PCR을 위한 생물학적 물질 샘플 준비. PCR법을 이용한 연구용 생체물질의 수집방법

    임상 재료의 선택은 의료 인력이 일회용 장갑을 착용하고 멸균된 일회용 기구(주사기, 적절한 프로브, 사이토브러시 등)만을 사용하여 전염병 방지 체제의 규칙을 준수하여 수행됩니다.

    적절한 어플리케이터(프로브, 사이토브러시)를 사용하여 선택한 유전자좌에서 가능한 한 완벽하게 재료를 수집합니다(임상 샘플의 적절성 보장).

    PCR 실험실에서 제공하는 신뢰할 수 있는 수송배지와 보존제를 사용하여 얻은 물질(미생물의 DNA/RNA)을 보존합니다. 임상 물질의 운반 및 보관을 위한 배지는 실온에서 최대 28일 동안 RNA와 DNA의 안정성을 보장합니다.

    수집된 물질을 EDTA(혈액)가 들어 있는 진공관, 화학적으로 순수한 일회용 Eppendorf 튜브(도말, 뇌척수액, 생검 등)에 넣습니다. 물질을 수집할 때 주요 조건은 DNAase와ribonucleases가 샘플에 들어가는 것을 방지하는 것입니다. 리보뉴클레아제와 DNAase는 RNA와 DNA를 분해하는 효소입니다. 그들은 환경에서 매우 안정적이며 장시간 끓이는 것을 견딜 수 있습니다. 뉴클레아제의 주요 공급원은 피부와 먼지 입자입니다. 플라스틱 튜브와 팁에는 "DNase, RNase-free"라는 라벨이 붙어 있어야 합니다.

    수집 후 즉시 임상 물질이 담긴 튜브와 병을 내부 표면이나 캡 내부 표면에 닿지 않도록 단단히 닫으십시오.

    임상 재료로 작업할 때, 테스트 튜브, 바이알을 열 때 갑자기 움직이지 말고 튀거나 튀는 것을 피하십시오. 이로 인해 샘플과 작업 표면이 오염될 수 있습니다.

    상호 오염을 방지하려면 샘플을 별도의 비닐 봉지나 랙에 보관하고 운반하십시오. 샘플 이동이 필요한 경우 에어로졸 장벽이 있는 교체 가능한 일회용 팁이 있는 자동 마이크로피펫을 사용하십시오.

    PCR 실험실로 운송하기 전에 선택한 생체재료를 2~4°C의 온도에서 48시간 이내에 보관해야 합니다. 검체 채취부터 PCR 분석까지의 시간을 최소화하는 것이 필요합니다. 샘플 운송은 쿨러백, 보온 용기, 보온백이 포함된 보온병, 얼음 또는 드라이아이스에서 수행됩니다.

혈액, 혈장, 혈청

진공 시스템을 사용하여 혈액을 수집하는 것이 좋습니다. 이러한 시스템의 도입으로 혈액 조작을 표준화할 수 있게 되었고, 실험실 연구의 모든 단계에 긍정적인 영향을 미치며, 일반적으로 실험실 작업을 다른 더 높은 수준의 품질로 이동시킵니다. 이를 사용하면 감염으로부터 직원을 보호하고, 혈액 샘플링 절차에 소요되는 시간을 줄이고, 용혈을 동반할 가능성이 훨씬 적으며, 혈액 샘플을 무균 상태로 유지하고 밀봉하여 운송할 수 있습니다.

공복시 척골 정맥에서 항응고제가 들어있는 특수 진공관으로 정맥 천자를 한 후 튜브를 뒤집어 여러 번 혼합하는 것이 좋습니다. 혈액이 담긴 튜브는 +4 °C – +8 °C에서 냉장고에 보관됩니다. 혈액의 최대 유통기한은 1일입니다(동결하지 마세요!). 장기간 보관이 필요한 경우에는 혈청 또는 혈장 1ml를 채취하여 -16o-20oC의 온도에서 2주 이내로 보관해야 합니다.

PCR 진단에 사용되는 진공 시스템의 특성:

    EDTA가 포함된 진공 청소기(6%) - 정성적 및 정량적 연구에 사용됩니다. EDTA 항응고제는 세포 핵산을 잘 고정시킵니다.

    구연산나트륨(3.8%)이 포함된 진공 청소기 - 정성적 및 정량적 연구에 사용됩니다. 장기간 운송에는 적합하지 않습니다. 구연산염은 외국 미생물에 대한 좋은 영양 배지입니다.

    항응고제(혈청)가 포함되지 않은 진공 청소기 - 질적 연구에 사용됩니다. 정량적 연구를 위해 혈청을 사용하는 것은 바람직하지 않습니다. 감염원의 일부가 혈전에 정착하여 혈액 내 정량적 함량을 결정할 가능성이 감소합니다.

    헤파린이 함유된 진공청소기는 PCR 반응에 절대 적합하지 않습니다. 헤파린은 DNA와 같은 다가음이온이므로 PCR 반응에서 DNA와 경쟁합니다.



혈액검사를 위한 최적의 시간은 채혈 후 1~4시간이며, 5~30분 정도에는 혈소판이 일시적으로 항응고제에 적응하여 응집이 일어나 혈액 내 잘못된 감소를 초래할 수 있습니다. 견본.

채혈 후 8시간 이후에는 혈액을 검사하는 것이 바람직하지 않습니다. 일부 세포 특성은 변합니다. 즉, 백혈구의 양이 감소하고 적혈구의 양이 증가하여 궁극적으로 잘못된 측정 결과와 결과의 잘못된 해석으로 이어집니다. 혈액을 보관하는 24시간 동안 헤모글로빈 농도와 혈소판 수치만 안정적으로 유지됩니다.

혈액은 얼려서는 안 됩니다. K 2 EDTA가 함유된 모세혈은 실온에 보관해야 하며 수집 후 4시간 이내에 분석해야 합니다.

