Získanie a vyhodnotenie synoviálnej tekutiny. Všeobecné klinické vyšetrenie synoviálnej tekutiny Analýza synoviálnej tekutiny, ako sa odoberá

Prečo vykonávať analýzu synoviálnej tekutiny?

V situáciách primárnej starostlivosti môže analýza synoviálnej tekutiny (SF) pomôcť určiť špecialistu, ku ktorému by mal byť pacient odoslaný.

  • Ak je GS nezápalové, navštívte ortopéda.
  • Ak je zápal, navštívte reumatológa.

Diagnostická hodnota analýzy synoviálnej tekutiny

  • Zápalová alebo nezápalová patológia
  • Kryštalický zápal alebo sepsa alebo exacerbácia
  • Pomáha identifikovať skupiny chorôb na základe počtu buniek a typu buniek
  • Určenie typu zlyhania protetiky
  • Prognostická hodnota
  • Ortopedický zásah
  • Štádium špecifického ochorenia
  • Monitorovanie terapie. Najmä odmietnutie terapie monoklonálnymi protilátkami.

Na obr. 1 a 2 odrážajú algoritmus diagnostiky kĺbových ochorení na základe údajov z analýzy synoviálnej tekutiny

Patologické zmeny v tkanivách obklopujúcich chorý kĺb sa odrážajú v objeme, zložení buniek a prítomnosti pevných častíc v tekutine. Zápalové ochorenia kĺbov, líšiace sa etiológiou, majú charakteristické bunkové vzory, ktoré je možné rozpoznať a využiť pri diagnostike konkrétneho ochorenia alebo skupiny ochorení (obr. 1, 2). Na identifikáciu týchto rozdielov je potrebné správne vybrať a správne skladovať SF, aby sa minimalizovali autolytické zmeny a degradácia charakteristických buniek. EDTA sa používa ako antikoagulant. Skladovanie pri 4 °C je dobre tolerované SF a poskytuje vynikajúce diagnostické výsledky. Takmer adekvátne výsledky možno získať až 48 hodín od odsatia, ale dlhšie skladovanie, dokonca aj pri 4 °C, zvyčajne umožňuje identifikovať iba kryštály a častice. Väčšina buniek podlieha lýze.

Cytologická analýza synoviálnej tekutiny

Tukové bunky možno nájsť pri analýze SF u väčšiny pacientov s kĺbovým ochorením, ale najčastejšie sa pozorujú pri zápalovej artritíde u pacientov so séronegatívnymi spondyloartropatiami a pri nezápalových kĺbových léziách spojených s traumou.

Tento typ CL sa často zisťuje pri analýze SF pacientov s intraartikulárnym krvácaním alebo artrografiou, ako aj pri alergických reakciách na injekčne podané lieky, ako je umelá SF.

Cytologické vyšetrenie synoviálnej tekutiny (SF) je jednoduchá analýza, ktorá vám umožňuje zistiť zápalovú alebo nezápalovú povahu patológie pre akékoľvek ochorenie kĺbov s výpotkom. V prípade zápalu analýza umožňuje diagnostikovať skupinu metabolických artropatií, reprezentovanú najmä dnou a chondrokalcinózou, kedy intraartikulárne mikrokryštály (MC) spôsobujú zápal. Pri týchto ochoreniach umožňuje testovanie SF urobiť rýchlu, presnú a spoľahlivú diagnózu.

Cytologické štúdie synoviálnej tekutiny sú lacné, minimálne invazívne, rýchle a technicky dostupné. V tomto prípade sú obzvlášť zaujímavé dva diagnostické znaky:

  • Prítomnosť veľkého počtu buniek je skutočným odrazom zápalového ochorenia kĺbov;
  • Prítomnosť alebo neprítomnosť mikrokryštalickej artropatie umožňuje potvrdiť alebo vylúčiť mikrokryštalickú artropatiu v priebehu niekoľkých minút a určiť jej povahu. Synoviálna tekutina je zvyčajne prítomná vo veľmi malých množstvách v každej kĺbovej dutine. Jeho úloha je dvojaká: pôsobí ako lubrikant, znižuje trenie medzi povrchmi kĺbov pri pohybe a zabezpečuje výživu chrupavkového tkaniva, ktoré nie je zásobované krvou.
Cytologické vyšetrenie synoviálnej tekutiny poskytuje užitočné informácie o patológii zodpovednej za kĺbový výpotok.
  • Vlastnosti mikrokryštálov v SF - cenné informácie pri metabolickej artropatii
  • 500, ale<1500, то считают процентное содержание отдельных типов лейкоцитов, обращая особое внимание на их необычные формы.">Celularita a vzorec bunkovej populácie umožňuje rozlíšiť päť typov SG (tabuľka 1). Tento znak má len relatívny význam, ale pre lekára je cenný.

Tabuľka 1 – Rôzne typy GS podľa cytológie

  • Normálna SF je priehľadná, bezfarebná alebo žltkastá. So zvyšujúcou sa celularitou sa stáva viac nepriehľadným.
  • Viskozita tekutiny súvisí s obsahom kyseliny hyalurónovej. Je vysoká pri normálnej alebo nezápalovej SF. Viskozita sa dá ľahko určiť natiahnutím kvapky chladiacej kvapaliny medzi dva prsty chránené rukavicou alebo čiapočkami prstov a zmeraním dĺžky takto získanej nite. Pri všetkých zápaloch klesá viskozita tekutiny.
  • Pre patologickú synoviálnu tekutinu je charakteristická tvorba zrazeniny. Normálna SF skutočne neobsahuje fibrinogén a nekoaguluje. Akákoľvek patologická SF, najmä ak je zápalová, však obsahuje fibrín a tvorí voľný trombus, ktorý obopína bunkové elementy sieťkou. Preto je veľmi dôležité zabrániť zrážaniu tekutiny užívaním antikoagulancií.

