Priprema uzorka biološkog materijala za PCR. Metode prikupljanja biomaterijala za istraživanje pomoću PCR metode

Odabir kliničkog materijala provodi medicinsko osoblje u skladu s pravilima protuepidemijskog režima, samo sa sterilnim instrumentima za jednokratnu upotrebu (šprice, odgovarajuće sonde, citočetkice i sl.), noseći jednokratne rukavice.

Prikupiti materijal s odabranog lokusa što potpunije, prikladnim aplikatorima – sondama, citočetkicama (provjeriti adekvatnost kliničkog uzorka).

Sačuvajte dobiveni materijal (DNA/RNA mikroorganizama) koristeći pouzdane transportne medije i konzervanse koje osigurava PCR laboratorij. Medij za transport i skladištenje kliničkog materijala osigurava stabilnost RNA i DNA na sobnoj temperaturi do 28 dana.

Prikupljeni materijal stavite u vakuume s EDTA (krv), u jednokratne kemijski čiste Eppendorfove epruvete (brisevi, likvor, biopsija itd.). Glavni uvjet pri prikupljanju materijala je spriječiti ulazak DNAaza i ribonukleaza u uzorak, jer Ribonukleaze i DNAaze su enzimi za razgradnju RNA i DNA. Iznimno su stabilni u okolišu i mogu podnijeti dugotrajno vrenje. Glavni izvor nukleaza su čestice kože i prašine. Plastične epruvete i vrhovi moraju imati oznaku "DNase, RNaze-free."

Odmah nakon uzimanja dobro zatvorite epruvete i bočice s kliničkim materijalom bez dodirivanja njihove unutarnje površine ili unutarnje površine čepova.

Pri radu s kliničkim materijalom, prilikom otvaranja epruveta, bočica, ne raditi nagle pokrete i izbjegavati prskanje i prskanje, što može dovesti do kontaminacije uzoraka i radnih površina.

Kako biste izbjegli međusobnu kontaminaciju, čuvajte i transportirajte uzorke u zasebnoj plastičnoj vrećici ili policama. Ako je potreban prijenos uzorka, koristite automatske mikropipete sa zamjenjivim jednokratnim vrhovima s aerosolnim barijerama.

Prije transporta u PCR laboratorij odabrani biomaterijal treba čuvati na temperaturi od 2-4 °C ne dulje od 48 sati. Potrebno je minimizirati vrijeme od uzimanja uzorka do PCR analize. Prijevoz uzoraka vrši se u rashladnim torbama, termo kontejnerima, termosicama s termo vrećicama, ledom ili suhim ledom.

Krv, plazma, serum

Preporuča se prikupljanje krvi pomoću vakuumskih sustava. Uvođenje ovakvih sustava omogućuje standardizaciju manipulacija krvlju, pozitivno utječe na sve faze laboratorijskih istraživanja i općenito pomiče rad laboratorija na drugu, višu razinu kvalitete. Njihova uporaba jamči zaštitu osoblja od infekcija, skraćuje vrijeme potrebno za proceduru vađenja krvi, znatno je manja vjerojatnost da će biti popraćena hemolizom, te omogućuje sterilnost i hermetički transport uzoraka krvi.

Preporuča se provesti venepunkciju na prazan želudac iz ulnarne vene u posebnu vakumsku cijev s antikoagulansom, nakon čega se epruveta nekoliko puta preokrene radi miješanja. Epruvete s krvlju čuvaju se u hladnjaku na +4 °C – +8 °C. Maksimalni rok trajanja krvi je 1 dan (ne zamrzavati!). Ako je potrebno dugotrajno čuvanje, potrebno je uzeti 1 ml seruma ili krvne plazme i čuvati na temperaturi od -16 o -20 o C ne duže od 2 tjedna.

Karakteristike vakuumskih sustava koji se koriste za PCR dijagnostiku:

Vacuettes s EDTA (6%) - koriste se za kvalitativna i kvantitativna istraživanja. EDTA antikoagulans dobro fiksira stanične nukleinske kiseline.

Vacuettes s natrijevim citratom (3,8%) - koriste se za kvalitativna i kvantitativna istraživanja. Nije pogodan za dugotrajni transport, jer citrat je dobar hranjivi medij za stranu mikrofloru.

Vacuettes bez antikoagulansa (krvni serum) - koriste se za kvalitativna istraživanja. Upotreba krvnog seruma za kvantitativne studije je nepoželjna, jer dio infektivnog agensa taloži se u krvnom ugrušku, čime se smanjuje mogućnost određivanja njegovog kvantitativnog sadržaja u krvi.

Vakuete s heparinom apsolutno nisu prikladne za PCR reakcije. Heparin je polianion, poput DNK, i stoga se natječe s DNK u PCR reakciji.

Ako je potrebna odgođena analiza (transport na velike udaljenosti, tehnički kvar uređaja i sl.), uzorci krvi se čuvaju u hladnjaku (4 o - 8 o C) i pregledavaju unutar 24 sata. Međutim, treba uzeti u obzir da dolazi do bubrenja stanica i promjena parametara povezanih s njihovim volumenom. U praktički zdravih ljudi ove promjene nisu kritične i ne utječu na kvantitativne parametre, ali u prisutnosti patoloških stanica, potonje se mogu promijeniti ili čak uništiti unutar nekoliko sati od trenutka uzimanja krvi.

Neposredno prije testa, krv treba temeljito miješati nekoliko minuta kako bi se razrijedio antikoagulans i ravnomjerno rasporedili formirani elementi u plazmi. Ne preporuča se dugotrajno stalno miješanje uzoraka do pregleda zbog mogućih ozljeda i propadanja patoloških stanica.