고품질의 연구 결과를 보장하기 위해서는 분석을 수행하기 전에 시료의 보관 기간과 보관 조건을 명확하게 제어하는 ​​것이 필요합니다.

지연된 분석이 필요한 경우(장거리 운송, 기기의 기술적 오작동 등) 혈액샘플을 냉장고(4o~8oC)에 보관하고 24시간 이내에 검사합니다. 그러나 세포 부종 및 부피와 관련된 매개변수의 변화가 발생한다는 점을 고려해야 합니다. 실질적으로 건강한 사람들의 경우 이러한 변화는 중요하지 않으며 정량적 매개변수에 영향을 미치지 않지만 병리학적 세포가 있는 경우 후자는 혈액을 채취한 후 몇 시간 이내에 변경되거나 심지어 파괴될 수 있습니다.

검사 직전에 항응고제를 희석하고 형성된 성분을 혈장에 균일하게 분포시키기 위해 혈액을 몇 분 동안 완전히 혼합해야 합니다. 검사할 때까지 샘플을 장기간 지속적으로 혼합하는 것은 병리학적 세포의 손상 및 부패 가능성으로 인해 권장되지 않습니다.

자동 분석기의 혈액 검사는 실온에서 수행됩니다. 냉장고에 보관된 혈액은 먼저 실온으로 데워야 합니다. 낮은 온도에서는 혈액의 점도가 증가하고 형성된 성분이 서로 달라붙는 경향이 있어 혼합이 손상되고 불완전하게 용해되기 때문입니다. 냉혈 검사는 백혈구 히스토그램의 압축으로 인해 "경보 신호"를 유발할 수 있습니다.

채혈 장소로부터 상당한 거리를 두고 혈액학 연구를 수행할 때, 불리한 운송 조건과 관련된 문제가 필연적으로 발생합니다. 기계적 요인(흔들기, 진동, 교반 등), 온도 조건, 유출 가능성, 시료 오염 등이 분석 품질에 영향을 미칠 수 있습니다. 이러한 원인을 제거하기 위해 혈액 튜브를 운반할 때 밀봉된 플라스틱 튜브와 특수 절연 운반 용기를 사용하는 것이 좋습니다. 운송 중에는 생물학적 안전 규정에 따라 시료(천연 물질 포함)와 의뢰서의 접촉이 허용되지 않습니다.

^ 4.3. 생물학적 물질의 접수 및 등록

정맥혈 샘플이 담긴 튜브는 생물학적 물질 전달을 위해 특수 백에 담긴 랙에 수집 당일 실험실로 전달됩니다. 이 경우 튜브는 수직 위치에 있어야 하며 먼 거리로 운송할 때는 특수 용기에 넣어야 합니다.

재료를 받는 실험실 직원은 다음을 확인해야 합니다.

추천 등록의 정확성: 추천 양식에는 피험자의 데이터(성, 이름 및 부칭, 연령, 병력 또는 외래 환자 카드 번호, 부서, 진단, 수행된 치료)가 표시됩니다.

혈액 샘플이 포함된 튜브 라벨링(연구용 자료 전송 양식의 코드 및 성과 동일한 환자의 코드 또는 성이 표시되어야 함). 실험실 조교는 전달된 재료를 등록하고 튜브 수를 기록해야 합니다.

^ 4.4 혈액학 분석기에서 혈액의 세포 구성 계산

혈액학 분석기에서 혈액의 세포 구성을 계산하는 작업은 해당 장치의 지침을 엄격히 준수하여 수행해야 합니다.

혈액학 분석기를 사용할 때 다음을 수행해야 합니다.

혈액학적 연구를 위한 특정 소금 및 일회용 튜브(단순 또는 진공)에 권장되는 비율로 K-2 EDTA로 안정화된 혈액을 사용하십시오.

분석하기 전에 시험관을 혈액과 조심스럽지만 철저하게 혼합하십시오(이 목적을 위해 혈액 샘플 혼합 장치인 로토믹스를 사용하는 것이 좋습니다).

정해진 절차에 따라 등록된 시약을 사용합니다. 시약을 다른 제조업체의 제품으로 변경할 경우 장치의 보정을 확인하고 설정해야 합니다.

장치를 시작하고 세척의 모든 단계를 관찰하고 모든 채널에서 표시기의 0(배경) 값을 달성합니다.

가능한 체계적 오류에 대한 장치 메시지에 주의하십시오. MSHC가 정상 값보다 증가하는 것은 일반적으로 측정 오류의 결과라는 점을 기억하십시오.

오류가 감지되면 원인을 제거하고 결함이 있는 장치에서는 작업을 수행하지 마십시오.

적절한 프로그램에 따라 품질 관리 절차를 수행합니다. 얻은 결과에 대한 평가와 함께;

얻은 결과를 환자 샘플의 임상적 특성과 비교하여 의미 있게 작업합니다.

측정을 완료한 후 분석기를 철저히 헹구십시오.

장기간 장치를 정지하는 경우 모든 보존 절차를 반드시 수행하십시오(가능한 경우 서비스 엔지니어와 함께).

기술적인 문제가 발생하면 기술 유지 관리 라이센스를 보유한 회사의 서비스 엔지니어의 도움을 받아야 합니다. 훈련받지 않은 직원에게 작업을 맡기지 마십시오.

혈액학 분석기 작업을 시작할 때 분석된 매개변수 측정의 선형성 한계를 고려해야 합니다. 측정 선형성 한계를 초과하는 분석된 매개변수 값으로 샘플을 평가하면 잘못된 결과가 발생할 수 있습니다. 대부분의 경우, 과다세포증이 있는 샘플을 분석할 때 분석기는 측정된 매개변수의 값 대신 "D"(희석) 아이콘을 표시합니다. 이는 샘플을 희석하고 측정을 반복해야 함을 나타냅니다. 가장 가까운 두 개의 희석으로 유사한 최종 결과를 얻을 때까지 희석을 수행해야 합니다.