Technika cytologického vyšetrenia synoviálnej tekutiny

1. Užívanie SG

Na analýzu stačí akýkoľvek objem, pretože test vyžaduje len zanedbateľné množstvo vzorky. V čerstvom stave stačí na rozbor kvapka. SF sa odoberá do sterilnej plastovej skúmavky. Cytologické vyšetrenie synoviálnej tekutiny vyžaduje použitie antikoagulancia. Najlepšou voľbou je heparinát sodný; Oxalát vápenatý a heparín lítny by sa mali vylúčiť, pretože obsahujú MK, ktoré môžu byť fagocytované polymorfonukleárnymi bunkami. Z rovnakého dôvodu sa treba vyhnúť časticiam, ako je mastenec alebo škrob z rukavíc.

2. Cytologické vyšetrenie čerstvej synoviálnej tekutiny

Tento krok SG cytológie by sa mal vykonať čo najskôr po odbere, bez oneskorenia kvapky (0,05 ml) vzorky pod krycím sklíčkom. Centrifugácia nie je potrebná, pretože nízkobunkové GC sú zriedkavo patologické. Identifikácia MV je ťažká a vyžaduje si polarizačný mikroskop, prípadne s kompenzátorom a otočným stolom, čo umožňuje ľahšie videnie MV, najmä ak ich je málo. V neprítomnosti polarizačného mikroskopu je možné analýzu vykonať s veľmi zatvorenou apertúrou mikroskopu, keď sú identifikované prvky, ktoré majú index lomu odlišný od indexu lomu bunkových komponentov. Táto štúdia môže byť doplnená určením počtu buniek v Goryaevovej komore, čo je dôležité pre určenie povahy poškodenia kĺbov (tabuľka 2).

Hlavné patologické stavy a typy GS

Nezápalové

Zápalové

Krvácania

Reumatoidná polyartritída

Bakteriálne infekcie

Trauma-zlomeniny

Mikrokryštalická artritída

Tuberkulóza

Hemoragický syndróm

Osteonekróza

Reiterov syndróm

Hemofília

Osteochondritis dissecans

Psoriatický reumatizmus

Villezonodulárna synovitída

Osteochondromatóza

Reumatizmus pri zápalových ochoreniach čriev

hemangióm

Ak nie je možné okamžité cytologické vyšetrenie vzorky synoviálnej tekutiny, možno ho odložiť až o 24 hodín za predpokladu, že sa tekutina skladuje pri teplote 4 °C alebo ešte lepšie v mrazničke pri teplote -20 °C. Je tiež možné pripraviť náter a vysušiť na vzduchu. K možno skúmať buď priamo, v polarizovanom svetle alebo po farbení May-Grunwald-Giams (MGG).

3. Farbenie podľa MGZ

Výsledky počítania počtu buniek v čerstvom SF sú doplnené o počítanie jednotlivých typov buniek po cytocentrifugácii, príprave náteru a farbení na MG, čo nám umožňuje objasniť povahu buniek prítomných v SF.

výsledky

Cytologické vyšetrenie synoviálnej tekutiny je test užitočný pre lekárov, pretože umožňuje zamerať vyšetrenie na konkrétnu patológiu spomedzi mnohých, ktorými môže pacient trpieť. Pri metabolických alebo mikrokryštalických kĺbových léziách je takýto rozbor pri vyšetrení kľúčový (tabuľka č. 3).

Tabuľka 3 - Cytologické parametre tekutiny pri mikrokryštalickej artritíde

Infekčná artritída

Cytologické vyšetrenie synoviálnej tekutiny odhaľuje veľmi veľký počet buniek s prevahou polynukleárnych buniek, často modifikovaných. Ak je infekcia potlačená antibiotikami, potom je počet PMN menej početný a dôkaz infekcie by mal byť založený na bakteriologickom rozbore SF alebo na histologickom vyšetrení biopsie synovie. Ak je SG bohatý eozinofily, treba hľadať mikrofilárie.

Zápalové reumatické ochorenia

Aj tu je dôležitá celularita a najpočetnejšie sú polymorfonukleárne leukocyty (PMN). Táto skupina kĺbových patológií nemá špecifický cytologický profil odrážajúci špecifický reumatizmus. SG sú však štatisticky viac zápalové pri reumatoidnej a reaktívnej artritíde (spondyloartritída Fissinger-Leroy-Reuter) ako pri polyartritíde SLE, reumatickej pelviospondylitíde alebo psoriatickej artritíde.

Metabolická alebo mikrokryštalická artritída

Práve pre túto skupinu ochorení je rozumné a zaujímavé cytologické vyšetrenie synoviálnej tekutiny. Je potrebné poznamenať, že detekcia MK infekciu neodstráni a vo všetkých prípadoch zostáva vhodné bakteriologické vyšetrenie.

Dna

Dna je vždy spojená s prítomnosťou nespočetného množstva mikroorganizmov v kĺbovej dutine urát sodný, veľmi charakteristická forma a fyzikálne vlastnosti. Sú to predĺžené MK, ihlovité, dlhé 5-20 mikrónov, s kužeľovitým koncom, ktorý prepichuje bunkové membrány. Tekutina je typicky vysoko zápalová a bohatá na neutrofily (obrázok 1).

V asymptomatických výpotkoch medzi dnavými vzplanutiami možno pozorovať veľmi malé kryštály (1-2 mikróny). Teraz sú často extracelulárne. Urát sodný kyselina močová je rozpustná vo vode, neskladuje sa a nie je detekovaná v náteroch zafarbených pomocou MGM.

Chondrokalcinóza kĺbov

Táto patológia je spôsobená prítomnosťou depozitov dihydrátu pyrofosforečnanu vápenatého v chrupavke a/alebo synovii, ktoré v akútnom období spôsobujú symptómy buď pseudodny alebo zápalovej reumatoidnej alebo osteoartritídy. Kľúč k diagnóze – identifikácia charakteristických MK v SF. MK má dĺžku 5-10 mikrónov, vnútri leukocytov, vo forme rovného alebo šikmého rovnobežnostena. Ich dvojlom je menší ako u kyseliny močovej. Tieto MK sú mierne rozpustné vo vode a po farbení pomocou MGR sú konzervované. Niekedy analýza čerstvej tekutiny alebo po farbení prsnej tekutiny ukazuje súčasne koncentrácie urátov a pyrofosfátov. Tieto zmiešané kĺbové lézie nie sú výlučné.

