Helminths igg ifa best. Prístroje a reagenčné súpravy pre ELISA vyrobené v Rusku Kundelsky R.V., Ph.D.

Liečba helmintiázy u detí je mimoriadne dôležitá, pretože dôsledkom môže byť oneskorenie vo fyzickom a duševnom vývoji, patologické procesy vo vnútorných orgánoch a systémoch, dokonca aj smrť. Okrem toho sú napadnutia hlístami veľmi nákazlivé, a preto sa tak ľahko šíria v predškolských a školských zariadeniach. Na základe toho je zrejmé, aká dôležitá je včasná liečba helmintiázy u detí.

Prvé príznaky helmintov u detí

Červy sú oportunistickými činiteľmi ľudského tela, červami, ktorých konečným hostiteľom sú ľudia. Okrem toho vek majiteľa v tejto veci nehrá žiadnu úlohu, u detí aj dospelých pacientov možno pozorovať rôzne typy helmintiázy.

Ako nebezpečná je helmintiáza pre dieťa?

Ako už bolo spomenuté, hlísty u detí môžu spôsobiť vážne choroby a patológie, v dôsledku čoho sa spomaľuje duševný a fyzický vývoj. Možné komplikácie pre každý typ helmintiázy môžu byť úplne odlišné, napríklad:

Preto detské helmintiázy vyžadujú ešte väčšiu pozornosť, včasnú pomoc lekára, dlhodobé pozorovanie špecialistu a prevenciu.

Hlavné príznaky u detí

Príznaky helmintiázy u dieťaťa sa môžu líšiť v závislosti od typu červov:

1. Škrkavky sa u dieťaťa okamžite prejavia alergickou reakciou, horúčkou a nevoľnosťou. Prvé prejavy sú zvyčajne jasné, ale rýchlo miznú. Potom sa môžu objaviť nasledujúce príznaky:

kolika a dysbakterióza a novorodenci;
u detí mladších ako 1 rok bolesť v oblasti pupka, problémy so stolicou, alergie a diatéza;
staršie deti majú problémy so spánkom, nepokojné správanie, nočné mory;
Deti vo veku 3-7 rokov sú charakterizované nevoľnosťou, horúčkou, kašľom, bolesťou brucha a vyrážkou.

2. Enterobiáza, spôsobená pinworms, sa prejavuje neostrým klinickým obrazom. A až po 1 mesiaci si môžete všimnúť nasledujúce príznaky:

u novorodencov zápal, opuch a začervenanie konečníka, odmietanie jedla, plač v noci, nedostatok chuti do jedla;
deti mladšie ako jeden rok majú rovnaké príznaky, ako aj silné svrbenie konečníka v noci (od 23:00 do 1:00), dievčatá trpia zápalom pohlavných orgánov;
u starších detí bolesť bruška pri pupku, poruchy spánku, svrbenie v zadočku.

3. Príznaky toxokarózy je ťažké rozpoznať, okrem nízkej telesnej teploty a alergických reakcií (vyrážka, žihľavka, svrbenie a opuch). Po infekcii sa môže objaviť kašeľ, ktorý následne spôsobí najmä u najmladších pacientov zápal pľúc alebo zápal priedušiek.

Trichinelóza má u novorodencov mierne príznaky, inak sa pozorujú tieto príznaky:

horúčkovitý stav;
opuch tváre;
bolesť svalov;
alergické reakcie;
U detí vo veku 5 rokov a starších sa môžu objaviť zväčšené mandle, slezina, vyrážka a bolesť hrdla.

Najťažšie je diagnostikovať príznaky helmintiázy u detí vo veku 2 rokov a mladších, pretože dieťa nevie vysvetliť svoje správanie a stav. Preto pri akýchkoľvek atypických prejavoch a správaní dieťaťa je lepšie ukázať lekárovi.

Čo by ste mali urobiť ako prvé?

Červy, ktoré sa našli vo výkaloch dieťaťa, sú najdôležitejším príznakom ochorenia, po ktorom by ste mali okamžite vyhľadať pomoc lekára. Žiadna liečba helmintov nemôže byť úspešná bez správnej diagnózy. Metódy vyšetrenia by v tomto prípade mali byť komplexné, vrátane nasledujúcich postupov:

odoberanie škrabancov z konečníka;
vyšetrenie stolice dieťaťa;
analýza krvi;
svalová biopsia v zriedkavých prípadoch pri podozrení na trichinelózu;
sérologický krvný test;
Röntgen, ultrazvuk, tomografia;
ELISA na detekciu protilátok v krvi.