^ 예 ─ 세 가지 다른 혈액학적 분석기를 사용하여 고백혈구증가증 환자의 샘플을 분석한 내용이 표에 나와 있습니다.

표 3

¦3개의 서로 다른 혈액분석기로 수행한 고백혈구증가증의 양을 계산한 결과


^ 혈액학 분석기

샘플 희석 정도

총 가치

^ 전혈

1:1

1:3

1:4

WBC

1



274,5

274,5

143,1

715,5

2

322,6

253,2

177,7

141,8

709,0

3





168,3

139,1

695,5

표에 따르면 전혈을 분석할 때 한 분석기(2차)만이 백혈구 수에 대한 디지털 값을 제공했고 나머지 두 분석기는 샘플을 희석해야 함을 나타냈습니다. 이후 3가지 희석으로 샘플을 단계별로 측정함으로써 1:3 및 1:4 희석만으로 모든 기기에서 유사한 최종 결과를 얻을 수 있었습니다. 따라서, 최종 백혈구 수치는 700.0 - 710.0 x 10 9 /l로 2차 분석기에서는 전혈에서 초기에 얻은 값보다 2배 이상 높았고, 1차와 2차 분석기에서는 1:1 희석으로 1.5 - 로 나타났습니다. .

  1. ^ 혈액학 분석기의 교정
교정은 분석기를 설정하는 절차를 말하며, 그 결과

이는 오류의 체계적 구성요소가 0(제로 오프셋)과 동일함을 달성하거나 교정 오류를 고려하여 오프셋이 0과 같음을 확인합니다. 혈액학 분석기의 교정은 두 가지 주요 방법으로 수행할 수 있습니다.

전혈의 경우;

인증된 값으로 안정화된 혈액 샘플을 기반으로 합니다.

^ 5.1 전혈을 사용한 보정

전혈 교정은 교정이 검증된 참조 분석기와 비교하여 수행할 수 있으며 참조로 사용할 수 있습니다.

기준 분석기와 비교하여 보정하려면 기준 분석기가 있는 실험실의 일일 연구 프로그램에서 무작위로 선택된 20명의 환자 정맥혈 샘플을 사용합니다. 항응고제 K 2 EDTA가 들어 있는 진공관에 혈액을 수집해야 합니다. 기준 분석기로 분석한 후, 혈액 튜브는 보정된 장치에서 분석하기 위해 실험실로 전달됩니다. 기준 분석기와 교정 분석기의 측정 사이의 시간은 4시간을 초과해서는 안 됩니다. 교정 중인 기기의 교정 샘플 분석은 환자 샘플 분석과 동일한 방식으로 수행되어야 합니다. 얻은 결과는 부록 1에 제공된 형식으로 표에 입력됩니다. 이 결과는 그래프의 좌표 원점을 통과하는 교정 선의 기울기 계수와 수치적으로 동일한 해당 교정 계수를 결정하는 데 사용됩니다.

교정 계수는 모든 버전의 Microsoft OFFICE 패키지에 포함된 EXCEL 프로그램을 사용하여 컴퓨터에서 계산됩니다. 이 프로그램에서는 교정 계수를 계산하기 위해 측정값을 X축에 표시하고 기준 값을 Y축에 표시하며 좌표 원점을 통해 회귀선을 설정하는 분산형 다이어그램을 구성합니다. 프로그램은 교정 선을 그리고 원하는 교정 계수인 기울기를 결정합니다. 총 오류가 감지되면(그래프의 교정 선에서 크게 제거된 점이) 계산에서 제거되어야 합니다(EXCEL 테이블의 전체 선 삭제). 결과 교정 계수는 부록 1의 표에 입력되며 작동 지침에 따라 장치 교정을 수동으로 조정하는 데 사용됩니다.


    1. ^ 인증된 값으로 안정화된 혈액 샘플을 사용한 교정
이 교정 방법은 안정화된 인간 적혈구와 백혈구 및 혈소판을 모방하는 고정 인간 또는 동물 세포의 인공 혼합물인 상업용 교정 및 제어 물질을 기반으로 합니다. 천연 혈액과 이들 물질 구성 요소의 생물학적 특성이 크게 다르기 때문에 인증된 혈액학적 매개변수 값은 특정 유형의 분석기에 따라 다릅니다.

가능하다면 특정 유형의 분석기를 교정하기 위해 제조업체가 특별히 설계한 교정기를 사용해야 합니다. 최신 혈액학 교정기의 설정점 오류는 일반적으로 의료 요구 사항과 일치합니다. 그러나 이러한 교정기는 모든 유형의 분석기에 사용할 수 없습니다. 또한 유통기한이 제한되어(보통 45일 이내) 유통기한이 지나지 않은 샘플을 얻는 것이 항상 가능한 것은 아닙니다.

제어 물질은 교정 목적으로 제조업체에서 의도한 것이 아닙니다. 값의 허용 오차는 훨씬 더 넓고 인증 및 생산 제어 방법은 교정기만큼 엄격하지 않습니다. 교정 시 제어 재료는 장치의 도량형 특성에 대한 정보의 한 소스로만 사용할 수 있습니다.

그러나 교정 목적으로 대조 물질과 교정물질을 모두 사용하는 경우 시료 준비 및 분석기 작동 기능이 체계적 오류 구성요소에 상당한 영향을 미친다는 점을 명심해야 합니다. 상업용 재료로 교정할 때는 이러한 영향 요인을 고려할 수 없습니다. 따라서 모든 경우에 수행된 보정은 환자 샘플에서 얻은 결과(적혈구 지수, 정상 범위)의 통계를 분석하여 검증해야 합니다.

5.2.1 혈액학 분석기의 교정 빈도

교정 빈도에 대한 요구 사항은 일반적으로 분석기의 작동 지침에 포함되어 있습니다. 일반적으로 수리 후 또는 내부 실험실 품질 관리 절차에서 상당한 드리프트가 감지된 경우 교정이 필요합니다.

