Техника взятия крови у животных для исследования. Взятие крови у крс из хвостовой вены

На сегодня решил сделать еще один пост. И будет он посвящен самому трудоемкому, и самому массовому процессу в нашей ветеринарной жизни - это взятие крови у коров для диагностических исследований, таких как например: лейкоз, бруцеллез, лептоспироз и т. д., и для биохимического исследования в осенне-весенний период.

Наши дедушки с бабушками ветеринарной службы брали кровь традиционно, да и сейчас до сих пор так учат в наших ветеринарных ВУЗах - из яремной вены. Но наука и технологии не стоят на месте. Прогрессивные умы человечества постоянно работают над совершенствованием новых способов работ, стороной не обошло и ветеринарное направление.

Всех нас учат в институтах ветеринарии, что кровь нужно брать из яремной вены, в многоразовую стеклянную пробирку, используя многоразовую металлическую иголку разного диаметра.

Взятие крови в стеклянную пробирку

Как видно на верхнем фото, чтобы взять кровь, нужно во-первых зафиксировать животное, наложить на шею резиновый жгут (он нужно чтобы лучше определялась яремная вена). Далее нужно с размаха попасть в вену, пробив кожу моментально. И только потом подставлять пробирку. В чем сама неудобность - затрата времени, средств, сил, рабочей силы.

Но как выше писал я уже, человечество не стоит на месте, и постоянно совершенствует свои подходы к работе, попутно облегчая их.

Не так давно, а именно, в 2000-х годах к нам приехали иностранцы, и рассказывали о том что мы тут древние, ничего не знаем, и будем вас учить. И действительно, показали как нужно брать кровь у коров по современным стандартам. А именно, в вакуумную пробирку одноразового использования (см. фото ниже )

взятие крови у коровы из хвостовой вены в вакуумную пробирку

Скажу сразу, сейчас до сих пор есть противники такого метода - метода взятия крови из хвостовой вены, они считают, что является классикой, то не умирает никогда, ну как по Ленину.

Хотя, как вы можете видеть на фото, маленькая вакуумная пробирка, нет лишней или даже дополнительной фиксации животного(!) что очень важно для проведения зооветеринарных мероприятий. На такую процедуру взятия крови уходит максимум полминуты-минута, в то время, как при старом методе взятия крови, иногда уходит и до десяти минут!
Следующий фактор который нужно отнести в плюс - человек не контактирует с кровью, а значит риск заболеть лейкозом или бруцеллезом он минимален, или вообще исключен
Следующий фактор - кровь под вакуумом сама идет в пробирку, и занимает это секунды.
Следующий фактор - животное спокойнее стоит, когда у нее кровь берут из хвостовой вены, нежели их яремной вены.
Следующий фактор - кровь не попадает во внешнюю среду и на объекты внешней среды (подстилка, кормушка, поилка и т.д.) - это я указал в аспекте, если животное может быть больным лейкозом, бруцеллезом и т. д.
Следующий фактор - стоимость одной пробирки вместе с иголкой одноразовой 8 рублей. Да и не так часто приходится брать кровь - один-два раза в год (массово при ветеринарных обработках), да и в текущем плане - при биохимическом исследовании крови у коров. Раньше нужно было: намыть стеклянных пробирок ну грубо говоря пробирок 600-1000, затем их прокипятить, затем уложить, потом после того как слили кровь их снова помыть и так все по кругу. Да и бьются они часто, и травмирование ветеринарного работника и самого животного тоже часто бывает.
Следующий фактор - Не надо переливать кровь, после того как она отстоится. Сразу поставили в специальный планшет и отправляем в лабораторию.
Следующий фактор - подписывать нужно саму пробирку, и это очень удобно, в то время, как раньше это было очень трудоемко (нужно было нарезать специальные резиночки, потом одеть их на стеклянные пробирки, затем когда кровь возьмут подписать, а если нет резиночки, то бумажку заворачивали в ватку и сверху вводили в стеклянную пробирку).

Ну вот, вроде все рассказал, и это будет не последний мой пост. Очень много интересного вас ждет впереди!