Choroby kĺbov a fosforečnany vápenaté

U niektorých pacientov, ktorí často trpia kalcifikáciou rotátorovej manžety, sa môže vyvinúť deštruktívna artropatia a príznaky zápalu rotátorovej manžety. Príznaky zápalu tráviaceho traktu sú spojené s prítomnosťou kyseliny močovej, patriace k rôznym formám fosforečnanu vápenatého. Najbežnejší je hydroxyapatit, ale možno nájsť aj oktakalciumfosfát a trikalciumfosfát. Dĺžka týchto kryštálov je 0,l - 0,2 µm, v optickom mikroskope sú neviditeľné.

Iné mikrokryštály

Pri vyšetrovaní čerstvého SF sa niekedy identifikujú iné typy MK, medzi ktoré patria:

  • Oxalát vápenatý, ktorý možno pozorovať u pacientov na hemodialýze. Tvoria sa

MK je niekedy pyramídový, niekedy nepravidelný tvar alebo tyčinky, ktoré možno zameniť za pyrofosforečnan vápenatý;

  • Cholesterolové MK sú veľké, obdĺžnikové, ploché, často so skoseným rohom. Pozorujú sa pri reumatoidnej artritíde alebo bursitíde súvisiacej s vekom;
  • Kryštalizujú sa tam deriváty kortizónu, ktoré sa injekčne podávajú do kĺbu na terapeutické účely a MK môže pretrvávať aj niekoľko týždňov či mesiacov. Môžu spôsobiť skutočné

mikrokryštalická artritída. Ich tvar je premenlivý a všetky sú dvojlomné;

  • Charcot-Leiden MC sú zriedkavé a možno ich pozorovať v tekutine bohatej na eozinofily. Ich tvar je podobný strelke kompasu, slabo dvojlomný.

Záver

Cytologické vyšetrenie kĺbovej tekutiny je hodnotný diagnostický test, minimálne invazívny, rýchly, cenovo dostupný, pri ktorom:

Množstvo buniek je skutočným odrazom zápalovej povahy ochorenia kĺbov,

Prítomnosť alebo neprítomnosť MK nám umožňuje v priebehu niekoľkých minút potvrdiť alebo vylúčiť mikrokryštalickú artropatiu a často určiť povahu metabolickej artropatie.

Pripravila: Tokshekenova B.S.

Obsiahnuté v kĺbovej dutine
synoviálna tekutina je
biologické prostredie, jedinečné v
biofyzikálne, fyzikálno-chemické
vlastnosti a zloženie. Základy
základný výskum SJ
boli založené v polovici 19. storočia.
Nemecký prieskumník Frerichs
(1846), ktorý študoval chemické a
bunkové zloženie zvieracej synovie.
Tieto štúdie boli vyvinuté a
pokračovanie v jeho dielach (1865),
Steinberg (1874), O.E. Hagen-Torna
(1883) atď.

Vďaka aplikácii
mikroskopické, histochemické,
ultraštrukturálne metódy výskumu
podarilo študovať vzory
štrukturálne a metabolické procesy v
prvky synoviálnych kĺbov. Nakoniec
60. - začiatok 70. rokov 20. storočia
pochopenie synoviálneho systému,
založené na spoločnom vývoji a
koordinácia synoviálnych funkcií
membrána, synovium a kĺbová chrupavka.
SF je krvný transudát a
jeho zloženie má významné
podobná plazme, ale odlišná od nej
nižší obsah bielkovín a
prítomnosť špecifického
proteoglykán - kyselina hyalurónová
(GUK). Rozdiely v zložení bielkovín
plazma a synovia sú vysvetlené bariérou
vlastnosti synoviálnej membrány,
nepriepustné pre proteínové molekuly s
relatívnej molekulovej hmotnosti viac
160000
.

SG sa tvorí z troch
zdroje: obsahujúce vodu
krvný transudát, elektrolyty,
proteíny; produkty sekrécie
synoviálne bunky integumentu
vrstva plášťa - GUK a
proteolytické enzýmy;
opotrebenie a náhradné výrobky
bunky a základná látka
synoviálna membrána - in
hlavne proteoglykány a
glykoproteíny, neustále
vstup do kĺbovej dutiny v
proces jeho normálneho stavu
životná aktivita.

Normálne je SF reprezentovaný synoviálnymi krycími bunkami

synoviocyty (34,2 – 37,8 %),
histiocyty (8,9 – 12,5 %),
lymfocyty (37,4 – 42,6 %),
monocyty (1,8-3,2 %),
neutrofily (1,2-2,0)
neklasifikovaných buniek (8,3-10,1 %).

Vzhľadom na špecifické fyzikálno-chemické vlastnosti a zloženie tekutiny plní v kĺboch ​​množstvo funkcií:

metabolické (výmena),
bariéra (ochranná),
behúň (biomechanický).

Synoviálny
dutinová tekutina
spoj je prevzatý z
diagnostické a
terapeutický účel tým
prepichne
aseptické podmienky
bez predchádzajúceho
lokálna anestézia, tzv
ako novokaín
ničí chromatín
bunkové jadrá.

Synoviálna tekutina sa distribuuje do 3 skúmaviek:

v skúmavke s antikoagulantom na
cytologické vyšetrenie;
do suchej skúmavky na chemické mikroskopické vyšetrenie
výskum a príprava rod
príprava na mikroskopiu v polar
svetlo;
do sterilnej skúmavky na bakteriologické
výskumu.

10.