5.2.2 교정 절차

교정 절차는 분석기의 작동 지침에 따라 수행됩니다.

5.2.3 교정 결과 모니터링

이 제어는 교정 직후 교정 샘플을 분석하는 것으로 구성됩니다. 분석기의 분석 변화를 고려하여 분석 결과가 교정 값과 일치하면 완료된 교정이 허용됩니다.

5.2.4 적혈구 지수를 이용한 보정 검증

교정을 확인하고 개선하는 이 방법은 환자 간 적혈구 지수(MCHC, MCH 및 MCV)의 평균값의 변동이 매우 작기 때문에 교정 제어 및 추가 품질 관리에 효과적으로 사용될 수 있다는 사실을 활용합니다. 평균화를 위해 권장되는 샘플 수는 20개입니다. 평균 MCHC를 결정하는 데는 모든 환자 샘플을 사용할 수 있지만, 평균 MCHC 및 MCV를 결정하려면 빈혈 환자를 제외해야 합니다.

많은 최신 혈액학 분석기에는 현재 평균을 계산하는 프로그램이 내장되어 있어 데이터 처리가 매우 용이합니다.

성별에 상관없이 18~60세 환자 20개 이상의 표본을 평균했을 때 적혈구 지수의 목표값은 표 4와 같다.

표 4

적혈구 지수의 목표 값

얻은 평균값이 제어 허용 오차를 벗어나면 MCV, Hgb 또는 RBC 교정을 조정해야 함을 의미합니다.

상업용 보정/대조 물질을 사용할 때 적혈구 매개변수의 불만족스러운 보정 이유를 판단할 때, 해당 물질의 인증된 값에 대한 신뢰성에 대한 다음 평가를 고려해야 합니다.

가장 정확하고 시간이 안정적인 매개변수는 적혈구 농도입니다.

안정적인 매개변수는 Hgb이지만 사용되는 시약(예: 시아노겐 또는 시아노겐 없음)에 따라 달라질 수 있습니다.

가장 불안정한 매개 변수는 MCV입니다. MCV 값은 재료의 전체 유효 기간 동안 상당히 넓은 범위의 값으로 변경되는 경향이 있습니다. MCV 보정을 개선할 때 평균 적혈구 지수 분석을 통해 얻은 데이터는 안정화된 혈액 샘플의 인증된 값보다 우선합니다.

RBC 보정이 정확하다고 가정하면 표 5는 평균 지수 값이 제어 허용 오차를 벗어나는 가능한 이유를 보여줍니다.

표 5

적혈구 지수의 평균값을 초과하는 이유


적혈구 지수

평균 지수 값

평균 지수 값

평균 지수 값

평균 지수 값

MCHC

국경 아래

국경 위

국경 위

국경 아래

MCH

허용한계 이내

허용한계 이내

국경 위

국경 아래

MCV

국경 위

국경 아래

허용한계 이내

허용한계 이내

원인

MCV가 너무 높음

MCV 감소

Hgb가 너무 높네요

Hgb가 낮습니다
분석을 위해 특정 위치(질, 요도, 자궁 경관 등)를 검사해야 하는지에 대한 결정은 환자의 불만 사항 전체와 질병의 임상상을 바탕으로 담당 의사가 내립니다.객관적인 결과를 얻기 위해 , 연구되는 임상 물질에는 가능한 많은 상피 세포 수와 최소한의 점액 및 혈액 불순물이 포함되어 있어야 합니다(혈액 및 점액 형태의 불순물이 중간 정도 존재하는 것은 허용됨). 생체 물질을 잘못 수집하면 신뢰할 수 있는 결과를 얻을 수 없으며 결과적으로 반복적인 수집이 필요할 수 있습니다.생체재료.

수송 매체가 있는 시험관에 임상 물질을 수집하는 절차:

1. 시험관 뚜껑을 엽니다.

2. 일회용 멸균 프로브를 사용하여 적절한 방전량을 얻습니다.

비오톱(질, 요도, 자궁 경관).

3. 임상 물질이 담긴 프로브를 1.5ml 용량의 운반 매체가 포함된 시험관으로 옮기고, 프로브가 시험관 바닥에 닿을 때 프로브의 얇은 부분을 추가 힘으로 구부려 노치까지 만든 다음 부러뜨립니다. 여러 비오톱에서 임상 재료를 확보해야 하는 경우 매번 새 프로브가 포함된 임상 재료를 새 튜브에 가져가는 절차를 반복합니다.

3. 시험관을 뚜껑으로 단단히 닫고 라벨을 붙인다.

자궁 경관에서 임상 물질을 채취하는 특징:

1. 요도 탐침이나 자궁경부 사이토브러시를 이용하여 부인과 검경을 질에 삽입한 후 자궁경관의 임상물질을 채취합니다. (HPV 검사에는 충분한 수의 상피세포가 필요합니다!)

2. 임상물질을 채취하기 전, 멸균 거즈 면봉을 이용하여 자궁경관 입구를 조심스럽게 닦아낸 후, 멸균 식염수로 자궁경부를 처리하는 것이 필요합니다.

3. 요도관을 자궁경관 안으로 1.5cm 정도 삽입한 후 여러 번(시계 방향으로 2~3바퀴) 회전시켜 빼냅니다. 프로브를 제거할 때 프로브가 질벽에 닿지 않도록 완전히 방지해야 합니다.

4. 얻은 임상 물질을 수송 매체가 포함된 시험관에 넣습니다(위 참조).

질에서 임상 물질을 채취하는 특징:

검사 당일 여성은 성기 용변이나 질 세척을 해서는 안 됩니다.

1. 질의 임상 물질은 질 또는 요도 탐침을 사용하여 상피 표면에서 긁어내어 후방 또는 측면 개구에서 얻습니다.

