucleotidyl transferase d यूटी.पी n ick eएनडी l abeling ) .

ऍपोप्टोटिक पेशींच्या प्लाझ्मा झिल्लीमध्ये देखील बदल होतात. सामान्य परिस्थितीत, नकारात्मक चार्ज केलेले फॉस्फोलिपिड फॉस्फेटिडाइलसेरिन केवळ त्याच्या आतील (सायटोसोलवर परत आले) थरात असते, परंतु ऍपोप्टोसिस दरम्यान ते बाह्य स्तरावर "उडी मारते". हा रेणू जवळच्या फागोसाइट्ससाठी "मला खा" सिग्नल म्हणून काम करतो. फॉस्फेटिडाईलसेरिन-प्रेरित ऍपोप्टोटिक पेशींचे आच्छादन, इतर प्रकारच्या फॅगोसाइटोसिसच्या विपरीत, दाहक मध्यस्थांच्या मुक्ततेमध्ये परिणाम होत नाही. प्लाझमॅलेमामधील वर्णित बदल ऍपोप्टोसिसमुळे मरणाऱ्या पेशी ओळखण्यासाठी आणखी एक पद्धत अधोरेखित करते - एनेक्सिन व्ही सह डाग, जे विशेषत: फॉस्फेटिडाईलसेरिनला जोडते.

3. कॅस्पेस - एपोप्टोसिसचे मध्यस्थ

अपोप्टोसिसमध्ये मध्यस्थी करणारी सेल्युलर प्रणाली सर्व प्राण्यांमध्ये सारखीच असते, ज्यामध्ये कॅस्पेस प्रोटीनचे कुटुंब मध्यवर्ती स्थान व्यापतात. कॅस्पेसेस हे प्रोटीज असतात ज्यांच्या सक्रिय मध्यभागी सिस्टीन अवशेष असतात आणि विशिष्ट एस्पार्टिक ऍसिडच्या अवशेषांवर त्यांचे थर कापतात (म्हणूनच नाव: cपासून सिस्टीनआणि aspपासून aspartic ऍसिड). कॅस्पेसेस सेलमध्ये निष्क्रिय प्रोकॅस्पेस म्हणून संश्लेषित केले जातात, जे इतर, आधीच सक्रिय केलेल्या कॅस्पेससाठी सब्सट्रेट बनू शकतात, जे त्यांना एस्पार्टेट अवशेषांवर एक किंवा दोन ठिकाणी कापतात. दोन तयार झालेले तुकडे - एक मोठा आणि एक लहान - एकमेकांशी जोडलेले असतात, एक डायमर बनवतात, जे समान मंदकशी संबंधित असतात. अशा प्रकारे तयार झालेला टेट्रामर एक सक्रिय प्रोटीज आहे, जो सब्सट्रेट प्रथिने कापू शकतो. प्रमुख आणि किरकोळ उपयुनिट्सशी संबंधित क्षेत्रांव्यतिरिक्त, प्रोकॅस्पेसमध्ये कधीकधी अवरोधक प्रोडोमेन देखील असतात, जे क्लीवेज नंतर खराब होतात.

इतरांद्वारे काही कॅस्पेसच्या क्लीव्हेज आणि सक्रियतेच्या परिणामी, एक प्रोटीलिटिक कॅस्केड तयार होतो, जो सिग्नलमध्ये लक्षणीय वाढ करतो आणि अपोप्टोसिसला एका विशिष्ट बिंदूपासून अपरिवर्तनीय प्रक्रिया बनवते. ज्या प्रोकॅस्पेस या कॅस्केडला सुरुवात करतात त्यांना इनिशिएटर म्हणतात आणि त्यांच्या सब्सट्रेट्सला इफेक्टर म्हणतात. एकदा सक्रिय झाल्यानंतर, इफेक्टर कॅस्पेसेस इतर इफेक्टर प्रोकास्पेसेस किंवा लक्ष्यित प्रथिने क्लीव्ह करू शकतात. एपोप्टोसिस दरम्यान नष्ट झालेल्या इफेक्टर कॅस्पेसेसच्या लक्ष्यांमध्ये, विशेषतः, न्यूक्लियर लॅमिना प्रथिने समाविष्ट आहेत, ज्याच्या विघटनामुळे या संरचनेचे विघटन होते. प्रथिने देखील कमी होतात आणि, सामान्य परिस्थितीत, CAD एंडोन्युक्लीजला प्रतिबंधित करते, परिणामी DNA विखंडन होते. कॅस्पेसेस आणि सायटोस्केलेटल आणि इंटरसेल्युलर आसंजन प्रथिने क्लीव्ह केली जातात, ज्यामुळे एपोप्टोटिक पेशी गोळा होतात आणि शेजारच्या पेशींपासून विलग होतात आणि अशा प्रकारे फॅगोसाइट्ससाठी सोपे लक्ष्य बनतात.