В последние годы ветеринары проявляют всё больший интерес к современной методике забора крови у сельскохозяйственных животных с использованием систем вакуумного забора крови. Однако, не всем специалистам удалось из первых рук получить достоверную информацию об особенностях и преимуществах новой методики и ознакомиться с ней на практике.

До сегодняшнего дня широко распространённым способом забора крови у животных (в частности КРС) остаётся взятие её из ярёмной вены либо из хвостовой вены, но также, как и из ярёмной, с использованием кровопускательных (или инъекционных) игл и стеклянных пробирок (не вакуумных). Но данная методика имеет ряд серьёзных недостатков:

  1. Кровь набирается через кровопускательную иглу самотёком в открытую пробирку. Это очень часто приводит к разбрызгиванию крови, в связи с чем высок риск инфицирования животных и человека. Некоторые используют шприцы, но это не избавляет от необходимости переливать кровь в открытую пробирку. Если нужна не сыворотка, которая выделится в стеклянной пробирке (но не в пластиковой), а цельная кровь, то нужно вручную отмерять необходимый для исследований объём крови и затем вручную добавлять нужное количество реагентов (где тоже возможны ошибки в дозировке). К тому же, переливание крови из шприца в пробирку зачастую приводит к гемолизу, что искажает результаты исследований или делает их невозможными. Также ошибочным является взятие крови шприцом с последующим переливанием крови в вакуумную пробирку.
  2. Набранная самотёком в открытую пробирку, кровь теряет свою стерильность из-за воздействия на неё внешней среды, следовательно, результаты лабораторных исследований могут быть искажены. Стеклянные пробирки закрываются либо нестерильными резиновыми пробками, либо ватными тампонами, что часто приводит к открытию пробирки с разлитием крови.
  3. Стеклянные пробирки часто разбиваются – соответственно, нужно не только ликвидировать последствия этого в виде осколков и разлитой крови, но и повторно брать пробу крови у животного.
  4. При заборе крови из ярёмной вены необходима фиксация животного, то есть привлечение к процедуре дополнительного персонала, с соответствующими затратами труда, нервов, времени и финансов.
  5. Жёсткая фиксация, а также боль при взятии крови толстостенными кровопускательными иглами большого диаметра вызывает стресс у животных. В случае с КРС это приводит к неизбежному снижению надоев молока от 0,3 до 1 л в день в течение нескольких дней. На 1000 голов убытки от падения надоев могут составлять до 20-25 тыс. руб (кстати, одна только эта сумма значительно превышает стоимость вакуумных систем забора крови, необходимых для забора крови у 1000 голов).
  6. Грубая фиксация приводит к массовому перезаражению лейкозом ранее здоровых животных, через травмирование слизистой носовой полости.

Системы вакуумного забора венозной крови имеют преимущества, более чем достаточные для того, чтобы навсегда забыть о прежней методике взятия крови.

Состоит вакуумная система из трёх компонентов:

  1. Двусторонняя игла - резьбовая, либо автоматическая (разной длины и диаметра).
  2. Иглодержатель - резьбовой, либо автоматический.
  3. Вакуумная пробирка.

Пробирка стерильна, герметична, изготовлена из небьющегося биологически инертного пластика (полиэтилентерефталат), не влияющего на результаты исследований.

  • для получения сыворотки используется активатор свёртывания (кремниевое напыление, активирующее образование сгустка крови и выделение сыворотки);
  • для получения цельной крови используется антикоагулянт К2 ЭДТА (Трилон Б).

В пробирку не надо вручную добавлять реагенты – после забора крови вакуумную пробирку (как с крышкой, так и без неё) можно центрифугировать и помещать в анализатор.

Пробирки могут быть с разным объёмом вакуума (следовательно, и объёмом забираемой крови) – от 2 до 10 мл. Самые востребованные объёмы – 9-10 мл (для КРС, свиней, лошадей). Для мелких животных можно использовать пробирки на 2, 3, 4 мл.