2. 수동 검사를 수행하기 전에 임상 자료를 확보해야 합니다.

3. 조작하기 전에 부인과 검경을 따뜻한 물로 적실 수 있으며 검경 치료를 위해 방부제를 사용하는 것은 금기입니다.

4. 여아(처녀자리)에서는 부인과 검경을 사용하지 않고 질전정 점막에서 임상 물질을 채취합니다.

5. 얻은 임상 물질을 수송 매체가 포함된 시험관에 넣습니다(위 참조).

여성의 요도에서 임상 물질을 채취하는 특징:

1. 요도 프로브를 사용하여 요도에서 임상 물질을 채취합니다.

2. 임상물질을 복용하기 전 환자는 1.5~2시간 동안 소변을 보지 않는 것이 좋습니다.

3. 요도 분비물이 있는 경우 면봉으로 외부 요도 입구를 닦아야 합니다.

4. 분비물이 나오지 않는 경우 가벼운 요도 마사지를 시행할 수 있습니다.

5. 기구를 요도에 1cm 깊이까지 삽입한 후 요도의 뒤쪽과 측벽을 가볍게 눌러 외부 개구부로 전진시켜야 합니다(회전 운동은 고통스럽습니다).

6. 얻은 임상 물질을 수송 매체가 포함된 시험관에 넣습니다(위 참조).

여러 비오톱에서 얻은 물질을 연구하기 위해 매번 새로운 멸균 프로브와 새로운 시험관을 사용하여 절차를 반복합니다!!!

하나의 튜브에 자궁 경관, 질 내용물 및 요도의 물질을 혼합하는 것은 용납되지 않습니다!

남성의 요도에서 임상 물질을 채취하는 특징:

1.5~2시간. 생체 적합 물질을 복용하기 전 3일 동안 비뇨생식기에 일시적인 미생물이 존재하여 남성의 비뇨생식기 미생물총 구성을 결정한 결과의 왜곡을 배제하려면 성적 금욕 또는 보호된 성적 접촉을 사용하는 것이 좋습니다.

1. 요도를 긁기 전에 멸균 식염수를 적신 면봉으로 요도 외부 개구부 부위의 음경 머리를 치료하십시오.

2. 요도를 마사지합니다. 요도에서 분비물이 자유롭게 흘러나오는 경우 마른 면봉으로 제거하십시오.

3. 탐침을 요도에 1~2cm 깊이로 삽입한 후 여러 번의 회전 운동을 통해 상피 세포를 긁어낸 다음 탐침을 수송 매체가 담긴 시험관에 옮겨서 잘라냅니다. 배출물은 충분한 양으로 수집됩니다. 점액, 혈액, 고름 형태의 불순물이 어느 정도 존재하는 것은 허용됩니다.

임상자료 복용 와 함께귀두 포피(GPP):

생체재료를 복용하기 전에 환자는 소변을 보지 않는 것이 좋습니다.

1.5~2시간.

1. 일회용 탐침을 이용하여 해당 비오톱(귀두 포피, 포피낭)의 상피세포를 긁어낸 후 탐침을 수송배지가 담긴 시험관에 옮겨 떼어낸 후 방치합니다.

생체재료의 보관 및 운송 조건:

1. 채취한 임상물질이 담긴 튜브에는 라벨을 붙여야 한다.

2. 첨부된 의뢰 문서에는 환자의 성명, 연령, 임상 자료, 제안된 진단, 검사 적응증, 검체 수집 날짜 및 시간, 임상 자료를 보내는 기관(단위) 이름이 명시되어야 합니다.

3. 임상 물질 수집부터 실험실로 전달되는 순간까지의 운송 시간이 24시간을 초과하지 않는 경우, 임상 물질이 담긴 시험관은 1℃의 온도에서 보관 및 실험실로 전달되어야 합니다. 가정용 냉장고 (+ 4 + 10 ° C), 얼지 않음.

4. 임상검체를 24시간 이내에 검사실로 전달할 수 없는 경우, 임상검체를 1회 냉동하여 -20°C에서 최대 1개월까지 보관하는 것은 허용됩니다.

지식 기반에서 좋은 작업을 보내는 것은 간단합니다. 아래 양식을 사용하세요

연구와 업무에 지식 기반을 활용하는 학생, 대학원생, 젊은 과학자들은 여러분에게 매우 감사할 것입니다.

게시 날짜 http://www.allbest.ru/

"니즈니 노브고로드 의과대학"

(GBOU SPO 번호 "NMK")

시험

주제: “생체재료의 접수, 라벨링 및 등록 조직”

완전한:

그룹 221-IV 연구실의 학생입니다.

스테파니체프 M.N.

선생님:

벨로바 M.N.

N. 노브고로드 2016

소개

1. 이론적인 부분

1.1 길찾기 등록

1.2 실험실 연구 모드

1.3 임상 실험실 연구용 물질의 보관 및 운송 조건

1.4 적용 범위

1.5 택배로 생체물질을 운송하는 과정의 구성과 택배의 책임

1.6 실험실에서의 생체재료 수용

1.7 생체재료 이송 및 연구실 관련 부서로 의뢰

1.8 운영자의 주문 양식 등록

2. 실무적인 부분

결론

소개

실험실 테스트는 환자의 상태를 나타내는 가장 민감한 지표입니다. 임상 검사실 진단 전문가들은 많은 요인이 검사실 검사 결과에 영향을 미칠 수 있다는 사실을 오랫동안 인식해 왔습니다. 이러한 요소 중에는 올바르게 전달되고 적절하게 설계된 생체 재료 샘플과 그에 수반되는 문서가 있습니다. 그러한 뒷받침 정보(실험실 테스트에 영향을 미치는 요인)가 없으면 임상의는 결과를 잘못 해석하여 환자에게 잘못된 조치를 취할 수 있습니다.