ऍपोप्टोसिस होण्यासाठी आवश्यक असलेल्या कॅस्पेसेसचा संच ऊतींच्या प्रकारावर आणि सेलचा मृत्यू ज्या मार्गाने सक्रिय होतो त्यावर अवलंबून असतो. उदाहरणार्थ, उंदरांमध्ये, जेव्हा इफेक्टर कॅस्पेस-3 चे एन्कोडिंग जनुक “बंद” केले जाते, तेव्हा मेंदूमध्ये ऍपोप्टोसिस होत नाही, परंतु सामान्यपणे इतर ऊतींमध्ये होतो.

प्रोकॅस्पेस जीन्स निरोगी पेशींमध्ये सक्रिय असतात, आणि म्हणून प्रथिने अपोप्टोसिस होण्यासाठी सतत उपस्थित असतात; इनिशिएटर प्रोकॅस्पेसेसमध्ये एक लांब प्रोडोमेन समाविष्ट आहे ज्यामध्ये CARD ( कॅस्पेस रिक्रूटमेंट डोमेन , कॅस्पेस रिक्रूटमेंट डोमेन). जेव्हा सेलला ऍपोप्टोसिसला उत्तेजित करणारा सिग्नल प्राप्त होतो तेव्हा CARD इनिशिएटर प्रोकॅस्पेसेसला ऍडॉप्टर प्रथिनांना सक्रियकरण कॉम्प्लेक्स तयार करण्यास अनुमती देते. सक्रियकरण कॉम्प्लेक्समध्ये, अनेक प्रोकॅस्पेस रेणू एकमेकांच्या जवळ असतात, जे त्यांना सक्रिय अवस्थेत प्रवेश करण्यासाठी पुरेसे असते, त्यानंतर ते एकमेकांना कापतात.

सस्तन प्राण्यांच्या पेशींमध्ये कॅस्पेस कॅस्केड सक्रिय करण्यासाठी दोन सर्वोत्तम अभ्यासलेले सिग्नलिंग मार्गांना बाह्य आणि आंतरिक (माइटोकॉन्ड्रियल) म्हणतात, ज्यापैकी प्रत्येक स्वतःचे इनिशिएटर प्रोकॅस्पेसेस वापरतो.

4. ऍपोप्टोसिस सक्रिय करण्याचे मार्ग

४.१. बाह्य मार्ग

सेलला बाहेरून अपोप्टोसिस प्रेरित करणारे सिग्नल मिळू शकतात, उदाहरणार्थ, सायटोटॉक्सिक लिम्फोसाइट्सकडून. या प्रकरणात, तथाकथित बाह्य मार्ग सक्रिय केला जातो ( बाह्य मार्ग), डेथ रिसेप्टर्ससह प्रारंभ. डेथ रिसेप्टर्स हे ट्रान्समेम्ब्रेन प्रोटीन असतात जे ट्यूमर नेक्रोसिस फॅक्टर (TNF) रिसेप्टर फॅमिलीशी संबंधित असतात, जसे की TNF रिसेप्टर स्वतः आणि डेथ रिसेप्टर फास. ते होमोट्रिमर बनवतात, ज्यामध्ये प्रत्येक मोनोमरमध्ये एक्स्ट्रासेल्युलर लिगँड-बाइंडिंग डोमेन, ट्रान्समेम्ब्रेन डोमेन आणि सायटोप्लाज्मिक डेथ डोमेन असते आणि ॲडॉप्टर प्रोटीनद्वारे प्रोकॅस्पेसेस आकर्षित करतात आणि सक्रिय करतात.

डेथ रिसेप्टर लिगँड देखील होमोट्रिमर आहेत. ते एकमेकांशी संबंधित आहेत आणि सिग्नलिंग रेणूंच्या ट्यूमर नेक्रोसिस फॅक्टर कुटुंबाशी संबंधित आहेत. उदाहरणार्थ, सायटोटॉक्सिक लिम्फोसाइट्स त्यांच्या पृष्ठभागावर Fas ligands वाहून नेतात, जे लक्ष्य पेशींच्या प्लाझमलेमावर Fas डेथ रिसेप्टर्सला बांधू शकतात. या प्रकरणात, या रिसेप्टर्सचे इंट्रासेल्युलर डोमेन ॲडॉप्टर प्रोटीनशी जोडलेले आहेत ( FADD, Fas-संबंधित मृत्यू डोमेन ), आणि या बदल्यात, इनिशिएटर प्रोकॅस्पेसेस 8 आणि/किंवा 10 आकर्षित करतात. घटनांच्या या मालिकेचा परिणाम म्हणून, एक मृत्यू-प्रेरित करणारे सिग्नलिंग कॉम्प्लेक्स तयार होते - DISC ( मृत्यू प्रेरित सिग्नलिंग कॉम्प्लेक्स ). एकदा या कॉम्प्लेक्समध्ये सक्रिय झाल्यानंतर, इनिशिएटर कॅस्पेसेस इफेक्टर प्रोकॅस्पेसेस कापतात आणि ऍपोप्टोटिक कॅस्केड ट्रिगर करतात.