Ispitivanje krvi na automatskom analizatoru provodi se na sobnoj temperaturi. Krv pohranjena u hladnjaku mora se prvo zagrijati na sobnu temperaturu, budući da se pri niskim temperaturama viskoznost krvi povećava, a formirani elementi imaju tendenciju lijepljenja, što zauzvrat dovodi do poremećenog miješanja i nepotpune lize. Ispitivanje hladne krvi može uzrokovati "signale za uzbunu" zbog kompresije histograma leukocita.

Prilikom izvođenja hematoloških studija na znatnoj udaljenosti od mjesta uzimanja krvi neizbježno se pojavljuju problemi povezani s nepovoljnim uvjetima prijevoza. Utjecaj mehaničkih čimbenika (tresenje, vibracije, miješanje itd.), temperaturni uvjeti, vjerojatnost prolijevanja i kontaminacije uzoraka mogu utjecati na kvalitetu analiza. Kako bi se ovi razlozi uklonili, pri transportu epruveta za krv preporuča se koristiti hermetički zatvorene plastične epruvete i posebne izolirane transportne spremnike. Tijekom transporta nije dopušten kontakt uzorka (s nativnim materijalom) i uputnice, sukladno pravilima biološke sigurnosti.

^ 4.3. Prijem i registracija biološkog materijala

Epruvete s uzorcima venske krvi dostavljaju se u laboratorij na dan uzimanja u stalcima u posebnim vrećama za isporuku biološkog materijala, u kojima epruvete moraju biti u okomitom položaju, a kada se transportiraju na daljinu - u posebnim spremnicima.

Zaposlenik laboratorija koji prima materijal mora provjeriti:

Ispravnost upisa uputnice: u uputnici se navode podaci ispitanika (prezime, ime i patronim, dob, broj anamneze ili ambulantnog kartona, odjel, dijagnoza, provedena terapija);

Označavanje epruveta s uzorcima krvi (moraju biti označene šifrom ili prezimenom bolesnika, identično šifri i prezimenu u obrascu za slanje materijala na istraživanje). Laborant mora evidentirati dostavljeni materijal i zabilježiti broj epruveta.

^ 4.4 Izračunavanje staničnog sastava krvi na hematološkom analizatoru

Izračun staničnog sastava krvi na hematološkom analizatoru mora se provoditi u strogom skladu s uputama za uređaj.

Prilikom rada na hematološkom analizatoru trebali biste:

Za hematološke studije koristiti krv stabiliziranu s K-2 EDTA u preporučenom omjeru za određenu sol i jednokratne epruvete (jednostavne ili vakuumske);

Prije analize pažljivo, ali temeljito promiješajte epruvetu s krvlju (preporuča se u tu svrhu koristiti uređaj za miješanje uzoraka krvi - rotomix);

Koristite reagense registrirane u skladu s utvrđenom procedurom; kada mijenjate reagense na proizvode drugog proizvođača, trebali biste provjeriti i uspostaviti kalibraciju uređaja;

Pokrenite uređaj, promatrajući sve faze pranja, postižući nulte (pozadinske) vrijednosti indikatora u svim kanalima;

Obratite pozornost na poruke uređaja o mogućim sustavnim pogreškama: zapamtite da je porast MSHC iznad normalnih vrijednosti obično rezultat pogreške mjerenja;

Ako se otkrije pogreška, svakako uklonite uzrok i nemojte raditi na neispravnom uređaju;

Provesti postupke kontrole kvalitete prema odgovarajućem programu. s procjenom dobivenog rezultata;

Radite smisleno, uspoređujući dobivene rezultate s kliničkim karakteristikama uzoraka pacijenta;

Nakon završetka mjerenja, temeljito isperite analizator;

Prilikom dužeg zaustavljanja uređaja obavezno izvršite sve postupke konzerviranja (ako je moguće, zajedno sa serviserom);

Ako dođe do tehničkih problema, trebate potražiti pomoć servisera tvrtke koja ima licencu za tehničko održavanje; Ne povjeravajte rad neobučenom osoblju.

Pri početku rada na hematološkom analizatoru treba voditi računa o granicama linearnosti mjerenja analiziranih parametara. Ocjenjivanje uzoraka s analiziranim vrijednostima parametara koje prelaze granicu linearnosti mjerenja može dovesti do pogrešnih rezultata. U većini slučajeva, pri analizi uzoraka s hipercitozama, analizator umjesto vrijednosti mjerenog parametra prikazuje ikonu “D” (razrijeđeno), što ukazuje na potrebu razrjeđivanja uzorka i ponavljanja mjerenja. Razrjeđivanja se moraju provoditi dok se ne dobiju slični konačni rezultati s dva najbliža razrjeđenja.

^ PRIMJER ─ U tablici je prikazana analiza uzorka bolesnika s hiperleukocitozom na tri različita hematološka analizatora.

Tablica 3

¦Rezultati brojanja količine za hiperleukocitozu, izvedeni na tri različita hematološka analizatora

1. 
   ^ Kalibracija hematoloških analizatora

Čime se postiže jednakost sustavne komponente pogreške nuli (zero offset) ili potvrđuje da je offset jednak nuli uzimajući u obzir pogrešku kalibracije. Kalibracija hematoloških analizatora može se izvesti na dva glavna načina:

Za punu krv;

Na temelju stabiliziranih uzoraka krvi s potvrđenim vrijednostima.

^ 5.1 Kalibracija korištenjem pune krvi

Kalibracija pune krvi može se provesti usporedbom s referentnim analizatorom, čija je kalibracija verificirana i može se uzeti kao referenca.