이 테스트의 목적은 생물학적 물질의 문서 접수 및 처리에 대한 규칙을 개정해야 할 필요성에 대한 주의를 환기시키는 것입니다. 정보의 올바른 적용은 불필요한 연구를 줄이고, 비용을 절감하며, 연구 결과에 대한 더 나은 이해로 이어져야 합니다.

표적:

생체재료의 접수, 라벨링, 등록 조직을 연구합니다.

작업:

1. 생체재료의 이용에 관한 연구.

2. 문서 준비.

1. 이론적인 부분

현재 실험실 연구 방법은 질병의 진단과 치료에 핵심적인 역할을 하고 있습니다. 환자를 검사할 때 실험실 진단의 조직적 측면, 실험실 테스트의 정확성과 정확성 보장, 안정적이고 기술적으로 신뢰할 수 있는 분석 방법의 사용 및 연구 품질 관리가 매우 중요합니다.

의료 기관에서는 상당히 광범위한 실험실 방법을 사용하며, 표준화된 일상 기술과 함께 매우 구체적이고 유익한 현대 연구 방법도 사용됩니다.

질병을 진단하기 위한 매우 구체적인 실험실 방법을 의료 실무에 도입하려면 진단 과정의 모든 단계에서 표준화가 필요합니다.

전체 실험실 오류 수 중 분석 전 단계의 오류 비율은 50%~95%입니다. 실험실 연구의 분석 전 단계에서 발생하는 오류는 실험실 연구의 전체 추가 과정을 평가 절하하고 상당한 자금 손실을 초래하며 얻은 결과의 신뢰성이 낮기 때문에 주치의의 눈에 실험실 방법을 불신하게 만듭니다.

모든 유형의 실험실 연구에서 사전 분석 단계는 실제 실험실 분석 이전에 다음과 같이 구성된 일련의 프로세스를 결합합니다.

· 과목의 철저한 준비;

· 생체물질(혈액, 소변 등) 획득;

· 생체재료를 실험실로 운반합니다.

· 실험실에서 생체재료의 일차 처리;

· 실험실에서 생체재료의 유통 및 보관.

분석 전 과정의 이러한 단계의 주요 임무는 연구용으로 사용되는 생체 재료 구성 요소의 안정성(안전성)을 보장하고 품질을 변화시키는 다양한 요인의 영향을 최소화하는 것입니다.

이와 관련하여 분석 전 단계가 고려됩니다.

1.1 길찾기 등록

자료를 가져갈 때 지시사항을 정확하게 작성해야 합니다. 시험관과 함께 제공되는 문서 및 라벨을 혼동해서는 안 됩니다. 구획과 일련번호는 튜브에 표시되어 있습니다. 그룹 및 Rh 소속을 확인하기 위해 혈액이 담긴 시험관에 환자의 성을 추가로 표시합니다.

생체 물질을 채취할 때 분석 방향에서 다음 사항을 표시해야 합니다. (1차 의료 문서 양식에 대한 2007년 9월 28일자 벨로루시 공화국 보건부의 명령 No. 787을 고려한 모든 데이터)

· 환자 데이터 - 성, 이름, 부칭, 생년월일, 성별, 주소, 병력 번호, 진단.

· 분석을 위해 생체물질을 보낸 의사의 이름;

생체재료를 채취한 날짜와 시간

· 전송되는 생체재료에 대한 간략한 설명을 제공합니다(생체재료의 유형 표시), 신고된 생체재료와 일치하지 않는 물질은 검사되지 않습니다(예: 가래 대신 타액, 혈장 대신 혈청).

· 생체재료 수집의 특징(수집 장소 - 혈액, 소변 - 부피, 분량, 수집 시간);

· 단지 "생화학적 혈액 검사"가 아닌 필요한 모든 검사.

분석 의뢰서에는 의사가 서명합니다.

테스트 중복을 피하세요.

1.2 실험실 연구 모드

모든 혈액은 실험실에서 채취한 화학적으로 깨끗한 튜브인 원심분리기로만 공급되어야 합니다. 긴급 분석 모드에서 연구용 혈액은 별도로 전달되어야 하며, 예고 없이 예정된 검사와 함께 테이블 위에 놓지 마십시오. 긴급 테스트를 전달한 부서 직원은 해당 테스트가 실험실 직원에 의해 승인되었는지 확인해야 합니다.

응급검사는 2시간 이내에 실시하며, 응급조치가 필요한 경우 심각한 상태의 환자에 한해 시행됩니다. 긴급 분석을 위해 별도의 실험실 조교와 실험실 진단 의사가 배정됩니다. 긴급 분석 모드로 연구를 수행하려면 더 많은 시약 소비와 전문가 작업 시간이 필요하므로 결과적으로 재정적 비용도 더 커집니다.

현재 긴급분석실에서는 다음과 같은 혈액검사를 긴급하게 실시하고 있습니다.

헤모글로빈 농도 측정

적혈구용적률 계산

· 적혈구 수 계산

· 백혈구수

· 백혈구수

혈소판 수

대기 중 분석은 새로 입원한 환자 또는 환자의 상태가 악화되어 응급 개입이 필요하지 않은 경우 근무일 중에 수행됩니다.

참고: 일반 실험실 값은 공복 샘플을 나타냅니다. 따라서 응급 및 일상 연구 결과의 해석은 일반적인 값과의 단순한 비교로 구성될 수 없습니다.

계획된 연구는 전날 예정된 모든 연구이며, 오전 7시부터 9시까지 연구실에 도착하는 자료입니다. 실행 시간은 최대 6시간이며 경우에 따라 더 긴 분석 절차가 필요합니다.

직원의 실험실 검사는 직원의 건강 검진을 담당하는 의사의 지시에 따라 수행됩니다. 다른 모든 경우에는 검사가 유료로 제공됩니다.