Liečebné metódy

Liečba helmintiázy u detí by mala byť komplexná, dobre premyslená, predpísaná s presnými dávkami a frekvenciou užívania liekov. Je to spôsobené tým, že na antihelmintický účinok sa používajú lieky s toxickými zložkami, čo znamená, že iracionálne použitie môže viesť k vedľajším účinkom. Okrem toho je doma vhodná ľudová liečba liečivými rastlinami.

Ľudové prostriedky

Moderná liečba takýchto chorôb pre deti ľudovými prostriedkami zahŕňa 4 účinné metódy:

Akýkoľvek spôsob domácej liečby je potrebné vopred prediskutovať s lekárom. Treba pamätať na to, že bylinky a ľudové lieky majú kontraindikácie vo forme individuálnej neznášanlivosti.

Medikamentózna liečba

Pri enterobiáze a askarióze sa zvyčajne používajú lieky ako Pyrantel a Mebendazol. Užívanie Pyrantelu je vhodné v dávke 10 mg látky na kilogram hmotnosti u škrkaviek a 5 mg/kg u škrkaviek. Mebendazol sa užíva dvakrát denne, 50 mg, u detí vo veku 2-3 rokov tri dni po sebe, dvakrát denne, 100 mg tri dni po sebe u detí nad 3 roky, po 3 týždňoch je liečba opakované.
Pri toxokaróze sa Mebendazol predpisuje v inej dávke - pre deti vo veku 2 rokov a staršie 100 mg dvakrát denne počas 14-10 dní.
Trichinelóza sa lieči mebendazolom 5 mg na kilogram hmotnosti, potom sa dávka rozdelí na tri dávky denne. Priebeh liečby je 1 týždeň pod prísnym lekárskym dohľadom.

Prevencia helmintiáz

umývanie rúk ihneď po kontakte so zvieratami, po odchode von a v pieskoviskách, na toalete a pred jedlom;
jesť iba čisté potraviny;
správne vykonané tepelné ošetrenie mäsa a rybích výrobkov;
pitie prevarenej vody;
dodržiavanie osobnej hygieny a hygieny;
pravidelné odčervovanie domácich zvierat;
vykonávanie preventívneho odčervovania u detí vo veku 2 rokov a starších.

Krvný test na toxokaru

Charakteristiky ľudskej infekcie toxokarózou

Nosičmi nákazy sú psy, menej často mačky. Vajíčka toxokara sa šíria vo výkaloch túlavých psov. Akonáhle sú na zemi, vo vode alebo na srsti zvieraťa, sú zavádzané do zdravého tela rôznymi spôsobmi.

Reakcia na vniknutie cudzej osoby

Z lekárskych štatistík je známe, že dospelí majú menšiu pravdepodobnosť, že sa nakazia toxokarózou, pokiaľ ich povolanie nie je ohrozené. Deti majú oveľa väčšiu pravdepodobnosť, že dostanú infekciu.

Najčastejšie príznaky toxokarózy:

Horúčka bez príznakov akejkoľvek choroby.
Zvýšenie teploty.
Zvyšujúca sa a miznúca bolesť v hlave alebo žalúdku.
Vzhľad kožnej vyrážky, ktorú nemožno odstrániť.
Opuch tváre.
Zvýšenie hladiny eozinofilov v krvi zistené počas všeobecnej analýzy.

Na stanovenie presnej diagnózy je predpísaný imunologický test na toxokaru. Prítomnosť proteínových zlúčenín v krvi, ktoré nesú genetickú informáciu helminta (antigény), provokuje imunitný systém k produkcii protilátok triedy igg. Toto je prvý príznak infekcie toxokarózou.

Predbežná diagnóza

Počiatočné štádium anamnézy pacienta je kolektívne. Pred odoslaním pacienta na krvný test na toxokarózu je potrebné študovať pozadie ochorenia a vykonať predbežné vyšetrenie.

Primárna diagnóza:

Štúdium priťažujúcich okolností, ktoré by mohli vyvolať infekciu – špecifická práca so zvieratami alebo prítomnosť domáceho maznáčika, výkopové práce v potenciálne nebezpečnej oblasti, hranie detí v priestoroch na venčenie psov.
Fyzikálne vyšetrenie pacienta. Vyšetrenie kože na subkutánnu inváziu Toxocara, očné viečka a očné buľvy, palpácia.
Predpísanie kompletného krvného testu. Počas infekcie toxokarózou je charakteristický významný nárast niektorých ukazovateľov - eozinofily (70–80%), lymfocyty, ESR. Zatiaľ čo hladina hemoglobínu výrazne klesá.
Odber vzoriek pečene. Pri ťažkej invázii je ovplyvnené zaťaženie pečene, čo sa prejavuje silným skokom v bilirubíne.

Priame potvrdenie napadnutia toxocarou nie je možné pomocou konvenčných testov (krv, koprogram, náter). Duodenálne vyšetrenie je tiež neinformatívne, pretože je ťažké vzhľadom na migračný charakter lariev.