Za kalibraciju usporedbom s referentnim analizatorom koristi se 20 uzoraka venske krvi pacijenata nasumično odabranih iz dnevnog istraživačkog programa laboratorija s referentnim analizatorom. Krv treba prikupiti u vakuumske epruvete s antikoagulansom K 2 EDTA. Nakon analize na referentnom analizatoru, epruvete se dostavljaju u laboratorij na analizu na kalibriranom uređaju. Vrijeme između mjerenja na referentnom i kalibriranom analizatoru ne smije biti dulje od 4 sata. Analizu kalibracijskih uzoraka na instrumentu koji se kalibrira treba provesti na isti način kao i analizu uzoraka pacijenata. Dobiveni rezultati unose se u tablicu u obliku danom u Dodatku 1. Ti se rezultati koriste za određivanje odgovarajućih kalibracijskih faktora, koji su numerički jednaki koeficijentima nagiba kalibracijskih linija koje prolaze kroz ishodište koordinata na grafikonu.

Faktori kalibracije izračunavaju se na računalu pomoću programa EXCEL koji je dio paketa Microsoft OFFICE bilo koje verzije. Za izračun kalibracijskih faktora u ovom programu konstruira se dijagram raspršenosti, gdje su izmjerene vrijednosti iscrtane duž X osi, referentne vrijednosti su iscrtane duž Y osi, a regresijska linija postavljena je kroz ishodište koordinata. Program iscrtava kalibracijsku liniju i određuje njen nagib, što je željeni faktor kalibracije. Ako se otkriju velike pogreške - točke značajno udaljene od kalibracijske linije na grafikonu, moraju se ukloniti iz izračuna (brisanje cijele linije u EXCEL tablici). Dobiveni kalibracijski faktor upisuje se u tablicu u Prilogu 1 i služi za ručno podešavanje kalibracije uređaja prema uputama za uporabu.

1. 
   ^ Kalibracija pomoću stabiliziranih uzoraka krvi s potvrđenim vrijednostima

Kad god je moguće, treba koristiti kalibratore koje je proizvođač posebno dizajnirao za kalibraciju određene vrste analizatora. Pogreške zadane vrijednosti u modernim hematološkim kalibratorima općenito su u skladu s medicinskim zahtjevima. Međutim, takvi kalibratori nisu dostupni za sve vrste analizatora. Osim toga, zbog ograničenog roka trajanja (obično ne duljeg od 45 dana), nije uvijek moguće dobiti uzorke kojima nije istekao rok trajanja.

Kontrolni materijali nisu namijenjeni od strane proizvođača za potrebe kalibracije: tolerancije za vrijednosti su mnogo šire, a metode certifikacije i kontrole proizvodnje nisu tako stroge kao za kalibratore. Pri umjeravanju se kontrolni materijali mogu koristiti samo kao jedan izvor informacija o mjeriteljskim svojstvima uređaja.

Međutim, treba imati na umu da kada se koriste i kontrolni materijali i kalibratori za potrebe umjeravanja, značajke pripreme uzorka i rada analizatora imaju značajan utjecaj na komponente sustavne pogreške. Ovi čimbenici utjecaja ne mogu se uzeti u obzir pri kalibraciji s komercijalnim materijalima. Kao rezultat toga, u svim slučajevima, izvršena kalibracija mora biti verificirana analizom statistike rezultata dobivenih u uzorcima pacijenata (indeksi eritrocita, normalni rasponi).

5.2.1 Učestalost kalibracije hematoloških analizatora

Zahtjevi za učestalost kalibracije obično su sadržani u uputama za rad analizatora. Obično je kalibracija potrebna nakon popravka ili kada se otkrije značajno odstupanje u internim laboratorijskim postupcima kontrole kvalitete.

5.2.2 Postupak kalibracije

Postupak kalibracije provodi se prema uputama za rad analizatora.

5.2.3 Praćenje rezultata kalibracije

Ova se kontrola sastoji od analize kalibracijskog uzorka neposredno nakon kalibracije. Izvršena kalibracija je prihvaćena ako rezultati analize odgovaraju vrijednostima kalibracije, uzimajući u obzir analitičku varijaciju analizatora.

5.2.4 Provjera kalibracije pomoću indeksa crvenih krvnih stanica

Ova metoda provjere i poboljšanja kalibracije iskorištava činjenicu da prosječne vrijednosti indeksa crvenih krvnih zrnaca - MCHC, MCH i MCV kod pacijenata imaju prilično male varijacije i stoga se mogu učinkovito koristiti za kontrolu kalibracije i daljnju kontrolu kvalitete. Preporučeni broj uzoraka za izračunavanje prosjeka je 20. Uzorci bilo kojeg pacijenta mogu se koristiti za određivanje srednje vrijednosti MCHC, dok se pacijenti s anemijom trebaju isključiti za određivanje srednje vrijednosti MCHC i MCV.

Mnogi suvremeni hematološki analizatori imaju ugrađene programe za izračun tekućih prosjeka, što uvelike olakšava obradu podataka.

Ciljne vrijednosti indeksa eritrocita u prosjeku na 20 uzoraka bolesnika u dobi od 18 do 60 godina, neovisno o spolu, prikazane su u tablici 4.

Tablica 4

Ciljane vrijednosti indeksa eritrocita

Ako su dobivene prosječne vrijednosti izvan kontrolne tolerancije, to znači da je potrebno prilagoditi kalibraciju MCV ili Hgb ili RBC.

Prilikom utvrđivanja razloga nezadovoljavajuće kalibracije parametara crvenih krvnih stanica pri korištenju komercijalnih kalibracijskih/kontrolnih materijala, treba uzeti u obzir sljedeću procjenu pouzdanosti certificiranih vrijednosti materijala:

Najtočniji i vremenski najstabilniji parametar je koncentracija crvenih krvnih stanica;

Stabilan parametar je Hgb, ali može ovisiti o korištenim reagensima (na primjer, cijanogen ili bez cijanogena);

Najnestabilniji parametar je MCV. Vrijednost MCV ima tendenciju promjene tijekom cijelog roka trajanja materijala u prilično širokom rasponu vrijednosti. Prilikom preciziranja MCV kalibracije, podaci dobiveni analizom prosječnih indeksa crvenih krvnih zrnaca imaju prednost nad certificiranim vrijednostima u stabiliziranim uzorcima krvi.