Mala by sa vykonať analýza synoviálnej tekutiny
čo najskôr od jeho prijatia.
Nesprávne výsledky môžu byť získané, keď
oneskorenie štúdie o viac ako 6 hodín
v dôsledku nasledujúcich zmien:
zníženie počtu leukocytov;
zníženie počtu kryštálov
(dihydrát pyrofosforečnanu vápenatého);
prítomnosť artefaktov vo forme novotvarov
kryštály.

11. Laboratórna prax

Štandardný laboratórny test
synoviálna tekutina zahŕňa nasledujúce fázy:
posúdenie fyzikálnych vlastností (objem, farba, charakter,
viskozita, zákal, pH, mucínová zrazenina);
cytologické vyšetrenie (počítanie počtu
buniek, mikroskopia natívnych a zafarbených
droga);
polarizačná mikroskopia natív
droga;
chemická analýza;
dodatočné štúdie (ak sú uvedené).

12. FYZIKÁLNE VLASTNOSTI

Objem synoviálnej tekutiny sa hodnotí pomocou odmernej skúmavky, farby a
charakter - vizuálne v prechádzajúcom svetle v porovnaní s destilovanou vodou.
Viskozita sa zisťuje hemoviskometrom alebo dĺžkou nite tiahnucej sa za sklom
tyčinka po ponorení do skúmavky a vyjadrená v konvenčných jednotkách:
1 - vysoká viskozita;
2 - mierna viskozita;
3 - extrémne nízka viskozita (blízka vode).
Na hodnotenie zákalu sa používa skóre:
1 bod - úplná transparentnosť;
2 body - mierny zákal;
3 body - zákal.
Keď sa synoviálna tekutina zmieša s kyselinou octovou, vytvorí sa mucínová zrazenina.
kyselina.
V závislosti od zloženia synoviálnej tekutiny môže byť zrazenina hustá alebo voľná.
Na stanovenie pH sa používajú diagnostické prúžky, zvyčajne používané na
testy moču. Tento indikátor sa musí určiť ihneď po prijatí
synoviálnej tekutiny (pH sa mení počas skladovania).

13. CYTOLOGICKÁ ŠTÚDIA

Počítanie buniek v
synoviálnej tekutiny, ktorá sa vykonáva podľa všeobecne uznávaných pravidiel
(manuálne alebo automatické). Normálne nie je cytóza viac ako
100 buniek v 1 ul. Skladovanie synoviálnej tekutiny pre niekoľko
hodín pri izbovej teplote vedie k deštrukcii leukocytov.
Aj domáci, aj
farebný prípravok. Technika prípravy je štandardná, odporúča sa
použitie cytocentrifúgy. Štúdium natívnej drogy umožňuje
predbežne posúdiť obsah bunkových prvkov, identifikovať ragocyty
a nebunkové častice. Cytogram sa vypočíta vo farbenom prípravku.
(synoviocytogram) na 100-200 buniek, najlepšie v 2-3 prípravkoch.
Na rozdiel od všeobecne známeho názoru, že bunky tkanivového pôvodu v
synoviálna tekutina prevažuje nad formovanými zložkami krvi,
často je bunkové zloženie výpotku reprezentované prevažne neutrofilmi
a lymfocyty.

14. Punkcia synoviálnej tekutiny

15. Klinická a diagnostická hodnota

V patológii sa farba synoviálnej tekutiny mení v závislosti od
povaha kĺbového výpotku (serózny, hemoragický, fibrinózny,
zmiešané). So sekundárnou synovitídou synoviálnej tekutiny
získava jantárovú farbu a pri reumatoidnej a psoriatickej
artritída, farba sa mení od žltej po zelenú.
Žltozelená farba synoviálnej tekutiny môže byť
infekčné a dnavé lézie kĺbov. Pre septik
alebo traumatické poškodenie kĺbovej synoviálnej tekutiny
získava krvavú farbu rôzneho stupňa závažnosti. O
pigmentovaná vilózna nodulárna synovitída, kĺbový výpotok má
hnedo-červenej farby. Krémový charakter synovie
tekutiny môžu byť dodávané tukmi pri intraartikulárnych zlomeninách.
Zlatý odtieň synoviálnej tekutiny je spôsobený prítomnosťou
cholesterolu.

16. Zákal

charakteristické pre reumatoidné, psoriatické
alebo septická artritída. Synoviálna viskozita
pri reumatizme ubúda tekutiny,
reumatoidná, dnavá a psoriatická
artritída, Reiterova choroba, artróza,
ankylozujúca spondylitída, v menšom rozsahu
stupňa - pri posttraumatickej artritíde.
Voľná ​​mucínová zrazenina vždy naznačuje
prítomnosť zápalového procesu v kĺbe
(reumatoidná artritída a iné ochorenia),
existujú však aj pokročilejšie
ukazovatele.

17. Zmena pH

synoviálna tekutina nemá žiadnu základnú diagnostiku
hodnoty, jeho hodnota zápalom klesá. Pomocou mikroskopie
nebunkové častice možno detegovať v natívnom lieku -
exogénne (rastlinné tŕne, fragmenty umelých kryštálov,
zložky endoprotéz, suspenzie liečiv) a
endogénne (úlomky chrupavky, menisky, väzy, kryštály)
Komponenty. Vzhľad endoprotetických zložiek v synovii
tekutina je prognostickým znakom vývoja jeho nestability.
Medzi endogénnymi zložkami synoviálnej tekutiny je najdôležitejšia
prvok, ktorý má základný klinický a diagnostický
význam - kryštály urátu sodného a pyrofosforečnanu vápenatého. IN
amyloidné telieska, v synoviálnej tekutine môžu byť zistené kvapky
neutrálny tuk, kryštály cholesterolu, vápnik, hematidín.