1.3 임상 실험실 연구용 물질의 보관 및 운송 조건

직업적 감염을 예방하기 위해 모든 생물학적 체액은 잠재적인 감염성 물질로 간주되어야 하며 운송, 보관 및 처리 중 처리에 대한 모든 관련 규칙을 준수해야 합니다. 감염성 환자의 생체재료에는 특별한 표시가 있어야 하며 극도의 주의를 기울여 취급해야 합니다. HIV 감염 환자의 모든 생체 재료에는 병력 번호를 의무적으로 표시하는 "코드 120" 방향으로 표시해야 합니다.

생성된 생물학적 체액은 가능한 한 빨리 실험실로 전달되어야 합니다. 포도당과 산염기 상태를 확인해야 하는 경우 혈액을 즉시 실험실로 전달해야 합니다.

운송 및 가공의 모든 단계에서 혈액은 미생물 및 각종 외부 물질에 의한 증발 및 오염을 방지하기 위해 뚜껑을 닫은 채 튜브에 보관해야 합니다.

배송 시 튜브는 뚜껑을 위로 향하게 하여 수직으로 위치해야 합니다. 이렇게 하면 샘플을 보존하고 혈청을 받을 때 혈전 형성을 촉진하고 운송 중 흔들림과 용혈 위험을 줄이는 데 도움이 됩니다.

시험관을 가득 채워서는 안 됩니다. 항응고제 없이 채취한 전혈은 용혈을 방지하기 위해 검사실로 전달하기 전에 냉장 보관해서는 안 됩니다.

원심분리는 생체재료를 채취한 후 1시간 이내에 수행됩니다.

1.4 적용 범위

본 표준운영절차(이하 SOP)는 (기관명) 및 해당 연구실이 소속된 기타 기관의 절차실에서 연구실로 들어오는 생물학적 시료를 접수, 등록하는 절차와 불일치 사항을 식별하고 이를 제거하는 절차를 정의합니다.

이 SOP는 실험실 조교 및 실험실 운영자를 위한 것입니다.

1.5 택배로 생체물질을 운송하는 과정의 구성과 택배의 책임

자동차 내부 디스플레이에 표시되는 냉장고의 온도는 택배사가 "자동차 냉장고 온도 조건 일지" 저널에 기록하며, 이 일지에 택배사는 자신의 성명, 자동차 등록 번호판을 표시합니다. 기관으로 이동하기 직전 생체재료 차량의 출발 시간.

의료 시설에 도착한 택배사는 이 기관의 등록소로 가서 다양한 생체 재료가 담긴 용기를 가져옵니다. 각 용기에는 기관 이름과 생체 재료 유형(혈액, 소변, 대변, 얼룩이 있는 슬라이드, 긁힌 자국)이 포함되어 있습니다. 택배기사는 사진과 같이 기계의 냉장고에 용기를 수평으로 배치합니다.

택배사는 용기의 무결성, 안전성, 자동차 냉장고의 적절한 온도 조건(+4 - +8 o C) 보장 및 기관에서 의료 기관으로 전달되는 생체 재료의 안전에 대한 책임이 있습니다. 실혐실. 이동 중에 택배기사는 차량 내부에 설치된 디스플레이에 표시되는 차량 냉장고의 온도를 모니터링합니다.

1.6 실험실에서의 생체재료 수용

컨테이너를 제거할 때 자동차 냉장고 디스플레이에 표시된 온도는 자동차의 상태 번호에 해당하는 열에 있는 "자동차 냉장고의 온도 조건 일지" 저널에 택배사에 의해 기록됩니다. 또한 동일한 로그에서 운전자는 기관의 생체 물질을 사용하여 자동차 도착 시간을 표시합니다.

택배는 혈액 샘플, 도말 및 긁힌 부분이 담긴 라벨이 붙은 용기를 의료 실험실 조교에게 넘깁니다.

사무실에서는 의료 실험실 조교가 용기 뚜껑을 열고 혈액이 담긴 튜브, 얼룩과 긁힌 자국이 있는 슬라이드, 연구 지침이 담긴 폴더를 제거합니다.

튜브 유형(생화학, 혈액학 및 응고학)과 랙에 표시된 기관 이름에 따라 혈액 튜브를 랙으로 별도로 분류합니다.

1.7 생체재료 이송 및 연구실 관련 부서로 의뢰

사무실에서는 의료 보조 실험실 보조원이 생화학, 면역학, 응고학 연구를 위한 시험관이 담긴 랙을 "생체 물질 이동용"이라고 표시된 용기에 넣고 원심분리를 위해 가져갑니다.

구급대원-실험실 직원은 혈액학 및 PCR 부서에 전화하여 관련 부서의 구급대원-실험실 보조원이 생체재료를 채취하도록 합니다.

다음으로 그는 연구 추천을 등록 운영자에게 전달합니다.

1.8 운영자의 주문 양식 등록

등록 절차:

- 운영자는 지시 양식에 붙여진 스캐너로 바코드를 읽습니다.

- 그런 다음 운영자는 환자의 여권 데이터를 LIS에 입력합니다: 성명, 생년월일, 거주지 주소 및 기타 데이터: 주문 출처(의무 의료 보험, 임의 건강 보험, 현금 지불, 임상 검사), 기관 번호, 부서, 검사, 진단, MES 코드(의료 및 경제 표준)를 지시한 의사의 성명.

- 이후 운영자는 주치의가 처방한 지표를 LIS에 입력하고 생성된 주문을 LIS에 저장합니다.

2. 실무적인 부분

City Clinical Hospital No. 40은 1966년에 개원했으며 현재 병원, 산부인과 병원, 산전 진료소, 아동 및 성인 진료소를 포함하는 니즈니 노브고로드의 유일한 종합 의료 단지를 대표합니다. 전문의의 고급 교육 및 전문 재교육 센터인 니즈니 노브고로드 주립 의학 아카데미(Nizhny Novgorod State Medical Academy)는 개원 이후 병원을 기반으로 운영되고 있는 외과부의 주요 임상 기반입니다. 40번 병원의 기능적 특징은 응급 상황에서 거의 모든 병리학적인 환자를 24시간 내내 수용한다는 것입니다. 구급차는 매일 100명 이상의 환자를 이송합니다.