Pod pretpostavkom da je kalibracija crvenih krvnih zrnaca točna, tablica 5 prikazuje moguće razloge zbog kojih prosječne vrijednosti indeksa padaju izvan kontrolne tolerancije.

Tablica 5

Razlozi za prekoračenje prosječnih vrijednosti indeksa eritrocita

Postupak prikupljanja kliničkog materijala u epruvetu s transportnim medijem:

1. Otvorite poklopac epruvete.

2. Pomoću sterilne sonde za jednokratnu upotrebu dobijete odgovarajući iscjedak

biotop (vagina, uretra, cervikalni kanal).

3. Sondu s kliničkim materijalom prebacite u epruvetu s transportnim medijem volumena 1,5 ml, kada sonda prisloni na dno epruvete, dodatnom silom savijte tanki dio sonde do zareza, zatim slomite isključiti i ostaviti sondu u epruveti.Ako je potrebno dobiti klinički materijal iz više biotopa ponoviti postupak, svaki put uzimajući klinički materijal novom sondom u novu epruvetu.

3. Dobro zatvorite epruvetu poklopcem i označite je.

Značajke uzimanja kliničkog materijala iz cervikalnog kanala:

1. Klinički materijal cervikalnog kanala dobiva se uvođenjem ginekološkog spekuluma u rodnicu uretralnom sondom ili cervikalnom citočetkicom (za testiranje na HPV potreban je dovoljan broj epitelnih stanica!).

2. Prije uzimanja kliničkog materijala potrebno je pažljivo očistiti otvor cervikalnog kanala sterilnom gazom, a zatim tretirati cerviks sterilnom fiziološkom otopinom.

3. Nakon umetanja uretralne cijevi 1,5 cm u cervikalni kanal, ona se nekoliko puta okrene (2-3 puna okreta u smjeru kazaljke na satu) i izvadi. Prilikom vađenja sonde potrebno je u potpunosti spriječiti da ona dodiruje stijenke rodnice.

4. Dobiveni klinički materijal stavlja se u epruvetu s transportnim medijem (vidi gore).

Značajke uzimanja kliničkog materijala iz vagine:

Na dan pregleda žene ne smiju obavljati nuždu genitalija niti ispiranje rodnice.

1. Klinički materijal iz vagine uzima se iz stražnjeg ili bočnog forniksa vaginalnom ili uretralnom sondom struganjem s površine epitela.

2. Klinički materijal mora se pribaviti PRIJE obavljanja ručnog pregleda.

3. Prije manipulacije ginekološki spekulum se može navlažiti toplom vodom, kontraindicirana je uporaba antiseptika za tretiranje spekuluma.

4. U djevojčica (djevica) klinički materijal se uzima sa sluznice predvorja rodnice bez uporabe ginekološkog spekuluma.

5. Dobiveni klinički materijal stavlja se u epruvetu s transportnim medijem (vidi gore).

Značajke uzimanja kliničkog materijala iz uretre kod žena:

1. Klinički materijal iz uretre dobiva se uretralnom sondom.

2. Prije uzimanja kliničkog materijala, pacijentu se savjetuje da se suzdrži od mokrenja 1,5-2 sata.

3. Ako postoji slobodan uretralni iscjedak, vanjski uretralni otvor treba očistiti vatom.

4. Ako nema slobodnog iscjetka, može se napraviti lagana masaža uretre.

5. Nakon umetanja instrumenta u mokraćnu cijev do dubine od 1 cm, potrebno ju je pomaknuti do vanjskog otvora, lagano pritiskajući stražnju i bočnu stijenku uretre (rotacijski pokreti su bolni).

6. Dobiveni klinički materijal stavlja se u epruvetu s transportnim medijem (vidi gore).

Za proučavanje materijala dobivenog iz više biotopa, postupak se ponavlja, svaki put s novom sterilnom sondom i novom epruvetom!!!

Neprihvatljivo je miješati materijal iz cervikalnog kanala, vaginalnog sadržaja i uretre u jednoj epruveti!

Značajke uzimanja kliničkog materijala iz uretre kod muškaraca:

1,5–2 sata. Kako bi se isključile distorzije u rezultatima određivanja sastava mikroflore urogenitalnog trakta muškaraca zbog prisutnosti prolazne mikroflore u urogenitalnom traktu tri dana prije uzimanja biomaterijala, preporučuje se seksualna apstinencija ili korištenje zaštićenog seksualnog kontakta.

1. Prije uzimanja struganja iz uretre, tretirati glavicu penisa u području vanjskog otvora uretre vatom navlaženom sterilnom fiziološkom otopinom.

2. Masirajte uretru. Ako iz uretre slobodno teče iscjedak, uklonite ga suhim tupferom.

3. Sonda se uvodi u mokraćnu cijev na dubinu od 1-2 cm.Epitelne stanice se sastružu s nekoliko rotacijskih pokreta i sonda se prenese u epruvetu s transportnim medijem, odlomi i ostavi. Iscjedak se skuplja u dovoljnoj količini. Prihvatljiva je umjerena prisutnost nečistoća u obliku sluzi, krvi i gnoja.

Uzimanje kliničkog materijala Sprepucij glavića penisa (GPP):

Prije uzimanja biomaterijala, pacijentu se savjetuje da se suzdrži od mokrenja

1,5–2 sata.

1. Jednokratnom sondom sastružu se epitelne stanice s odgovarajućeg biotopa (kožica glavića penisa, prepucijalna vrećica) i sonda se prenese u epruvetu s transportnim medijem, odlomi i ostavi.

Uvjeti skladištenja i prijevoza biomaterijala:

1. Epruvete s dobivenim kliničkim materijalom moraju biti označene.

2. U popratnoj uputnici mora biti navedeno: ime i prezime, dob bolesnika, klinički materijal, predložena dijagnoza, indikacije za pretragu, datum i vrijeme uzimanja uzorka, naziv ustanove (jedinice) koja šalje klinički materijal.