18. Cytóza

Jedno z najcitlivejších diagnostických kritérií,
umožňujúce odlíšiť zápalové a nezápalové
choroby a posúdiť dynamiku patologického procesu.
Typické je zvýšenie počtu leukocytov v synoviálnej tekutine
na akútne obdobie akejkoľvek zápalovej artritídy (napríklad s
Pri záchvate dny počet leukocytov dosahuje 60x106 buniek na 1
ul). Stredná cytóza bola zaznamenaná pri pseudodne, Reiterovom syndróme,
psoriatickej artritíde. Na infekčnú (bakteriálnu) artritídu
cytóza býva vyššia (50x103 buniek v 1 μl), v takýchto vzorkách sa zisťuje
rast mikroflóry. Malá cytóza (menej ako 1-2x103 buniek v 1 µl,
prevažne neutrofily) je charakteristický pre „mechanické“
poškodenie kĺbov vrátane mikrokryštalickej artritídy.

19.

Pri reumatoidnej artritíde obsah granulocytov
dosahuje 90% a počet lymfocytov klesá menej
10 %. Tieto zmeny sú výraznejšie u séropozitívnych
variant reumatoidnej artritídy. Pri toxikoalergickej synovitíde, synoviálnej forme
tuberkulóza alebo artritída paraneoplastickej povahy
v synoviálnej tekutine prevládajú mononukleárne bunky.
Charakteristická je prítomnosť ragocytov vo významnom počte
na reumatoidnú artritídu. Jednotlivé ragocyty môžu
vyskytujú aj pri iných kĺbových léziách
(septická artritída a zápalová artropatia). LE bunky sa nachádzajú v synoviálnej tekutine, keď
systémový lupus erythematosus u približne 50 % pacientov.
Atypické bunky v synoviálnej tekutine
sú zaznamenané pomerne zriedkavo.

20. Bakterioskopia

má len pomocnú a často veľmi obmedzenú hodnotu,
keďže ak existuje podozrenie na mikrobiálnu povahu zápalu
je potrebné štandardné bakteriologické vyšetrenie. Avšak
mikroskopia náteru synoviálnej tekutiny môže ukázať
Gonokoky sa našli pri gonokokovej artritíde. Prítomnosť v náteroch
grampozitívne koky, spojené v zhlukoch, umožňuje
naznačujú stafylokokovú etiológiu infekcie. Iní
Pôvodcom infekčnej artritídy môžu byť streptokoky,
gramnegatívne tyčinky. Pri plesňovej artritíde (kandidóza,
aspergilóza), v synoviálnej tekutine sa deteguje mycélium húb.
Hladina bielkovín v synoviálnej tekutine sa mierne zvyšuje s
degeneratívne ochorenia a posttraumatická artritída. Viac
pozoruje sa výrazné zvýšenie celkového obsahu bielkovín
zápalové ochorenia (napríklad reumatoidná artritída).
- do 70 g/l) a jeho kvalitatívne zloženie sa často mení

21. Hladina glukózy.

Ide o špecifickejší, ale menej citlivý ukazovateľ
zápalové zmeny v kĺbe, ako je hladina glukózy
v synoviálnej tekutine výrazne klesá s
zápalová artropatia. Preto v poslednom čase
rokov na expresnú diagnostiku hnisavých (septických)
artritída určuje hladinu laktátu v synovii
kvapaliny. Zmeny v zložení synoviálnej tekutiny
umožňujú nám zistiť zápalovú povahu ochorenia,
čo vedie k tvorbe kĺbového výpotku. Neutrofilné
leukocytóza, zvýšená koncentrácia bielkovín a laktátu, ako aj
znížená hladina glukózy - dôležité znaky
zápalový proces v kĺbe. Imunologické
metódy umožňujú odlíšiť aj zápalové a
nezápalové ochorenia kĺbov. Autoprotilátky
sa objavujú v synoviálnej tekutine skôr ako v plazme
krvi.

22.

Obsah bielkovín v synoviálnej tekutine
zreteľne menej ako v krvi a dosahuje (1020 g/l). Na artrózu a poúrazové
artritídy nedochádza k významnému zvýšeniu bielkovín
je objavený. Na zápalovú artropatiu
hladina bielkovín v synoviálnej tekutine
zvyšuje o viac ako 20 g/l. Spolu s týmto môžete
zaznamenať zvýšenie hladín laktátdehydrogenázy,
indikátory akútnej fázy pri zápalových
ochorenia kĺbov (zvyčajne C-reaktívne
veverička).

Yu.M. Chernyakova, E.A. Sementovská. Gomel State Medical University, Inštitút mechaniky kov-polymérových systémov pomenovaný po. V.A. Bely NAS RB, Gomel, Medical news

Možnosti pohybu a podpory, ktoré určujú fyzickú aktivitu človeka, sú do značnej miery určené prítomnosťou štruktúr, ako sú kĺby. Existujú dva typy kĺbov: synoviálne a chrupavkové. Synoviálne kĺby sú pohyblivé kĺby, v ktorých sú kĺbové konce kostí uzavreté vo vláknitom kĺbovom puzdre vystuženom väzivami. Jeho vnútorný povrch je vystlaný synoviálnou membránou, ktorá vylučuje synoviálnu tekutinu (SF) do kĺbovej dutiny. Kĺbové povrchy kostí sú pokryté hyalínovou chrupavkou a tvoria synoviálnu dutinu.

Synoviálna tekutina a jej funkcie

Synoviálna tekutina obsiahnutá v kĺbovej dutine je biologické médium, jedinečné svojimi biofyzikálnymi, fyzikálno-chemickými vlastnosťami a zložením. Základy základného výskumu SG boli položené v polovici 19. storočia. Nemecký výskumník Frerichs (1846), ktorý študoval chemické a bunkové zloženie zvieracej synovie. Tieto štúdie boli rozvinuté a pokračovali v prácach His (1865), Steinberg (1874), O.E. Gagen-Torna (1883) a ďalší.

Vďaka použitiu mikroskopických, histochemických a ultraštrukturálnych metód výskumu bolo možné študovať vzorce štrukturálnych a metabolických procesov v prvkoch synoviálnych kĺbov. Koncom 60. a začiatkom 70. rokov sa objavila myšlienka synoviálneho systému, založená na spoločnom vývoji a koordinácii funkcií synoviálnej membrány, synovie a kĺbovej chrupavky.