Po obdržaní výsledkov predbežného vyšetrenia naznačujúceho možnú infekciu toxokarózou a odlíšení predpokladanej diagnózy od chorôb s podobnými príznakmi je pacientovi predpísaný test ELISA na toxokarózu.

Prepojený imunosorbentový test

Hlavným cieľom tejto štúdie je potvrdiť prítomnosť Toxocara v ľudskom tele. Protilátky proti týmto helmintom sa nachádzajú v krvnej plazme, takže sa odoberá zo žily.

Test Toxocara vyžaduje určitú prípravu:

Deň pred zákrokom nejedzte mastné alebo ťažké jedlá.
Počas dňa pred návštevou laboratória nepite sladké, sýtené ani alkoholické nápoje.
Odoberte vzorky na prázdny žalúdok.
Neužívajte lieky v predchádzajúci deň a v deň, na ktorý je naplánovaný test.

Je potrebné vziať do úvahy, že tento veľmi informatívny spôsob identifikácie invázie môže byť ovplyvnený určitými okolnosťami. Falošne pozitívny výsledok sa môže vyskytnúť, ak má pacient:

Onkologické ochorenia.
Pľúcna tuberkulóza.
Závažné patológie pečene.
Autoimunitný syndróm.
Antifosfolipidový syndróm.
Tehotenstvo.

V tomto prípade nebude možné získať 100 % potvrdzujúcu analýzu, pretože za vyššie uvedených okolností obranný systém produkuje aj imunoglobulíny (protilátky). Je potrebné vykonať ďalšiu diagnostiku a odlíšiť toxokarózu od uvedených faktorov.

Koncentrácia imunoglobulínov (titer) triedy IgG dosahuje maximálnu možnú hodnotu 2-3 mesiace po začiatku invázie. Čím závažnejšia je infekcia, tým vyšší je tento ukazovateľ.

Výsledky ELISA

Na stanovenie diagnózy sa dôkladne študuje enzýmový imunotest a získané výsledky sa porovnávajú s referenčnými hodnotami. Titer protilátok 1:100 s indexom pozitivity nižším ako 0,9 sa považuje za normálny.

Číselné hodnoty titrov

Získané výsledky môžu byť negatívne, pozitívne, slabo pozitívne alebo sporné. Počet AT titrov závisí od závažnosti invázie a od toho, ako dlho k nej došlo.

Prepis analýzy:

AT titer do 1:100 – výsledok negatívny. V tele pacienta sa nenašli žiadne larvy Toxocara.
AT titer do 1:400 je slabo pozitívny výsledok. Pacient má slabú inváziu alebo sa u neho vyvinie očná forma toxokarózy. V niektorých prípadoch indikátor indikuje nedávnu infekciu.
AT titer do 1:600 – výsledok je pozitívny. Osoba trpí klinickou formou helmintiázy, ktorá, ak sa zistí, vyžaduje okamžitú liečbu.
AT titer do 1:800 – výsledok je pozitívny. Hovorí o ťažkej invázii progresívnej povahy a vysokej pravdepodobnosti vzniku patologického procesu vnútorných orgánov.

Štúdie ELISA až na zriedkavé výnimky odhaľujú pokročilú formu invázie s prímesou helmintiázy iného pôvodu. V tomto prípade môžu byť celkové protilátky vyššie ako 1:800.

Miera pozitivity

Pri použití enzýmového imunotestu na toxokarózu s titrom 1:400 – 1:600 na odlíšenie invázie od vedľajších faktorov sa získané ukazovatele porovnávajú s referenčnou hodnotou. Rozdiel medzi týmito číslami sa zvyčajne nazýva index alebo koeficient pozitivity.

Vo forme ELISA je zvyčajne jeden indikátor oproti druhému. Prvá je norma, druhá môže znamenať:

Do 0,9 – výsledok je negatívny. Neboli nájdené žiadne larvy Toxocara.
0,9-1,1 – výsledok je pochybný. V tomto prípade je predpísaná opakovaná diagnostika.
1,1-2,2 – výsledok je mierne pozitívny. Osoba je nosičom so slabou inváziou.
2,2-4,2 – výsledok je pozitívny. Toxokaróza strednej závažnosti sa vyvíja pomerne dlho.
Nad 4,4 – výsledok indikuje vrchol hlístového zamorenia alebo nedávnej helmintiázy.

CP s výsledkom 4,4 a zisteným zvýšením eozinofílie o 10 % môže naznačovať rozvoj očnej formy toxokarózy a prítomnosť protilátok proti skríženej invázii, celkovo na toxokarózu.