3. Ako vrijeme prijevoza kliničkog materijala od trenutka uzimanja do trenutka njegove dostave u laboratorij nije duže od 24 sata, tada se epruveta s kliničkim materijalom mora pohraniti i dostaviti u laboratorij na temperaturi od kućanski hladnjak (+ 4 + 10 ° C), bez zamrzavanja.

Pošaljite svoj dobar rad u bazu znanja jednostavno je. Koristite obrazac u nastavku

Studenti, diplomanti, mladi znanstvenici koji koriste bazu znanja u svom studiju i radu bit će vam vrlo zahvalni.

Objavljeno na http://www.allbest.ru/

"Medicinska škola u Nižnjem Novgorodu"

(GBOU SPO NO "NMK")

Test

Tema: “Organizacija prijema, označavanja i evidentiranja biomaterijala”

Završeno:

student grupe 221-IV lab.

Stepanychev M.N.

Učitelj, nastavnik, profesor:

Belova M.N.

N. Novgorod 2016

Uvod

1. Teorijski dio

1.1 Registracija uputa

1.2 Načini laboratorijskih istraživanja

1.3 Uvjeti skladištenja i prijevoza materijala za klinička laboratorijska istraživanja

1.4 Područje primjene

1.5 Organizacija procesa prijevoza biomaterijala kurirom i odgovornost dostavljača

1.6 Prijem biomaterijala u laboratoriju

1.7 Prijenos biomaterijala i upućivanje na relevantne odjele laboratorija

1.8 Registracija obrazaca za narudžbe od strane operatera

2. Praktični dio

Zaključak

Uvod

Laboratorijske pretrage su najosjetljiviji pokazatelji stanja bolesnika. Specijalisti kliničke laboratorijske dijagnostike odavno su shvatili da mnogi čimbenici mogu utjecati na rezultate laboratorijskih pretraga. Među tim čimbenicima su pravilno isporučeni i kompetentno dizajnirani uzorci biomaterijala i popratna dokumentacija. U nedostatku takvih popratnih informacija (čimbenici koji utječu na laboratorijske testove), kliničar može pogrešno protumačiti rezultat i poduzeti pogrešne mjere za pacijenta.

Svrha ovog testa je skrenuti pozornost na potrebu revizije pravila zaprimanja i obrade dokumentacije biološkog materijala. Ispravna primjena informacija trebala bi dovesti do smanjenja nepotrebnih istraživanja, smanjenja troškova i boljeg razumijevanja rezultata istraživanja.

Cilj:

Proučiti organizaciju prijema, označavanja i registracije biomaterijala.

Zadaci:

1. Studija korištenja biomaterijala.

2. Priprema svoje dokumentacije.

1. Teorijski dio

Trenutno laboratorijske metode istraživanja igraju ključnu ulogu u dijagnostici i liječenju bolesti. Pri pregledu bolesnika od velikog su značaja organizacijski aspekti laboratorijske dijagnostike, osiguranje točnosti i ispravnosti laboratorijskih pretraga, primjena stabilnih, tehnički pouzdanih analitičkih metoda te kontrola kvalitete istraživanja.

Zdravstvene ustanove koriste prilično širok spektar laboratorijskih metoda, a uz standardizirane rutinske tehnike koriste se i suvremene metode istraživanja koje su visoko specifične i informativne.

Uvođenje visokospecifičnih laboratorijskih metoda dijagnostike bolesti u zdravstvenu praksu zahtijeva standardizaciju u svim fazama dijagnostičkog procesa.

Udio pogrešaka predanalitičke faze u ukupnom broju laboratorijskih pogrešaka kreće se od 50% do 95%. Pogreške koje se javljaju u predanalitičkoj fazi laboratorijskog istraživanja obezvrjeđuju cjelokupni daljnji tijek laboratorijskog istraživanja, dovode do gubitka značajnih financijskih sredstava, te diskreditiraju laboratorijske metode u očima liječnika zbog nepouzdanosti dobivenih rezultata.

Za sve vrste laboratorijskih istraživanja, predanalitički stupanj kombinira skup procesa prije stvarne laboratorijske analize, koji se sastoji od:

· temeljita priprema subjekata;

· dobivanje biomaterijala (krv, urin, itd.);

· transport biomaterijala u laboratorij;

· primarna obrada biomaterijala u laboratoriju;

· distribucija i skladištenje biomaterijala u laboratoriju.

Glavni zadatak ovih faza predanalitičkog procesa je osigurati stabilnost (sigurnost) komponenti biomaterijala uzetih za istraživanje i minimizirati utjecaj različitih čimbenika koji mijenjaju njihovu kvalitetu.

U tom smislu razmatra se predanalitički stadij.

1.1 Registracija uputa

Prilikom uzimanja materijala morate ispravno ispuniti upute. Ne smiju se miješati epruvete i popratni dokumenti i naljepnice. Pretinac i serijski broj navedeni su na tubi. Na epruveti s krvlju za određivanje grupe i Rh pripadnosti - dodatno prezime pacijenta.

U uputama za analizu prilikom uzimanja biomaterijala morate navesti: (svi podaci uzimajući u obzir nalog Ministarstva zdravstva Republike Bjelorusije od 28. rujna 2007. br. 787 o obrascima primarne medicinske dokumentacije)

· podaci o pacijentu - prezime, ime, patronim, datum rođenja, spol, adresa, broj povijesti bolesti, dijagnoza.

· ime liječnika koji je biomaterijal poslao na analizu;

datum i vrijeme uzimanja biomaterijala;

· dati kratak opis biomaterijala koji se šalje (navesti vrstu biomaterijala), materijal koji ne odgovara deklariranom neće biti pregledan - npr. slina umjesto sputuma, serum umjesto plazme;

· značajke prikupljanja biomaterijala (mjesto prikupljanja - za krv, za urin - volumen, dio, vrijeme prikupljanja);

· sve potrebne studije, a ne samo "biokemijski test krvi".