SF je krvný transudát a svojim zložením je výrazne podobný plazme, ale líši sa od nej nižším obsahom bielkovín a prítomnosťou špecifického proteoglykánu – kyseliny hyalurónovej (HA). Rozdiely v proteínovom zložení plazmy a synovie sa vysvetľujú bariérovými vlastnosťami synovie, ktorá je nepriepustná pre proteínové molekuly s relatívnou molekulovou hmotnosťou viac ako 160 000.

SF sa tvorí z troch zdrojov: krvný transudát obsahujúci vodu, elektrolyty, bielkoviny; sekrečné produkty synoviálnych buniek krycej vrstvy membrány - HAA a proteolytické enzýmy; produkty opotrebovania a zmeny buniek a hlavná látka synoviálnej membrány - hlavne proteoglykány a glykoproteíny, neustále vstupujúce do kĺbovej dutiny počas normálneho života.

Obsah buniek v SF je malý a pohybuje sa od 13 do 180 na 1 mm3. Synoviálne bunky pochádzajú z buniek samotnej synoviálnej membrány a krvi (ich pomer je 51/49). Podľa práce sú SG bunky v rôznych štádiách životného cyklu: niektoré z nich sú životaschopné, iné sú v štádiu rozkladu. V synovii zdravého človeka tvoria lymfocyty 40% z celkového počtu buniek, 1/5 z nich funguje. Diferenciálne kvantitatívne účtovanie bunkových elementov je skutočným testom pri hodnotení stavu kĺbu a vedie k zostaveniu synoviocytogramu.

Normálne SF predstavujú synoviálne krycie bunky - synoviocyty (34,2-37,8 %), histiocyty (8,9-12,5 %), lymfocyty (37,4-42,6 %), monocyty (1,8-3,2 %), neutrofily (1,2-2,0) a neklasifikovaných buniek (8,3-10,1 %).

Okrem bunkových prvkov tekutina obsahuje častice opotrebovania z kĺbového tkaniva. Systém na identifikáciu častíc opotrebovania chrupavky na základe skenovacej elektrónovej mikroskopie (SEM) umožnil rozlíšiť kvantitatívne parametre opotrebovania v závislosti od patologického procesu v kĺbe. Častice izolované ferografiou a spracované pomocou SEM sa hodnotia podľa 17 parametrov (plocha, obvod, hlavná os, dĺžka vlákna, obvod elastického vlákna, konvexná plocha, konvexita, zvlnenie, tvarový faktor, kruhovitosť, zaoblenie vlákna, tvrdosť, pomer strán, vlákno pomer, pomer plocha/obvod, veľkosť fraktálu, veľkosť povrchu fraktálu). Závislosť numerických parametrov na morfológii častíc ilustruje nasledovné: oterové častice v normálnych kĺboch ​​majú nerovný povrch a sú vypuklejšie, čo súvisí s vyšším obsahom buniek a mäkkých tkanív v tekutine (menej kolagénových častíc) ; častice z artróznych kĺbov majú nerovnomerné hranice, čo je spôsobené vysokým obsahom kolagénu v časticiach chrupavky. Bol vyvinutý počítačový systém na analýzu parametrov častíc chrupavky, ktorý využíva množstvo indikátorov na opis hraníc opotrebovaných častíc. Systém analýzy vám umožňuje identifikovať trendy v numerických parametroch pre častice opotrebovania v normálnych a osteoartritických kĺboch.

Štúdium vlastností a funkčných vlastností synovie ukázalo, že synovia nie je inertný bezštruktúrny systém, ale pohyblivá štruktúrovaná dynamická formácia. Základom tohto záveru bola identifikácia proteín-polysacharidových komplexov v SF, čo sú objemné agregáty HAA a proteínov. V súčasnosti sa považuje za nesporné, že komplexy proteín-polysacharid majú v dôsledku svojej vysokej elektronegativity v roztokoch tendenciu ku sférickej konfigurácii. Štruktúry tohto tvaru s veľkosťou 100–1000 nm (ako v synoviálnych vzorkách, tak aj na povrchu chrupavky) boli prvýkrát objavené pomocou SEM koncom 60. rokov 20. storočia. Autori práce na základe experimentov vyslovili hypotézu, že guľôčky, ktoré objavili na trecích plochách chrupky, sú proteínového charakteru a zohrávajú dôležitú úlohu pri trecej interakcii kĺbovej chrupavky podľa mechanizmu valivého trenia s vratným pohybom. Táto hypotéza bola potvrdená v práci, kde bol navrhnutý molekulárny model lubrikácie. Podľa tohto modelu sieť molekúl HAA obklopuje sférické proteínové častice, ako klietka guľôčkového ložiska. Proteínové častice sa môžu voľne pohybovať okolo svojej osi, podobne ako rotujúce prvky guľôčkového ložiska (obr. 1, pozri papierovú verziu časopisu).

Ak chcete zobraziť, povoľte JavaScript
1

Štúdium biochemických ukazovateľov zloženia synoviálnej tekutiny kolenného kĺbu ľudí rôzneho pohlavia a normálneho veku neodhalilo štatisticky významné rozdiely v ukazovateľoch proteínového spektra a zlúčenín obsahujúcich sacharidy synoviálnej tekutiny kolenných kĺbov. zdravého človeka na základe pohlavia a veku. V tejto štúdii majú najbližšiu koreláciu s ľudským vekom ukazovatele y-globulínov a sialových kyselín.

synoviálna tekutina

kyselina hyalurónová

celkový proteín

kyseliny sialové

1. Bazarny V.V. Synoviálna tekutina (klinická a diagnostická hodnota laboratórnej analýzy) / V.V. trhu. – Jekaterinburg: Vydavateľstvo UGMA, 1999. – 62 s.