Imunitná reakcia a optická hustota protilátok (miera pozitivity) závisia od stupňa infekcie Toxocara a ich lokalizácie. Najnižšie ukazovatele titra a CP nám umožňujú len predpokladať neprítomnosť helmintov, ale nie potvrdiť to.

Uvedené informácie nemôžu slúžiť ako zdroj pre samodiagnostiku alebo samoliečbu. Výsledky ELISA v kombinácii s predbežným vyšetrením môžu špecialistovi povedať iba o prítomnosti problému. V laboratóriu Invitro sa diagnostika krvi vykonáva s vysokou presnosťou, výsledok analýzy je doplnený komentármi odborníkov o miere pozitivity. To výrazne pomáha lekárovi pri presnejšej diagnóze.

Počet definícií 96 (48 v duplikátoch)
Pracovný formát tablety: pruhovaný 12x8, rozbitý na 1 otvor.
Citlivosť: 1,5 U/ml.
Rozsah merania: 0-400 U/ml.
Objem testovanej vzorky nie je väčší ako 25 µl.
Štandardizácia podmienok na uskutočnenie enzymatickej reakcie s chromogénom v termostatickej trepačke pri 37ºC.
Obsah sady:
1. Pruhovaná platňa 12 x 8 jamiek, pripravená na použitie - 1 ks.
2. Kalibračné vzorky pripravené na použitie (0-400 U/ml) zafarbené rôznym stupňom intenzity v závislosti od koncentrácie - 6 fliaš.
3. Kontrolná vzorka - 1 fľaša.
4. Jednozložkový konjugát, pripravený na použitie, nevyžaduje riedenie - 1 fľaša.
5. Roztok na riedenie sér - 1 fľaša.
6. Chromogénny substrát, jednozložkový - roztok tetrametylbesidínu plus (TMB+), pripravený na použitie, nevyžaduje riedenie - 1 fľaša.
7. Fosfátom pufrovaný fyziologický roztok s Tweenom – 2 fľaše.
8. Zastavte činidlo, pripravené na použitie - 1 fľaša.
9. Fólia na utesnenie tablety - 1 ks.
10. Šablóna na zostavenie kalibračného grafu - 1 ks.
11. Reagenčný kúpeľ - 2 ks.
12. Pipetovacie špičky pre 5-200 µl - 16 ks.
Tablet je zabalený v teakovom vrecku na zips.
Stabilita pracovného roztoku FST-T je minimálne 5 dní pri teplote +2...8°C.
Súpravu skladujte pri teplote +2...8°C. Čas použiteľnosti - 1 rok od dátumu výroby.
Registrovaný v Roszdravnadzor.

DROGY

HODNOTENIE NOVÉHO TESTOVACIEHO SYSTÉMU ELISA

"Rotavírus-antigén-ELISA-NAJLEPŠIE"

12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.

1 Federálna štátna rozpočtová inštitúcia Štátne vedecké centrum VB "Vector" Rospotrebnadzor, obec Koltsovo, región Novosibirsk;

2 Ústav chemickej biológie a základnej medicíny, Novosibirsk;

3 Štátny ústav pre štandardizáciu a kontrolu medicínskych biologických prípravkov pomenovaný po. L.A. Tarasevičag Moskva

Prezentované sú výsledky testov citlivosti, špecifickosti a reprodukovateľnosti novej sady reagencií „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“ vyvinutej v JSC „Vector-Best“ (Novosibirsk). Získané údaje nám umožňujú predpovedať diagnostickú spoľahlivosť výsledkov pri použití tohto testovacieho systému na detekciu rotavírusového antigénu skupiny A v klinickom materiáli.

Kľúčové slová: testovací systém ELISA, účinnosť, rotavírus A

Rotavírusy skupiny A (čeľaď Reoviridae, rod Rotavirus) sú celosvetovo najčastejšou príčinou závažnej gastroenteritídy u malých detí. Často ochorejú aj dospelí s oslabeným imunitným systémom. Rotavírusová infekcia (RVI) je vysoko nákazlivé ochorenie s viacerými cestami šírenia. Zdrojom infekcie je osoba s manifestnou alebo asymptomatickou formou ochorenia, ako aj nosič vírusu. U detí a dospelých sa RVI môže prejaviť vo forme sporadických prípadov, lokálnych skupinových ochorení, prepuknutia a je rozšírená. Fekálno-orálny mechanizmus prenosu tejto infekcie sa realizuje potravou (mlieko a mliečne výrobky, detská výživa), vodou a kontaktnými cestami v domácnosti.