Uputnicu za analizu potpisuje liječnik.

Izbjegavajte dupliranje testova.

1.2 Načini laboratorijskih istraživanja

Sva krv treba biti isporučena samo u centrifugalnim, kemijski čistim epruvetama uzeta u laboratoriju. Krv za istraživanje u načinu hitne analize treba dostaviti odvojeno i ne stavljati je na stol zajedno s zakazanim testovima bez upozorenja. Zaposlenik odjela koji je dostavio hitnu pretragu dužan je osigurati da nalaz bude prihvaćen od strane djelatnika laboratorija.

Hitne pretrage se rade unutar 2 sata, samo za pacijente u teškom stanju, ako je hitna intervencija neophodna. Za obavljanje hitne analize dodjeljuje se poseban laboratorijski asistent i liječnik laboratorijske dijagnostike. Izvođenje istraživanja u hitnom načinu analize zahtijeva veći utrošak reagensa i radnog vremena specijalista, a posljedično i veće financijske troškove.

Trenutno laboratorij za urgentne analize po hitnom postupku obavlja sljedeće krvne pretrage:

Određivanje koncentracije hemoglobina

Izračun hematokrita

· Brojanje broja crvenih krvnih zrnaca

· Broj leukocita

· Broj leukocita

Broj trombocita

Analiza po pozivu obavlja se tijekom radnog dana - za novoprimljene pacijente ili kada se stanje bolesnika pogorša i ne zahtijeva hitnu intervenciju.

Napomena: normalne laboratorijske vrijednosti odnose se na uzorke natašte. Stoga se tumačenje rezultata hitnih i rutinskih istraživanja ne može sastojati od jednostavne usporedbe s normalnim vrijednostima.

Planirane studije su sve studije zakazane dan ranije, a materijal za koje stiže u laboratorij od 7 do 9 sati. Vrijeme izvođenja je do 6 sati, u nekim slučajevima je potreban duži analitički postupak.

Laboratorijski pregled radnika obavlja se po uputu liječnika odgovornog za zdravstveni pregled radnika. U svim ostalim slučajevima pregled se plaća.

1.3 Uvjeti skladištenja i prijevoza materijala za klinička laboratorijska istraživanja

Kako bi se spriječile profesionalne infekcije, svaku biološku tekućinu treba smatrati potencijalno zaraznim materijalom, poštujući sva relevantna pravila za rukovanje njome tijekom transporta, skladištenja i obrade. Biomaterijali infektivnih pacijenata moraju imati posebnu oznaku i moraju se s njima rukovati iznimno oprezno. Svi biomaterijali pacijenata s HIV infekcijom moraju biti označeni u smjeru "šifra 120" uz obvezno navođenje broja povijesti bolesti.

Dobivena biološka tekućina mora se dostaviti u laboratorij što je prije moguće. Ako je potrebno odrediti glukozu i acidobazni status, krv treba odmah dostaviti u laboratorij.

U svim fazama transporta i obrade, krv treba držati u epruvetama, zatvorenim poklopcima, kako bi se spriječilo isparavanje i kontaminacija mikrobima i raznim vanjskim tvarima.

Prilikom isporuke, epruvete trebaju biti postavljene okomito, s poklopcima prema gore, što pomaže u očuvanju uzoraka i ubrzava stvaranje ugruška prilikom primanja seruma, smanjuje trešnje tijekom transporta i rizik od hemolize.

Epruvete ne smiju biti napunjene do vrha. Puna krv dobivena bez antikoagulansa ne smije se držati u hladnjaku prije dostave u laboratorij kako bi se izbjegla hemoliza.

Centrifugiranje se provodi najkasnije 1 sat nakon uzimanja biomaterijala.

1.4 Područje primjene

Ovim standardnim operativnim postupkom (u daljnjem tekstu: SOP) definiran je postupak zaprimanja, evidentiranja biološkog materijala koji ulazi u laboratorij iz prostorija za postupke (naziv ustanove) i drugih ustanova koje laboratorij opslužuje, te utvrđivanje nedosljednosti i njihovo otklanjanje.

Ovaj SOP namijenjen je laborantima i laborantima.

1.5 Organizacija procesa prijevoza biomaterijala kurirom i odgovornost dostavljača

Temperaturu u hladnjaku, koja je prikazana na displeju unutar automobila, dostavljač upisuje u dnevnik „Knjiga o temperaturnim uvjetima u auto hladnjačama“, au tom dnevniku dostavljač navodi svoje puno ime i prezime, registarsku oznaku vozila. te vrijeme polaska automobila po biomaterijal neposredno prije putovanja u ustanove.

Kurir po dolasku u zdravstvenu ustanovu odlazi u registraturu ove ustanove, gdje preuzima posude s raznim biomaterijalima. Svaki spremnik sadrži naziv ustanove i vrstu biomaterijala (krv, urin, feces, stakalca s razmazima, strugotine). Kurir postavlja spremnike vodoravno u hladnjak stroja, kao što je prikazano na fotografiji.

Kurir je odgovoran za cjelovitost spremnika, njihovu sigurnost, za osiguravanje odgovarajućih temperaturnih uvjeta u hladnjaku automobila (+4 - +8 o C), kao i za sigurnost biomaterijala koji se isporučuje iz ustanova u laboratorija. Tijekom putovanja kurir prati temperaturu u hladnjaku automobila koja se prikazuje na displeju ugrađenom u unutrašnjost automobila.

1.6 Prijem biomaterijala u laboratoriju

Temperaturu prikazanu na zaslonu u hladnjaku automobila u trenutku uklanjanja spremnika bilježi kurir u dnevniku "Knjiga o temperaturnim uvjetima u hladnjacima automobila" u stupcu koji odgovara državnom broju automobila. I također u istom dnevniku vozač označava vrijeme dolaska automobila s biomaterijalom iz institucija.