2. Biochemické štúdie synoviálnej tekutiny u pacientov s chorobami a poraneniami veľkých kĺbov: príručka pre lekárov / zostavil: V.V. Trotsenko, L.N. Furtseva, S.V. Kagramanov, I.A. Bogdanová, R.I. Alekseeva. – M.: TsNIITO, 1999. – 24 s.

3. Gerasimov A.M. Biochemická diagnostika v traumatológii a ortopédii / A.M. Gerasimov L.N. Furtseva. – M.: Medicína, 1986. – 326 s.

4. Diagnostická hodnota stanovenia aktivity hexokinázy v synoviálnej tekutine kolenných kĺbov / Yu.B. Logvinenko [et al.] // Lab. prípad. – 1982. – Číslo 4. – S. 212–214.

5. Lekomtseva O.I. K otázke klinického významu štúdia glykoproteínov pri recidivujúcej stenóznej laryngotracheitíde u detí / O.I. Lekomtseva // Aktuálne problémy teoretickej a aplikovanej biochémie. – Iževsk, 2001. – S. 63–64.

6. Menščikov V.V. Laboratórne metódy výskumu na klinike / vyd. V.V. Menščikov. – M., Medicína, 1987. – 361 s.

7. Pavlova V.N. Synoviálne prostredie kĺbov / V.N. Pavlova. – M.: Medicína, 1980. – S. 11.

8. Semenova L.K. Štúdie o morfológii veku za posledných päť rokov a vyhliadky na ich vývoj / L.K. Semenova // Archívy anatómie, histológie a embryológie. – 1986. – Číslo 11. – S. 80–85.

9. Bitter T. Reakcia modifikovaného karbazolu kyseliny urónovej / T. Bitter, H.M. Muir/Anal. Biochem. – 1962. – Číslo 4. – S. 330–334.

V literatúre sú indikátory synoviálnej tekutiny (SF) prezentované buď s neaktuálnymi údajmi, alebo s údajmi bez uvedenia použitej metódy. V tabuľke V tabuľke 1 uvádzame množstvo referenčných hodnôt a výsledky našich vlastných štúdií SF ľudí, ktorí nemali registrovanú kĺbovú patológiu.

Spoľahlivosť rozdielov v prezentovaných porovnávacích skupinách sme nehodnotili pomocou matematických metód z dôvodu použitia rôznych metodických východísk v literatúre.

Je potrebné poznamenať, že naše údaje nie sú v rozpore s údajmi uvedenými v literatúre. Viaceré ukazovatele si však určite vyžadujú metodické objasnenie.

Materiály a metódy výskumu

Študijný materiál pozostával z 31 mŕtvol náhle zosnulých ľudí oboch pohlaví (23 mužov a 8 žien) vo veku od 22 do 78 rokov, ktorí nemali odborne evidovanú kĺbovú patológiu.

Štatistické spracovanie získaných výsledkov bolo realizované metódou variačnej štatistiky, používanej pre malé vzorky, s pravdepodobnosťou p rovnou 0,05. Pre každú skupinu pozorovaní sa vypočítal aritmetický priemer, stredný štvorcový pomer a chyba priemeru. Na štúdium korelácie a zostrojenie korelačnej matice heterogénnych charakteristík softvér vyberá nasledujúce pravidlá pre výpočet korelačných koeficientov: pri výpočte korelácie dvoch kvantitatívnych parametrov - Pearsonov koeficient; pri výpočte korelácie ordinálnych/kvantitatívnych a ordinálnych parametrov - Kendallov koeficient poradovej korelácie; pri výpočte korelácie dvoch dichotomických charakteristík - Bravaisovho koeficientu kontingencie; pri výpočte korelácie kvantitatívnych/ordinálnych a dichotomických charakteristík - bodovo-biseriálna korelácia. Aby program mohol identifikovať škálu pre meranie charakteristík, vo fáze výberu počiatočných údajov bol zavedený interval charakteristík.

Výsledky výskumu a diskusia

Odhadujeme, že koncentrácia celkového proteínu (TP) v synovii je výrazne nižšia ako v literatúre. Najčastejšie používané metódy na stanovenie koncentrácie OB sú biuretová a Lowryho metóda, ktoré sa líšia rôznym stupňom citlivosti a špecifickosti. Stanovenie Lowryho proteínu je citlivejšie, ale menej špecifické ako biuretová metóda. Vo viacerých prameňoch, ako aj v našej práci bola použitá biuretová metóda.

Zvlášť zaujímavé je kvantitatívne stanovenie hlavnej špecifickej zložky SF - nesulfátovaného glykozaminoglykánu - kyseliny hyalurónovej (HA) (polymér disacharidových sekvencií acetylovaného aminocukru a kyseliny urónovej). Je známe, že je obsiahnutý v synovii vo forme komplexu hyaluronát-proteín a je uložený v povrchu kĺbovej chrupavky. V citovaných zdrojoch sa stanovenie HA začínalo zrážaním špecifickými zrážadlami, čím sa kvantitatívne zhodnotil jej obsah stanovením urónových kyselín. V našich údajoch uvádzame množstvo urónových kyselín po stanovení v natívnej synovii, berúc do úvahy, že precipitanty glykozaminoglykánov nie sú špecifické pre ich sulfátované a nesulfátované formy. Množstvo sulfátovaných glykozaminoglykánov sme posudzovali podľa pomeru sulfátov k urónovým kyselinám. Stanovenie sialových kyselín v natívnej synovii charakterizuje ich celkový obsah, t.j. celková koncentrácia voľných a na bielkoviny viazaných sialových kyselín v zložení glykoproteínov. Keďže plazmatické glykoproteínové proteíny spúšťajú cytokínovú kaskádu zápalovej odpovede po desialylácii, je prirodzené očakávať súvislosť s klinickými charakteristikami kĺbových ochorení s ich stanovením v synovii. Údaje, ktoré sme získali o aktivite proteolytických enzýmov, sme nemohli porovnať, keďže v referenčných zdrojoch sú ukazovatele proteolytickej aktivity uvedené s odkazom na substrát protamín sulfát (a v našich štúdiách slúžil ako substrát hemoglobín) alebo bez odkazu na substrát.