Stanovenie diagnózy rotavírusovej gastroenteritídy na základe klinického obrazu, najmä so sporadickým výskytom, je určitým problémom, pretože symptómy charakteristické pre túto infekciu sa málo líšia od symptómov iných akútnych črevných infekcií (AEI) rôznej etiológie. Diferenciálna diagnostika u pacientov s rotavírusovou gastroenteritídou sa vykonáva tak pri potravinových toxických infekciách, ako aj pri iných vírusových infekciách (norovírusy, astrovírusy, adenovírusy, koronavírusy, enterovírusy Coxsackie a ECHO) a bakteriálnych (salmonelóza, dyzentéria, cholera, yersinióza, oportúnne mikroorganizmy). Bohužiaľ, nie všetky špecializované zdravotnícke zariadenia v Ruskej federácii vykonávajú diagnostiku rotavírusovej infekcie.

Diagnostické metódy pre RVI sú zamerané na detekciu celých viriónov, vírusového antigénu alebo vírusovo špecifickej RNA vo výkaloch. Sľubným prístupom k priamej detekcii vírusov v klinickom materiáli aj v objektoch životného prostredia je metóda reverznej transkripcie-polymerázovej reťazovej reakcie (RT-PCR). V posledných rokoch boli na základe moderného vedeckého vývoja vytvorené testovacie systémy s kombináciou rôznych metód na detekciu rotavírusov: multiplexná PCR s hybridizačno-fluorescenčnou detekciou produktov amplifikácie „by end point“; endpoint immuno-PCR (IPCR) s detekciou v reálnom čase; kvantitatívna RT-PCR s detekciou v reálnom čase. Výskumné laboratóriá používajú elektrónovú mikroskopiu na rýchlu identifikáciu rotavírusov. Všetky vyššie uvedené metódy sú však dosť náročné na prácu a vyžadujú drahé vybavenie a vysokokvalifikovaný personál. Preto sa pri vykonávaní laboratórnej diagnostiky v nemocniciach a ambulantných zariadeniach uprednostňujú metódy založené na detekcii vírusového antigénu v stolici pomocou enzýmovej imunoanalýzy (ELISA) s mono- a polyponálnymi protilátkami proti rotavírusom. Táto metóda je dostupná pre praktické laboratóriá, ľahko sa nastavuje a umožňuje rýchle získanie výsledkov.

Účelom tejto práce je študovať diagnostickú účinnosť novej sady činidiel „Rotavírus-antigén-ELISA-BEST“ vyvinutej v JSC „Vector-Best“, Novosibirsk.

^September-december

Materiály a metódy

Študijný materiál zahŕňal vzorky výkalov od malých detí s diagnózou akútnej črevnej infekcie a bez klinických prejavov črevnej infekcie, ktoré sa podrobili ústavnej liečbe na oddeleniach črevných infekcií a respiračných infekcií Detskej mestskej klinickej nemocnice č. 3 v Novosibirsku. Vzorky výkalov boli odoberané do jednorazových sterilných plastových nádob v objeme 2-3 ml pri prijatí pacientov na nemocničné oddelenie a skladované pri -20 °C počas 15 dní. Dlhšie skladovanie materiálu sa uskutočnilo pri -70 °C.

V tejto práci bol použitý panel 104 vzoriek stolice, predtým testovaných na prítomnosť patogénov ACI. Z nich:

30 vzoriek, v ktorých boli pomocou ELISA a RT-PCR detegované iba rotavírusy skupiny A; genotypizácia metódou RT-PCR ukázala, že vzorky stolice obsahovali rotavírusy genotypu PG1 (18 vzoriek), PG2 (4 vzorky), PG3 (3 vzorky), PG4 (2 vzorky), PG4 (1 vzorka), PG9 (1 vzorka) PG3 (1 vzorka);

14 vzoriek, v ktorých boli pomocou RT-PCR detegované len norovírusy druhého genotypu, čo bolo potvrdené určením nukleotidovej sekvencie 5“ oblasti kapsidového génu lokalizovaného na genóme norovírusu v oblasti 5085-5485 h.;

15 vzoriek, v ktorých boli pomocou RT-PCR identifikované iba astrovírusy, čo bolo potvrdené určením nukleotidovej sekvencie 5" oblasti kapsidového génu lokalizovaného na genóme astrovírusu v oblasti 4526 - 4955 nt; 15 vzoriek, v ktorých boli iba adenovírusy identifikované pomocou PCR;

30 vzoriek stolice (kontrola) od detí bez klinických prejavov črevnej infekcie hospitalizovaných na respiračnom oddelení nemocnice; Predbežná analýza neidentifikovala vyššie uvedené vírusové patogény v týchto vzorkách.