Преимущества вакуумных систем в сравнении с обычными иглами и пробирками:

  1. Двусторонние иглы с лазерной заточкой среза легко входят в вену, не вызывая сильных болезненных ощущений. Если кровопускательные или инъекционные иглы применяются диаметром 1,2 мм (18G), то двусторонние иглы вакуумных систем можно использовать диаметром 0,9 мм (20G) – так как эти иглы тонкостенные, то при меньшем внешнем диаметре иглы, её внутренний диаметр не уступает в пропускной способности иглам с толщиной 1,2 мм. Внешняя и внутренняя поверхности иглы обработаны силиконом, поэтому кровь свободно течёт в пробирку, не вызывая тромбирования иглы. Резиновый клапан на дистальном конце иглы предотвращает разбрызгивание крови в момент нахождения иглы в вене при отсутствии пробирки. Благодаря этому, можно набрать кровь в несколько пробирок, не вынимая иглы из вены - одна пробирка вынимается из иглодержателя, и вставляется другая пробирка для забора новой пробы крови (если необходимо взять кровь сразу на несколько видов исследований).
  2. Сохраняется герметичность системы во время взятия пробы, кровь остаётся стерильной и не разбрызгивается, что исключает возможность перекрёстного инфицирования.
  3. Вакуумная пробирка сделана из небьющегося материала. Не нужно собирать осколки стеклянных пробирок и убирать разлитую кровь (возможно инфицированную).
  4. Сокращается время свёртывания крови в пробирке. Благодаря активатору свёртывания (кремниевое напыление) сыворотка выделяется за 20-30 минут.
  5. Проба крови набирается в вакуумную пробирку, в ней же транспортируется в лабораторию, в ней же центрифугируется и в ней же исследуется в анализаторе. То есть, отпадает необходимость переливания крови из одной пробирки в другую.

Преимущества методики забора крови с использованием вакуумных систем:

  1. Кровь берётся из хвостовой вены КРС одним специалистом без фиксации животного. Это наиболее простой и эффективный способ, хотя можно брать кровь и из других вен.
  2. Отсутствие стресса у коровы исключает снижение надоев молока, что позволяет экономить значительные средства. Снижается или полностью отсутствует травмирование ветеринаров из-за ударов животных.
  3. На взятие крови у одной коровы, включая подготовку вакуумной системы, затрачивается около 30 секунд. Таким образом, ветеринарный врач может за один день самостоятельно, без помощников, взять пробы крови у стада КРС в 300-500 голов. Снижение времени пребывания ветработников в местах расположения животных позволяет последним спокойно принимать корм и отдыхать между дойками.

При взятии крови двусторонняя игла закрепляется в иглодержателе, вводится в вену, затем вакуумная пробирка вводится в иглодержатель таким образом, что дистальный конец иглы проходит сквозь мембрану крышки, и кровь, под воздействием вакуума, сама заполняет пробирку.

После наполнения кровью пробирка вынимается из иглодержателя, а иглодержатель с иглой извлекается из вены. Игла утилизируется. Пробирка аккуратно переворачивается 2-3 раза (для лучшего смешивания крови и реагента) и ставится в штатив, уже готовая к транспортировке в лабораторию, центрифугированию и исследованию в анализаторе.

ЗАО «Фирма «Домен» предлагает вакуумные системы Venosafe TERUMO (производство Бельгия) и Bodywin (производство Китай).

Между различными системами забора крови (в том числе, поставляемыми в Россию другими компаниями) принципиальных отличий нет. Однако, TERUMO (Бельгия) является единственным в мире производителем, который выпускает двусторонние иглы для вакуумных систем не только с резьбовым соединением с иглодержателем, но и с автоматическим (безрезьбовым). Эта отличительная особенность высоко оценена ветврачами, сталкивающимися с необходимостью забора крови сразу у нескольких десятков или сотен животных за один день силами одного или двух человек.