Kurir medicinskom laboratoriju predaje označene spremnike s uzorcima krvi, razmazima i strugotinama.

U ordinaciji laboratorijski asistent otvara poklopac spremnika i vadi epruvete s krvlju, stakalce s razmazima i strugotinama te mape s uputama za istraživanje.

Razvrstava epruvete za krv posebno u police, prema vrsti epruveta (biokemijske, hematološke i koagulološke) i nazivima ustanova koje su naznačene na policama.

1.7 Prijenos biomaterijala i upućivanje na relevantne odjele laboratorija

U ordinaciji, medicinski asistent laborant stavlja police s epruvetama za biokemijske, imunološke, koagulološke studije u spremnike s oznakom "za prijenos biomaterijala" i odvodi ih na centrifugiranje.

Bolničar-laborant poziva hematološki i PCR odjel kako bi bolničari-laboranti s nadležnih odjela uzeli biomaterijal.

Zatim prenosi preporuke za istraživanje operaterima registracije.

1.8 Registracija obrazaca za narudžbe od strane operatera

Postupak registracije:

- operater skenerom očitava crtični kod, zalijepljen na uputnici;

- zatim operater u LIS unosi podatke o putovnici pacijenta: ime i prezime, datum rođenja, adresu stanovanja i ostale podatke: izvor naloga (obvezno zdravstveno osiguranje, dobrovoljno zdravstveno osiguranje, gotovinsko plaćanje, klinički pregled), broj ustanove, odjela, ime i prezime liječnika koji je naručio pregled, dijagnoza, MES šifra (medicinski i ekonomski standard).

- nakon toga operater upisuje u LIS one pokazatelje koje je ordinirajući liječnik propisao i pohranjuje generirani nalog u LIS.

2. Praktični dio

Gradska klinička bolnica br. 40 otvorena je 1966. godine i trenutno predstavlja jedini multidisciplinarni medicinski kompleks u Nižnjem Novgorodu, koji uključuje: bolnicu, rodilište, kliniku za trudnice, kliniku za djecu i odrasle. To je glavna klinička baza Odsjeka za kirurgiju, središte za usavršavanje i profesionalnu prekvalifikaciju specijalista, Državna medicinska akademija u Nižnjem Novgorodu, koja od svog otvaranja djeluje na temelju bolnice. Funkcionalna značajka bolnice br. 40 je prijem pacijenata s gotovo bilo kojom patologijom u hitnim slučajevima 24 sata dnevno. Hitna pomoć dnevno doveze više od 100 pacijenata.

Bolnica i njezini strukturni odjeli stvorili su sve potrebne uvjete za pružanje pravovremene pomoći pacijentima i visokokvalitetno liječenje. Ovdje se pouzdano koriste i unapređuju tradicionalne metode, a aktivno se uvode najnovije medicinske tehnologije. Posvuda se koristi moderna dijagnostička oprema. U protekle dvije godine, u sklopu programa modernizacije zdravstva, bolnica je dobila 216 jedinica medicinske opreme, uključujući suvremenu endoskopsku, laboratorijsku i ultrazvučnu dijagnostičku opremu, čime je omogućeno izvođenje složenijih zahvata u hepatopankreatologiji, koloproktologiji i flebologija.

Vodeći stručnjaci aktivno sudjeluju na specijaliziranim seminarima, konferencijama i simpozijima na ruskoj i međunarodnoj razini. laboratorijski klinički biomaterijal

Gradska bolnica br. 40 je široka klinička baza u kojoj se u praksi primjenjuju suvremena znanstvena dostignuća i tehnike. Ovdje se dugo i plodonosno provodi zajednički rad s Odjelom za kirurgiju Centra za usavršavanje i profesionalnu prekvalifikaciju specijalista Nižnjenovgorodske državne medicinske akademije. Njegov organizator, profesor Igor Leonidovič Rotkov, postao je utemeljitelj kirurške škole, koju su pohađali gotovo svi kirurzi bolnice i danas nastavljaju razvijati svoje akumulirano iskustvo, uvodeći nova dostignuća i tehnike. Na temelju bolnice stvoren je gradski flebološki centar. Odjel za dječju kirurgiju već nekoliko desetljeća ima znanstveni odjel za dječju gastroenterologiju kao podružnicu Instituta za pedijatriju u Nižnjem Novgorodu. Na temelju rodilišta nalaze se odjeli za porodništvo i ginekologiju za usavršavanje liječnika i obuku studenata NSMA. Ovdje stručnjaci iz mnogih regija Rusije usavršavaju svoje vještine. Zajednički rad znanstvenika praktičara i bolničkih liječnika doprinosi razvoju njihovih vještina, a inovacije u različitim područjima medicine omogućuju nam postizanje jedinstvenih rezultata u liječenju pacijenata.

Na temelju rezultata rada Gradske kliničke bolnice br. 40 obranjeno je 9 doktorskih i 29 kandidatskih disertacija. Dobiveno je više od 70 autorskih potvrda i patenata za metode rada, dijagnostiku i uporabne modele koje su razvili bolnički stručnjaci.

Rad tima liječnika visoko je cijenjen dodjelom gradske nagrade Nižnji Novgorod u području medicine 2012. godine. Rad je posvećen jednom od najhitnijih i najsloženijih problema kirurgije - liječenju flebotromboze donjih ekstremiteta, tijekom posljednjeg petogodišnjeg razdoblja promatranja i pružanja hitne i planirane kirurške skrbi pacijentima s flebotrombozom u uvjetima gradski flebološki centar na temelju Državne proračunske zdravstvene ustanove "Gradska klinička bolnica br. 40".