Testovanie vzoriek na prítomnosť alebo neprítomnosť rota-, noro-, astro- a adenovírusov sa uskutočnilo metódou RT-PCR s použitím komerčných súprav registrovaných v Ruskej federácii „AmpliSens No. virus 1, 2 genotypes - 306/322“ , "AmpliSens Astrovirus -165", "AmpliSens Adenovirus - 462", "AmpliSens Rotavirus - 290" (vyrobené Centrálnym výskumným ústavom epidemiológie, Ruská federácia). Vzorky sa skúmali v súlade s pokynmi na použitie príslušných reagenčných súprav počas dátumu exspirácie. Vzorky pozitívne na rotavírus boli genotypizované pomocou RT-PCR. Stanovenie prítomnosti alebo neprítomnosti rotavírusového antigénu sa tiež uskutočnilo pomocou ELISA s použitím komerčného testovacieho systému IDEIA™ Rotavirus (DakoCytomation, UK) v súlade s pokynmi pre súpravu.

Pri testovaní reagenčnej súpravy „Rota-virus-antigen-ELISA-BEST“ boli všetky vyššie uvedené vzorky (104) zašifrované a testované trikrát pomocou testovacej súpravy. Po dokončení testovania sa vzorky dešifrovali a výsledky sa analyzovali.

Výsledky a diskusia

Citlivosť reagenčnej súpravy Rotavirus-antigén-ELISA-BEST bola hodnotená počtom zhôd pozitívnych výsledkov (v %) testovacích vzoriek s použitím testovaného testovacieho systému a referenčných liečiv. Zároveň sa zistilo, že pri použití súpravy Rotavirus-antigen-ELISA-BEST reagent kit bolo všetkých 30 vzoriek s potvrdenou prítomnosťou rotavírusu A pozitívnych (tabuľka 1). V dôsledku toho bola citlivosť testovacej sady činidiel pri detekcii rotavírusov A 100 %. Je potrebné poznamenať, že panel zahŕňal vzorky so siedmimi rôznymi genotypmi rotavírusov a všetky boli úspešne detegované reagenčnou súpravou „Rota vírus rus - antigén - AND FA-B EST“.

Špecifickosť testovacieho systému bola hodnotená počtom zhôd negatívnych výsledkov (v %) testovacích vzoriek s použitím testovaného testovacieho systému s tými, ktoré prešli predbežnými štúdiami. Na posúdenie špecifickosti sa do panelu použilo 30 vzoriek, v ktorých neboli identifikované vírusové patogény, ako aj 14 vzoriek, v ktorých sa metódou RT-PCR detegovali len norovírusy druhého genotypu, 15 vzoriek, v ktorých sa metódou RT-PCR detekované iba astrovírusy; 15 vzoriek, v ktorých boli pomocou PCR detegované iba adenovírusy. Zistilo sa, že v 69 zo 74 negatívnych vzoriek hodnoty optickej hustoty pri detekcii prítomnosti rotavírusu A reagenčnou súpravou Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST neprekročili hodnoty pozadia, teda hodnoty získané ako výsledok merania optickej hustoty v kontrolných negatívnych vzorkách. Dve vzorky obsahujúce astrovírusy, jedna vzorka obsahujúca norovírus druhého genotypu, jedna vzorka obsahujúca adenovírus a dve vzorky, v ktorých nebol detegovaný žiadny z vyššie uvedených vírusových patogénov, preukázali pozitívne hodnoty optickej hustoty. Treba poznamenať, že vo vzorkách, v ktorých predtým nebol zistený žiadny z vírusových patogénov, boli pozitívne signály zaznamenané iba v jednej z opakovaných štúdií (tabuľka 2). Špecifickosť súpravy Rotavirus-antigén-ELISA-BEST reagens bola teda 93,2 %.

Počas testov bola hodnotená reprodukovateľnosť výsledkov získaných pri použití testovacej sady reagencií „Rotavírus-antigén-ELISA-BEST“ na klinickom materiáli – všetky vzorky boli testované trikrát v rôznych experimentoch, aby sa určila odchýlka vo výsledkoch. Takmer vo všetkých prípadoch sa dosiahli podobné výsledky: testovací systém detekoval všetky negatívne aj pozitívne vzorky rovnako. Výnimkou boli dve vzorky, v ktorých predtým nebol identifikovaný žiadny z vírusových patogénov: v jednom z replikátov pre obe vzorky hodnoty optickej hustoty prekročili OPcrit. Treba poznamenať, že prebytok bol nevýznamný (tabuľka 2). Reprodukovateľnosť výsledkov teda bola 98,8 %.

Výsledky testov ukázali, že testovaný súbor činidiel „Rotavírus-antigén-ELISA-BEST“ je svojou diagnostickou účinnosťou – špecifickosťou, citlivosťou a reprodukovateľnosťou – porovnateľný s tými, ktoré sú na diagnostiku dostupné v Ruskej federácii.

chemické testovacie systémy, čo umožňuje predpovedať diagnostickú spoľahlivosť výsledkov pri použití študovaného súboru reagencií „Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST“ na detekciu rotavírusového antigénu skupiny A v klinickom materiáli.