При использовании резьбовых игл необходимо учитывать дополнительные затраты времени и сил персонала для того, чтобы извлечь резьбовую иглу из иглодержателя, не нарушая технику безопасности, нужен специальный контейнер для утилизации игл, оснащённый разъёмом в крышке, куда вставляется игла и поворотом держателя выкручивается и падает в контейнер. Такие контейнеры достаточно дорогие и их мало кто применяет. Поэтому, специалисты вынуждены извлекать использованную резьбовую иглу из иглодержателя, надевая на неё защитный колпачок и вручную выкручивая и выкидывая в какую-нибудь тару. Если речь идёт о заборе крови у пары десятков голов, то особых проблем это не вызывает, если нарушение техники безопасности при таких манипуляциях для кого-то не является проблемой. Но при заборе крови у нескольких десятков или сотен голов (особенно немолодыми ветеринарами) возникает не только значительная потеря времени на вкручивание-выкручивание игл, но и перенапряжение рук (сухожилий). Кроме того, что самое неприятное и опасное, очень высока вероятность травмирования потенциально инфицированной использованной иглой при очередном надевании на неё колпачка для последующего выкручивания из иглодержателя. Поэтому, использование автоматических игл и иглодержателей на практике выгоднее и безопаснее, чем резьбовых, несмотря на то, что автоматические чуть дороже. Стоят автоматические иглы лишь на 50 копеек дороже резьбовых (производства TERUMO). Разница в цене автоматических и резьбовых иглодержателей на первый взгляд достаточно велика, но она становится совершенно несущественной при пересчёте стоимости держателя на одну процедуру забора крови - автоматические иглодержатели с механизмом сброса иглы можно использовать до 500 раз, подвергая соответствующей обработке после каждого использования. То есть, себестоимость иглодержателя в пересчёте на 1 забор крови = 3-5 копеек.

Использовать автоматические (безрезьбовые) иглы и иглодержатели очень легко. Игла просто защёлкивается в держатель, а после использования, нажатием 2-х кнопок, сбрасывается в любой контейнер для утилизации игл (даже неспециализированный). Тут же в иглодержатель можно защёлкивать новую иглу, и так же быстро сбросить после очередного использования. Иглодержатель, при правильном использовании, не контактирует с кровью, поэтому на практике он не может быть звеном передачи инфекции. Но, для соблюдения санитарных норм, каждый иглодержатель после использования должен быть подвергнут соответствующей обработке для дезинфекции.

Кроме наличия автоматических игл и иглодержателей, преимуществом ЗАО «Фирма «Домен», как поставщика вакуумных систем, является то, что в нашем ассортименте всегда имеются в наличии не только двусторонние иглы длиной полтора дюйма (1 1/2" = 38-40 мм), но и длиной 1 дюйм (1" = 25 мм). При заборе крови из ярёмной вены КРС и свиней используются иглы длиной 40 мм, а при заборе крови из хвостовой вены КРС можно применять иглы и на 40 мм, но гораздо удобнее на 25 мм.

У крупного рогатого скота, овец и коз, лошадей кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи в объёме не менее 5 мл. в пробирку с антикоагулянтом 0,5 М ЭДТА* (200 мкл. на одну пробирку).

Гепарин и другие антикоагулянты использовать нельзя!
Транспортировка крови осуществляется с специальных термо-сумках с хладагентом, главное не заморозить и не сварить кровь.

Иглы перед взятием крови от каждого животного обязательно стерилизуют кипячением.
Кровь от каждого животного берут индивидуальной иглой!
Место взятия крови тщательно дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода. Для взятия крови животное фиксируют – привязывают голову животного. Большим пальцем нажимают на вену в нижней трети шеи. Задержка оттока крови вызывает набухание вены в виде толстого шнура. Кровопускательную иглу вводят под острым углом по направлению к голове, продвигая в полость сосуда приблизительно на 1 см.

Кровь в пробирку набирают по стенке пробирки струёй. Пробирка закрывается пробкой и переворачивается несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом). Встряхивание не допустимо! Каждая пробирка должна быть пронумерована (или указан инвентарный номер животного) согласно заранее подготовленной описи.

Образцы с гемолизом или образовавшимся сгустком исследованию не подлежат!