Rodilište, koje je u sastavu bolnice, ima 205 kreveta i najveće je u regiji Nižnji Novgorod. Trenutno služi kao regionalni perinatalni centar, primajući 4500-5000 poroda godišnje. Sav rad koji provode opstetričari i ginekolozi usmjeren je na smanjenje broja slučajeva pobačaja i trudnoća nakon termina, postizanje prirodnog porođaja i poboljšanje stope preživljavanja novorođenčadi.

Od siječnja 2010. godine u okviru poliklinike za odrasle uspješno djeluje Dom zdravlja, priznat kao jedan od najboljih na regionalnoj razini. Svoje radno iskustvo voditelj Centra predstavio je na Sveruskom forumu - "Zdrava nacija je temelj prosperiteta Rusije".

Tijekom 2012. godine, u sklopu Poliklinike za odrasle, u svrhu povećanja dostupnosti medicinske skrbi u udaljenim područjima, organizirana je i uspješno djeluje ordinacija liječnika opće medicine.

Više od tisuću djelatnika ustanove, među kojima su liječnici, medicinske sestre, laboranti, bolničari, tehničko osoblje, svojim marljivim radom, brigom i toplinom stvaraju ozračje humanizma i milosrđa koje je svojstveno osoblju Državne proračunske ustanove. broj 40.

Tijekom pripravničkog staža savladan je cijeli proces zaprimanja i evidentiranja biomaterijala.

1. Prijem biomaterijala i obrazaca.

2. Studija biomaterijala

3. Zapisivanje dobivenih rezultata na obrazac

4. Zapisivanje rezultata u dnevnike ispitivanja

5. Zbrinjavanje biomaterijala

Zaključak

Glavni oblik kontrole organizacije prijema, označavanja i registracije biomaterijala je periodični vanjski i unutarnji pregled. Ali ovaj oblik kontrole ne može se smatrati učinkovitim. Problem kontrole ove faze laboratorijskih istraživanja i danas ostaje jedan od najozbiljnijih problema suvremene laboratorijske medicine.

Čini se da je najdjelotvorniji i najučinkovitiji korak stvaranje standardnih uvjeta za prikupljanje, transport i pohranjivanje bioloških uzoraka od pacijenta (korištenje vakuuma ili drugih sustava). Uvođenje ovakvih sustava u praksu ne utječe na sve faze laboratorijskih istraživanja i općenito podiže organizaciju laboratorijskog rada na drugu razinu. Njihova uporaba ne samo da olakšava organizaciju i značajno promiče standardizaciju predanalitičke faze, već stvara uvjete potrebne za implementaciju suvremenih laboratorijskih sustava. Ako su dostupni analizatori, oni se mogu koristiti kao primarne epruvete, što uvelike pojednostavljuje analitičku fazu laboratorijskog istraživanja.

Objavljeno na Allbest.ru

Slični dokumenti

Glavni ciljevi mikrobioloških istraživanja u kliničkoj laboratorijskoj dijagnostici. Oprema za bakteriološki laboratorij, visokoučinkovita automatizirana tehnologija za identifikaciju mikroorganizama, standardizacija mikrobiološke dijagnostike.

sažetak, dodan 09.10.2010


Putevi prijenosa sifilisa - spolno prenosiva zarazna bolest koja zahvaća kožu, sluznice, unutarnje organe, kosti i živčani sustav uz sekvencijalnu promjenu stadija bolesti. Ranjivost zubotehničkog laboratorija na infekcije.

prezentacija, dodano 27.04.2016


Obilježja djelatnosti kliničko-dijagnostičkog laboratorija u suvremenim uvjetima, procjena aktivnosti osoblja i tehnologija za povećanje njegove učinkovitosti. Opis rada medicinskog osoblja u laboratoriju, izrada preporuka za optimizaciju.

kolegij, dodan 28.06.2016


Ruski regulatorni dokumenti koji reguliraju proizvodnju lijekova. Ustroj, funkcije i glavni zadaci ispitnog laboratorija za kontrolu kvalitete lijekova. Zakonodavni akti Ruske Federacije o osiguravanju jedinstvenosti mjerenja.

priručnik za obuku, dodan 14.5.2013


Upoznavanje s materijalima koji se koriste za izradu suvremenih proteza. Studij sheme automatizirane organizacije rada koja omogućuje izradu proteza CAD\CAM tehnologijom. Prednosti automatizacije zubotehničkog laboratorija.

prezentacija, dodano 11.10.2015


Glavni element zubotehničkog laboratorija je radni stol zubotehničara. Dizajn ovog stola, njegova oprema i osvjetljenje. Parametri opreme koja se koristi u uredu. Najvažniji kriteriji o kojima ovisi učinak stroja za lijevanje.

prezentacija, dodano 14.03.2016


Pravna osnova za provođenje kliničkih ispitivanja potpuno novih i prethodno nekorištenih lijekova. Etička i pravna načela kliničkog istraživanja kako su formulirana u Helsinškoj deklaraciji Svjetskog udruženja liječnika.

prezentacija, dodano 25.03.2013


Faze rada mikrobiološkog laboratorija i vrijeme potrebno za svaku od njih. Normativni dokumenti. Opći uvjeti za uzimanje i dostavu uzoraka biološkog materijala za mikrobiološka istraživanja. Tumačenje rezultata ispitivanja.

prezentacija, dodano 26.04.2016


Opće odredbe Naredbe ministra zdravstva Republike Kazahstan "O odobrenju Uputa za provođenje kliničkih studija i (ili) ispitivanja farmakoloških i medicinskih proizvoda." Načela za etičku procjenu kliničkih istraživanja.

prezentacija, dodano 22.12.2014


Poznavanje glavnih znakova shizofrenije. Analiza psihičkog, somatskog i neurološkog statusa bolesnika. Razmatranje kliničkih metoda za proučavanje duševnih bolesti. Opće karakteristike laboratorijskih pretraga.