병원과 그 구조 부서는 환자에게 적시에 지원하고 고품질의 치료를 제공하는 데 필요한 모든 조건을 만들었습니다. 이곳에서는 전통적인 방법을 자신있게 사용하고 개선하며 최신 의료 기술을 적극적으로 도입합니다. 현대 진단 장비는 모든 곳에서 사용되고 있습니다. 지난 2년 동안 의료 현대화 프로그램의 일환으로 병원은 현대 내시경, 검사실 및 초음파 진단 장비를 포함하여 216개 의료 장비를 도입하여 간췌장학, 대장항문학 및 대장항문학에서 보다 복잡한 개입을 수행할 수 있게 되었습니다. 정맥학.

최고의 전문가들이 러시아 및 국제 수준의 전문 세미나, 컨퍼런스, 심포지엄에 적극적으로 참여합니다. 실험실 임상 생체재료

시립병원 제40호는 현대 과학 발전과 기술이 실제로 적용되는 광범위한 임상 기지입니다. 여기에서는 니즈니노브고로드 주립 의과대학 전문가의 고급 교육 및 전문 재교육 센터의 외과부와 오랫동안 공동 작업을 성공적으로 수행해 왔습니다. 조직자인 Igor Leonidovich Rotkov 교수는 거의 모든 병원의 외과 의사가 참석한 외과 학교의 창립자가 되었으며 오늘날에도 축적된 경험을 계속 발전시켜 새로운 개발과 기술을 도입하고 있습니다. 병원을 기반으로 도시 정맥학 센터가 만들어졌습니다. 수십 년 동안 소아외과에는 니즈니 노브고로드 소아과 연구소의 분과로서 소아 위장병학 과학 부서가 있었습니다. 산부인과 병원을 기반으로 의사의 고급 교육과 NSMA 학생 교육을 위한 산부인과 부서가 있습니다. 여기에서는 러시아 여러 지역의 전문가들이 기술을 향상시킵니다. 현직 과학자와 병원 의사의 공동 작업은 그들의 기술 성장에 기여하고 다양한 의학 분야의 혁신을 통해 환자 치료에서 독특한 결과를 얻을 수 있습니다.

시립임상병원 제40호 업무결과를 바탕으로 박사학위논문 9편, 후보논문 29편이 옹호되었습니다. 병원 전문가가 개발한 수술, 진단 및 실용신안 방법에 대해 70개 이상의 저작권 인증서와 특허를 받았습니다.

의사팀의 성과는 2012년 니즈니 노브고로드 시 의학 분야 상을 수상하는 등 높은 평가를 받았습니다. 이 작업은 수술의 가장 시급하고 복잡한 문제 중 하나인 하지의 정맥혈전증 치료, 지난 5년간의 관찰 기간 동안 다음과 같은 상황에서 정맥혈전증 환자에게 응급 및 계획된 수술 치료를 제공하는 데 전념하고 있습니다. 국가 예산 의료 기관 "시립 임상 병원 No. 40"을 기반으로 한 시 정맥학 센터.

병원의 일부인 산부인과 병원은 205개의 병상을 갖추고 있으며 니즈니노브고로드 지역에서 가장 큰 규모입니다. 현재 이곳은 매년 4,500~5,000명의 출산을 받아들이는 지역 주산기 센터 역할을 하고 있습니다. 산부인과 전문의가 수행하는 모든 업무는 유산 및 후기 임신 사례의 감소, 자연분만을 달성하고 신생아의 생존율을 향상시키는 것을 목표로 합니다.

2010년 1월부터 성인 진료소 내에서 지역 수준에서 최고로 인정받는 건강 센터가 성공적으로 운영되고 있습니다. 그의 업무 경험은 전 러시아 포럼 센터장이 "건강한 국가는 러시아 번영의 기초입니다."라고 발표했습니다.

2012년에는 오지의 의료 접근성을 높이기 위해 일반의 진료실을 신설해 성인클리닉 구조 내에서 성공적으로 운영됐다.

의사, 간호사, 실험실 조교, 질서, 기술 직원을 포함하여 천 명 이상의 기관 직원이 열심히 일하고 배려하며 따뜻함을 바탕으로 국가 예산 기관 직원의 특징인 인본주의와 자비의 분위기를 조성합니다. 40호.

인턴십 기간 동안 생체재료를 접수하고 등록하는 전 과정을 마스터하였습니다.

1. 생체재료 및 형태의 접수.

2. 생체재료 연구

3. 얻은 결과를 양식에 기록

4. 테스트 로그에 결과 기록

5. 생체재료의 폐기

결론

생체재료의 접수, 라벨링, 등록 조직에 대한 주요 통제 형태는 주기적인 외부 및 내부 검사입니다. 그러나 이러한 형태의 통제는 효과적이라고 간주될 수 없습니다. 실험실 연구의 이 단계를 통제하는 문제는 오늘날에도 현대 실험실 의학의 가장 심각한 문제 중 하나로 남아 있습니다.

가장 효과적이고 효율적인 단계는 환자의 생물학적 시료를 수집, 운송 및 보관하기 위한 표준 조건을 만드는 것입니다(진공 또는 기타 시스템 사용). 이러한 시스템을 실제로 도입한다고 해서 실험실 연구의 모든 단계에 영향을 미치는 것은 아니며 일반적으로 실험실 작업 조직을 다른 수준으로 끌어올립니다. 이들의 사용은 조직을 촉진하고 분석 전 단계의 표준화를 크게 촉진할 뿐만 아니라 현대 실험실 시스템의 구현에 필요한 조건을 생성합니다. 분석기를 사용할 수 있는 경우 기본 튜브로 사용할 수 있으며 이는 실험실 연구의 분석 단계를 크게 단순화합니다.

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