Literatúra

1. Bogomolov B.P. // "Infekčné choroby: núdzová diagnostika, liečba, prevencia." - M., New Diamed. - 2007.

2. Vasiliev B.Ya., Vasilyeva R.I., Lobzin Yu.V.// „Akútne črevné ochorenia. Rotavírusy a rotavírusová infekcia." - Petrohrad, Lan. - 2000.

3. Zhirakovskaya E.V., Tikunov A.Yu., Bodnev O.A., et al.// “BIOprípravky”. - 2008 - č. 2. - str. 15 - 18.

4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.S. a ďalšie // JMEI - 2008 - č. 4. - S. 12 - 16.

5. Ignatyuk T.E., Golutvin I.A., Nasikan N.S. a kol. // „Otázky virológie“. - 2003. - t. 48. - č. 6. - s. 1721.

6. Novíková N.A., Fedorová O.F., Epifanová N.V., Chup-rová A.B. // „Otázky virológie“. - 2007. - t.52. -č.3 - s. 19-23.

7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A. a kol.//

"Infekčné choroby". - 2004. - ročník 2. - č. 4. - str. 85 -91.

8. Podkolzin A.T., Fenske E.B., Abramycheva N.Yu., et al.// “Terapeutický archív”. - 2007. - t. 79. - č. 11. - s. 10-16.

9. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V. a kol. // „Epidemiológia a infekčné choroby“. -2004.-č.6.-s. 17-20.

10. Sergevnin V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., et al. // Hygiena a sanitácia. - 2007. - č. 1. - str. 56 -58.

11. Arcangeletti M. S., De Conto E., Pinardi F., a kol. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005. -V. 76(3). - S. 165 -170.

12. Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., a kol. // Epidemiol. Infikovať. - 2008. V. 136 ods. - S. 399-405.

13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., al. //J. Virol. Metódy. -2006. - V. 137 (2). - S. 280 - 286.

14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., a kol. //J. Clin. Microbiol. - 2008. V. 46 (2). - S. 462 - 469.

15. Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F., a kol. //Appl. Environ. Microbiol. - 2008. - V. 74 (7). - S. 2069 - 2078.

16. Stockman L.J., Staat M.A., Holloway M., a kol. // J. Clin. Microbiol. - 2008. - V. 46 (5). - S. 1842 - 1843.

Hodnotenie citlivosti a špecifickosti reagenčnej súpravy „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“

stôl 1

Počet vzoriek Výsledky detekcie s referenčnými liekmi IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Výsledky detekcie pomocou súpravy „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“

1. 30 30 0 0 0 30

2. 15 0 15 0 0 2

3. 14 0 0 14 0 1

4. 15 0 0 0 15 1

Posúdenie špecifickosti reagenčnej súpravy „Rotavírus-antigén-ELISA-BEST>-

tabuľka 2

PCR AmpliSense

rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus

0,443 1,306 0,676 0,418

Rotavirus-antigen-ELISA-BEST JSC "Vector-Best"

OPCrit OPCrit OPCrit

0,250 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939

> 4,000 > 4,000 > 4,000

£ september

decembra 2009

AmpliSense

rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus astrovírus astrovírus astrovírus astrovírus astrovírus

IDEIA rotavírus DakoCytomation OPCrit = 0,150

0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040

rotavírus-

OPCrit 0,250

> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972

> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800

> 4,000 3,981

> 4,000 3,713

> 4,000 4.000

> 4,000 3,989

> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062

antigén-ELISA-BEST "Vektorový-naj"

OPCrit OPCrit 0,263 0,251

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,821 3,899

> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871

> 4,000 3,929

> 4,000 3,881 3,884 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,995

> 4,000 > 4,000

> 4,000 > 4,000 3,837 3,839

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,986

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,998

> 4,000 > 4,000

> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052

astrovírus astrovírus astrovírus astrovírus astrovírus astrovírus astrovírus astrovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus norovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus

IDEIA rotavírus DakoCytomation OIIKpHT = 0,150

0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039

PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO “BeKTop-EecT”