अनेक पेशी रेणूंचे संश्लेषण करतात जे एका विशिष्ट मर्यादेपर्यंत बाह्य ऍपोप्टोसिस मार्गाच्या सक्रियतेपासून त्यांचे संरक्षण करतात. अशा संरक्षणाचे उदाहरण म्हणजे तथाकथित डिकोय रिसेप्टर्सची अभिव्यक्ती असेल ( डिकॉय रिसेप्टर्स), एक्स्ट्रासेल्युलर लिगँड बंधनकारक डोमेन असणे, परंतु सायटोप्लाज्मिक डेथ डोमेन नाही, आणि त्यामुळे ऍपोप्टोसिस ट्रिगर करू शकत नाही आणि लिगँड्ससाठी पारंपारिक मृत्यू रिसेप्टर्सशी स्पर्धा करू शकत नाही. पेशी प्रथिने देखील तयार करू शकतात जे बाह्य अपोप्टोटिक मार्ग अवरोधित करतात, जसे की FLIP, ज्याची रचना 8 आणि 10 सारखीच असते, परंतु प्रोटीओलाइटिक क्रियाकलाप नसतात. हे DISC कॉम्प्लेक्समध्ये इनिशिएटर प्रोकास्पेसेसचे बंधन प्रतिबंधित करते.

४.२. आतील मार्ग

अपोप्टोसोम

अपोप्टोसिस सेलमधून देखील ट्रिगर केले जाऊ शकते, उदाहरणार्थ दुखापतीमुळे, डीएनएचे नुकसान, ऑक्सिजनची कमतरता, पोषक तत्वे किंवा बाह्य अस्तित्व सिग्नल. पृष्ठवंशीयांमध्ये, या सिग्नलिंग मार्गाला आंतरिक म्हणतात ( अंतर्गत मार्ग) किंवा माइटोकॉन्ड्रिअल, त्यातील महत्त्वाची घटना म्हणजे मायटोकॉन्ड्रियाच्या इंटरमेम्ब्रेन स्पेसमधून विशिष्ट रेणूंचे प्रकाशन. झोक्रेमच्या अशा रेणूंच्या आधी सिक्रोम सी आहे, जो बहुतेक प्रकरणांमध्ये मायटोकॉन्ड्रियाच्या इलेक्ट्रॉन ट्रान्सपोर्ट लॅन्सिनमध्ये येतो, साइटोप्लाझममधील प्रथिने आणखी एक कार्य करते - ते ॲडॉप्टर प्रोटीनमध्ये येते Apaf ( अपोप्टोटिक प्रोटीज सक्रिय करणारा घटक-l ), ज्यामुळे ते अपोप्टोसोम नावाच्या चाकासारख्या सात-आभासी संरचनेत ऑलिगोमराइज होते. अपोप्टोसोम इनिशिएटर प्रोकॅस्पेस-9 ची भरती करते आणि सक्रिय करते, जे नंतर इनिशिएटर प्रोकास्पेस सक्रिय करू शकते.

काही पेशींमध्ये, बाह्य एपोप्टोसिस मार्गाने पेशींना प्रभावीपणे मारण्यासाठी आंतरिक ऍपोप्टोसिस मार्ग सक्रिय करणे आवश्यक आहे. आंतरिक मार्ग Bcl-2 फॅमिली प्रोटीनद्वारे काटेकोरपणे नियंत्रित केला जातो.

४.२.१. Bcl-2 फॅमिली प्रथिनेंद्वारे आंतरिक मार्गाचे नियमन

Bcl-2 कुटुंबामध्ये उत्क्रांतीपूर्वक संरक्षित प्रथिने समाविष्ट आहेत, ज्याचे मुख्य कार्य म्हणजे माइटोकॉन्ड्रियाच्या इंटरमेम्ब्रेन स्पेसमधून सायटोक्रोम सी आणि इतर रेणू सोडण्याचे नियमन. त्यांच्यामध्ये प्रो-अपोप्टोटिक आणि अँटी-अपोप्टोटिक रेणू आहेत जे एकमेकांशी विविध संयोजनांमध्ये संवाद साधू शकतात, एकमेकांना दाबू शकतात, त्यांच्या क्रियाकलापांमधील संतुलन आणि सेलचे भवितव्य ठरवू शकतात.