Пробирки с кровью хранить при температуре +4ºС – +8 ºС. Условия обычного холодильника, но не морозильной камеры.

У крупного рогатого скота более эффективным и безопасным является способ забора крови из хвостовой вены. Для взятия крови животное не фиксируют. Хвост животного берут рукой в области средней трети и медленно поднимают вверх. Кровь берут в средней трети тела 2-5 хвостовых позвонков, находящейся на линии, идущей вдоль хвоста и делящей его на 2 симметричные части. Место взятия крови также дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода. Иглу вводят под углом 90 до упора на глубину 5-10 мм.

  • Для упрощения процедуры забора крови возможно использование одноразовых стеклянных или пластиковых вакуумных пробирок любого доступного производителя уже содержащих жидкий или сухой ЭДТА (нанесённым на внутреннюю стенку пробирки). После взятия крови пробирку необходимо плавно перевернуть несколько раз. Пробирки с кровью хранить при температуре +4ºС – +8 ºС. Важно, кровь в таких условиях можно хранить две недели.*Приготовление 0,5М ЭДТА (рН 8,0). В мерной колбе на 100 мл растворяют 18,62 г этилендиаминтетрауксусной кислоты (молекулярный вес 372,2) в 80 мл дистиллированной воды. Раствором 30%-й натрия гидроокиси доводят рН раствора до 8,0. Затем дистиллированной водой – объём раствора доводят до метки и перемешивают. Хранят в колбе с притертой пробкой при комнатной температуре до 1 года.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Ознакомиться с методами взятия крови у сельскохо­зяйственных животных, изучить соотношение и взаимосвязь составных частей крови, получить плазму, сыворотку, дефибринированную кровь и фибрин, определить время свертывания крови при различных температурных условиях.

Работа 1 . Получение крови у животных.

Для взятия крови у животных производят обработку операционного поля (выстригание и выбривание волосяного покрова, протирание кожи спиртом и эфиром), а затем надрезают (прокалывают) кровеносный со­суд или вводят в него иглу определенной формы и диаметра, предва­рительно подвергнутые стерилизации. Принудительной фиксация жи­вотных при взятии крови следует избегать. Для получения крови у мелких животных и птиц иногда прибегают к пункции желудочка сердца.

Лошади крупный и мелкий рогатый скот.

Небольшие количества крови для морфологического анализа у лошадей и крупного рогатого скота получают из ушной вены путем её надреза или прокола инъекционной иглой. Для получения большого количества крови, а также для внутренних вливаний производят пункцию яремной вены на границе верхней и сред­ней трети шеи (рис. 48).

После фиксации животного большим пальцем левой руки сдавливают вену ниже места пункции (у крупного и мелкого рогатого скота накладывают резиновый жгут), затем прокалывают кровопуска­тельной иглой кожу и стенку ванн. Иглу вводят против тока крови под углом 45°. Кровь собирают в стерильный сосуд.

Свиньи.

У свиней малые количества крови получают путем надреза скальпелем большой ушной вены. Центральный, конец сосуда у корня уха зажимают при этом пальцами. Для получения большого количества крови отсекают ножницами или скальпелем отрезок хвоста длиной 1…1.5 см.

А - с левой стороны, Б - с правой стороны.

Рис. 48. Взятие крови у ло­шади из яремной вены.

По окончании кровопускания рану дезинфицируют, а кончик хвоста сдавливают резиновым коль­цом или перетягивают бинтом на 1…2 суток.

Собаки.

Небольшие количества крови у собак (кошек) получают путем надре­за уха или прокола мягкой части ступни. Для получения больших пор­ций крови производят пункцию переднепружной плюсневой вены, рас­положенной на наружной поверхности голени (рис. 49). Животное кладут на бок или фиксируют в станке, конечности сдавливают руками или жгутом ниже коленного сустава. Иглой прокалывают сначала кожу, а затем - стенку вены, насасывают кровь в шприц.

Кролики.

Малое количество крови у кроликов получают путем надреза или про­кола вены, расположенной снаружи по тонкому краю уха. Местом кровопускания может служить и грудная вена, расположенная на грудной клетке сбоку. В некоторых случаях прибегают к пункции сердца.