Vzhľadom na to, že vekom podmienené poruchy metabolizmu kĺbových tkanív do značnej miery podmieňujú rozvoj degeneratívno-dystrofických procesov v kĺboch ​​a ženy trpia osteoartrózou takmer 2-krát častejšie ako muži a v súlade s cieľmi stanovenými v našej práce sme hodnotili vekové a rodovo špecifické charakteristiky biochemického zloženia tekutiny normálneho ľudského kolenného kĺbu.

V biochemickom zložení SG a žien sme podľa nami stanovených ukazovateľov nezistili signifikantné rozdiely, čo ilustrujú údaje uvedené v tabuľke. 2.

stôl 1

Hlavné chemické zložky synoviálnej tekutiny zdravých ľudí (v porovnaní údajov od rôznych autorov a výsledkov nášho vlastného výskumu)

Ukazovatele

Viskozita, mm, 2/s

Celkový proteín, g/l (TB)

Proteín, frakcie, %, albumín

a1-globulíny

a2-globulíny

β-globulíny

y-globulíny

Kyselina hyalurónová, g/l

1,70-2,20

Sírany, mmol/l,

1,08 ± 0,04

Sulfáty/UK

Kyselina sialová, mmol/

0,16-0,42

0,36 ± 0,01

Poznámky * - tučným písmom sú čísla získané od autorov po prepočítaní rozmerov,

** zloženie bielkovinových frakcií v zdrojoch 2 a 4 je uvedené podľa K. Kleesiek (1978).

1 - V.N. Pavlova, 1980

2 - Gerasimov, Furtseva, 1986

3 - V.V. Bazarnov, 1999

4 - CITO, 1999

5 - vlastné údaje

tabuľka 2

Biochemické parametre synoviálnej tekutiny kolenných kĺbov mužov a žien

Index

Muži (n = 23)

Ženy (n = 8)

Celkové bielkoviny g/l (TB)

Proteín, frakcie, % albumínu

a1-globulíny

a2-globulíny

β-globulíny

y-globulíny

Sírany, mmol/l

Sulfáty/UK

Tabuľka 3

Hodnoty korelácie medzi biochemickými parametrami synoviálnej tekutiny ľudských kolenných kĺbov s vekom

Poznámka. Hodnoty korelačného koeficientu, ktoré sa výrazne líšia od nuly na hladine významnosti p, sú zvýraznené tučným písmom.< 0,05.

Tabuľka 4

Koncentrácie γ-globulínov a sialových kyselín v synoviálnej tekutine kolenného kĺbu ľudí rôznych vekových skupín

Stanovením korelácie medzi vekom a biochemickým zložením synovie sme vypočítali koeficient a významnosť korelácie pre jednotlivé biochemické parametre, ako aj pomer urónových kyselín k celkovej bielkovine a sulfátov k urónovým kyselinám. Prvý pomer sme brali ako indikátor akumulácie proteoglykánových metabolických produktov a druhý ako stupeň sulfatácie glykozaminoglykánov v synovii. Výsledky výpočtu korelačných ukazovateľov sú uvedené v tabuľke. 3. Ukazovatele, ktoré sa s vekom najviac menia, sú γ-globulínová frakcia bielkovín a kyseliny sialovej. Pre pomer síranov k urónovým kyselinám je korelačný koeficient vysoký na nespoľahlivej úrovni významnosti. Pri ostatných ukazovateľoch nebola zistená významná korelácia s vekom. Získané údaje nám umožňujú vyhodnotiť koreláciu medzi vybranými ukazovateľmi a vekom ako významnú. Dá sa predpokladať, že s vekom dochádza v SF k určitej akumulácii sialických zlúčenín a γ-globulínov. Je zrejmé, že ide o dôsledok zvýšenia počtu glykoproteínov, možno imunoglobulínov. Jednou z ich biologických funkcií je využitie produktov rozkladu bielkovín, ktoré môžu pochádzať z poškodených tkanív počas involučného procesu počas starnutia. Zdôrazňujeme však, že sme nezistili signifikantné rozdiely v hladine týchto zlúčenín v SF ľudí rôzneho veku.

Na určenie normatívnych hodnôt ukazovateľov, ktoré najviac súvisia s vekom, sme hodnotili spoľahlivosť rozdielov v koncentráciách SA a γ-globulínov v rôznych vekových skupinách. Rozdelenie materiálu do skupín sa uskutočnilo podľa schémy odporúčanej sympóziom o periodizácii veku na Ústave fyziológie veku Akadémie lekárskych vied ZSSR. Pri náraste týchto ukazovateľov sme v skupinách nezistili signifikantné rozdiely (tab. 4).

Štúdie teda neodhalili významné rozdiely v ukazovateľoch proteínového spektra a zlúčenín obsahujúcich uhľohydráty SF kolenných kĺbov zdravého človeka na základe pohlavia a veku a pre ukazovatele sa našli najbližšie korelácie s vekom osoby. y-globulínov a sialových kyselín.

Na základe prezentovaných literárnych údajov je ľahké si všimnúť, že pri širokej škále použitých metód a techník biochemického výskumu nebola stanovená informatívnosť a diagnostický význam týchto štúdií pre praktickú činnosť.

Bibliografický odkaz

Matveeva E.L., Spirkina E.S., Gasanova A.G. BIOCHEMICKÉ ZLOŽENIE SYNOVIÁLNEJ TEKUTINY KOLENNÉHO KĹBU ĽUDÍ JE NORMÁLNE // Pokroky moderných prírodných vied. – 2015. – č.9-1. – s. 122-125;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=35542 (dátum prístupu: 02/01/2020). Dávame do pozornosti časopisy vydávané vydavateľstvom „Akadémia prírodných vied“