या कुटुंबातील सुमारे 20 प्रथिने आता ज्ञात आहेत, त्या सर्वांमध्ये BH1-4 (BH1-4) नावाच्या चार अल्फा-हेलिकल Bcl2 होमोलॉजी डोमेनपैकी किमान एक समाविष्ट आहे. bcl2 homology). Bcl2 कुटुंबातील अँटीपोप्टोटिक प्रथिनांमध्ये बीसीएल-2, तसेच बीसीएल-एक्स एल, बीसीएल-डब्ल्यू, एमसीएल-1 आणि ए1 यासह सर्व चार डोमेन असतात. प्रोपोप्टोटिक प्रथिने दोन गटांमध्ये विभागली जातात, त्यापैकी पहिल्या सदस्यांमध्ये तीन बीएच डोमेन (बीएच 1-3) असतात, विशेषत: बाक, बाक्स आणि बोक (नंतरचे केवळ पुनरुत्पादक अवयवांच्या ऊतींमध्ये व्यक्त केले जाते). Bcl-2 कुटुंबातील सर्वात जास्त म्हणजे प्रो-अपोप्टोटिक प्रथिनांचा दुसरा गट आहे ज्यामध्ये फक्त BH3 डोमेन (केवळ BH3) असते, यामध्ये Bim, Bid, Bad, Bik/Nbk, Bmf, Nix/BNIP3, Hrk, नोक्सा, पुमा.

सामान्य परिस्थितीत (म्हणजे, जेव्हा पेशी अपोप्टोसिसच्या अधीन नसतात), Bcl-2 आणि Bcl-X L सारखी अँटी-अपोप्टोटिक प्रथिने BH123 (बॅक्स आणि बाक) प्रो-अपोप्टोटिक प्रोटीन्सशी बांधली जातात आणि त्यांना बाह्य माइटोकॉन्ड्रियलमध्ये पॉलिमरायझिंग होण्यापासून प्रतिबंधित करतात. छिद्र तयार करण्यासाठी पडदा. विशिष्ट अपोप्टोटिक उत्तेजनाच्या क्रियेच्या परिणामी, केवळ BH3 डोमेन असलेले प्रो-अपोप्टोटिक प्रथिने सक्रिय होतात किंवा सेलमध्ये संश्लेषित होऊ लागतात. ते, यामधून, अँटी-अपोप्टोटिक प्रथिने प्रतिबंधित करतात, बाक आणि बाक्सवरील प्रतिबंधात्मक प्रभाव काढून टाकतात किंवा नंतरच्याशी थेट संवाद साधतात आणि त्यांचे ऑलिगोमेरायझेशन आणि छिद्र तयार करण्यास प्रोत्साहन देतात. बाह्य झिल्लीच्या पारगम्यतेमुळे, सायटोक्रोम सी, तसेच एपोप्टोसिसचे इतर मध्यस्थ, जसे की एआयएफ, सायटोसोलमध्ये प्रवेश करतात. अपोप्टोसिस प्रेरक घटक ).

उदाहरणार्थ, जेव्हा सेलमध्ये टिकून राहण्याच्या सिग्नलचा अभाव असतो, तेव्हा BH3 प्रोटीन Bim ची अभिव्यक्ती MAP kinase JNK च्या मध्यस्थीद्वारे सक्रिय केली जाते, ज्यामुळे आंतरिक ऍपोप्टोसिस मार्ग सुरू होतो. डीएनएचे नुकसान झाल्यास, ट्यूमर सप्रेसर p53 जमा होतो, जो BH3 प्रथिने प्यूमा आणि नोक्सा एन्कोडिंग जनुकांच्या प्रतिलेखनास उत्तेजित करतो, जे अपोप्टोसिस देखील मध्यस्थ करते. आणखी एक BH3 प्रथिने, बिड, अपोप्टोसिसच्या बाह्य आणि अंतर्गत मार्गांदरम्यान एक कनेक्शन प्रदान करते. डेथ रिसेप्टर्सच्या सक्रियतेनंतर आणि परिणामस्वरुप, कॅस्पेस-8, नंतरचे बिड कापून टीबीड (ट्रंकेटेड बिड) बनवते, जे मायटोकॉन्ड्रियामध्ये जाते, जिथे ते Bcl-2 दाबते.