Рис. 49. Пункция переднепружной плюсневой вены у собак.

Птицы.

Небольшие порции крови у кур и индеек получают путем надреза или скарификации гребня (сережек). У гусей и уток делают прокол мяко­ти ступни. В большом количестве кровь у птиц получают из подкожной под-крыльцевой вены, расположенной на внутренней поверхности крыла. Перья выщипывают, вену сдавливают пальцем в области локтевого сус­тава, прокол делают под углом на уровне локтевого сгиба.

Заполнить таблицу 14 получения большого и малого количества крови у разных видов животных.

Очень популярным в последнее время стало такое направление животноводческого хозяйства, как разведение крупного рогатого скота. Это можно объяснить тем, что коровы дают человеку необходимую продукцию (мясо, молоко, сметану, кожу и др) .

В основе разведения любых животных лежит получение здоровых и полноценных особей, но этого мало. За животными надо ухаживать и следить за показателями их здоровья. С этой целью необходимо систематически проводить ветеринарный осмотр животного. Во время этого осмотра врач может выявить какую либо патологию или возможность ее дальнейшего развития.

Для более точного определения состояния животного необходимо взять у него кровь и сделать ее анализ по разным показателям. Кровь КРС может рассказать о различных нарушениях, происходящих в организме животного, или же, наоборот, о нормальной жизнедеятельности организма.

В последнее время наблюдается процесс интенсификации в области медицины и ветеринарии. В связи с этим появились вакуумные системы для забора крови, которые позволяют избежать контакта человека с кровью животного. Это обеспечивает безопасность.

Взятие крови у КРС - это процесс, к которому необходимо подходить очень ответственно. Забор крови у КРС можно осуществлять тремя способами. Во-первых, кровь берут из ярёмной вены. Этот процесс осуществляют специальным прибором, который состоит из трубчатого корпуса, один конец которого заглушен, а во второй - вставлен коннектор с иглодержателем, параллельным оси симметрии корпуса. В коннекторе имеется канал, соединяющий иглодержатель с полостью корпуса.

Этот канал находится под углом 25 градусов к оси симметрии корпуса, полость которого соединена с атмосферой при помощи дренажного канала. Этот способ имеет ряд недостатков: кровь при помощи такого прибора можно брать только в определенном положении (может быть неудобно из-за морфологических особенностей животного, брать должен специально обученный человек, чтобы качество крови, взятой на анализ, было хорошим) .

Во-вторых, кровь можно брать из молочной вены. У этого способа тоже есть недостаток: кровь можно брать только у взрослых коров, т. к. молочная вена формируется не сразу. Кроме того, одному человеку взять кровь невозможно, кто-то еще должен помогать фиксировать животное в определенном положении. В-третьих, кровь можно брать из хвостовой вены. При заборе крови корова должна быть привязана, в фиксации необходимость отсутствует. Забор крови осуществляется при помощи специальной вакуумной системы или одноразового шприца.

Надо своевременно реагировать на отклонения показателей анализа крови от нормы, т. к. они очень опасны для животного. Например, недостаток лейкоцитов говорит о снижении иммунитета животного, которое в такой период более восприимчиво к разным инфекциям.

При проведении анализа учитывается морфология и биохимия крови КРС. Морфологический и биохимический анализ крови КРС включает в себя определение количества эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, холестерина, глюкозы, фосфора, железа и др. микроэлементов, а также витаминов, белков, альбуминов, альфа-, бета- и гамма-глобулинов.

Отклонения этих показателей от нормы говорит о различных нарушениях в организме животного. Определение точного количества этих показателей очень важно, поэтому необходимо осуществлять качественный забор крови у КРС. Это позволяет существенно повысить точность результатов анализов.

Для контроля за состоянием организма животного необходим анализ крови, в котором будут отражены морфологические и биохимические показатели крови КРС. Отклонения этих показателей от нормы говорят о нарушениях в организме животного и позволяют поставить диагноз.