OnKpHT OnKpHT OIIKpHT

0,250 0,263 0,251

0,115 0,075 0,082

0,053 0,046 0,058

0,233 0,198 0,189

0,144 0,105 0,128

0,243 0,062 0,073

0,043 0,040 0,046

0,069 0,043 0,041

0,143 0,044 0,058

0,220 0,206 0,230

3,475 2,577 2,405

0,223 0,247 0,240

0,232 0,236 0,231

0,048 0,042 0,041

0,121 0,085 0,093

0,132 0,111 0,174

0,122 0,052 0,063

0,061 0,044 0,054

0,073 0,035 0,048

0,089 0,046 0,046

0,047 0,043 0,044

0,041 0,039 0,044

0,083 0,046 0,038

0,168 0,074 0,097

0,247 0,118 0,099

0,248 0,251 0,242

0,243 0,259 0,250

0,054 0,048 0,055

0,048 0,040 0,037

0,058 0,045 0,046

0,053 0,045 0,049

0,069 0,058 0,065

0,912 0,344 0,379

0,089 0,037 0,042

decembra 2009

PCR AmpliSense

adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny negatívny

IDEIA rotavírus DakoCytomation OPCrit = 0,150

0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036

Rotavírus - antigén - ELISA-BEST JSC "Vector-Best"

OPCrit O P Crit OPCrit

0,250 0,263 0,251

0,105 0,042 0,043

0,046 0,143 0,133

0,227 0,045 0,042

0,065 0,068 0,054

0,125 0,039 0,042

0,196 0,191 0,182

0,209 0,170 0,154

0,316 0,071 0,073

0,058 0,043 0,049

0,171 0,056 0,061

0,049 0,060 0,064

0,047 0,062 0,065

0,058 0,047 0,066

0,073 0,072 0,066

0,188 0,120 0,109

0,180 0,074 0,072

0,057 0,063 0,058

0,047 0,060 0,047

0,162 0,146 0,143

0,248 0,248 0,260

0,063 0,066 0,104

0,247 0,223 0,251

0,054 0,053 0,070

0,242 0,240 0,248

0,073 0,061 0,103

0,066 0,065 0,064

0,108 0,123 0,192

0,072 0,067 0,071

0,079 0,079 0,087

0,104 0,079 0,164

0,169 0,150 0,162

0,140 0,166 0,146

0,114 0,133 0,131

Poprední ruskí výrobcovia v segmente reagenčných súprav na diagnostiku infekcií: - Vector-Best CJSC, Novosibirsk; - NPO Diagnostic Systems LLC, Nižný Novgorod; - JSC "Ekolab", Elektrogorsk MO. V oblasti reagenčných súprav na diagnostiku neinfekčných chorôb a fyziologických stavov: - Alkor-Bio LLC, St. Petersburg; - CJSC „Vector-Best“, Novosibirsk; - Hema-Medica LLC, Moskva. V segmente činidiel na laboratórnu diagnostiku alergií: - Alkor-Bio LLC, Petrohrad; - CJSC „Vector-Best“, Novosibirsk; - NPO Immunotex LLC, Stavropol. Výroba laboratórnej techniky: - Picon LLC, Moskva

Posúdenie stupňa možnej substitúcie dovozu na základe nomenklatúry testov Nomenklatúra analytov, jednotky. Schválené na použitie v Ruskej federácii Vyrobené v Ruskej federácii Stupeň možnej dovoznej substitúcie Markery infekčných chorôb % Markery neinfekčných chorôb a indikátory fyziologických stavov % Markery alergií % Celkom: %

Posúdenie stupňa substitúcie dovozu na základe objemu trhu produktov pre tablety ELISA Trhové segmenty Objem trhu v Ruskej federácii, milióny rubľov. Objem predaja domácich výrobcov, milióny rubľov. Podiel substitúcie dovozu Markery infekčných chorôb % Markery neprenosných chorôb a ukazovatele fyziologických stavov % Markery alergií % Vybavenie50051 % Spolu: %

Posúdenie stupňa substitúcie dovozu na základe objemu trhu s výrobkami pre imunochemické metódy vo všeobecnosti Segmenty trhu Objem trhu v Ruskej federácii, milióny rubľov. Objem predaja domácich výrobcov, milióny rubľov. Podiel substitúcie dovozu Markery infekčných chorôb % Markery neprenosných chorôb a ukazovatele fyziologických stavov % Markery alergií % Vybavenie % Spolu: %

Problémy domácich výrobcov v priemysle: Metóda ELISA sa stáva zastaranou. Dochádza k postupnej výmene domácich IF reagencií za dovážané chemiluminiscenčné; Existujúci systém verejného obstarávania stimuluje buď nákup najlacnejších tovarov alebo dovážaných produktov s jedinečnými vlastnosťami; Jedným z hlavných dôvodov nedostatočného rozvoja domácich výrobcov automatických zariadení a lokalizácie výroby dovážaných výrobkov je colno-administratívna bariéra; Hlavným problémom poslednej doby je kolaps systému štátnej registrácie nových produktov v Bieloruskej republike. Vstup nových produktov na trh sa prakticky zastavil a tí zahraniční výrobcovia, ktorí predtým registrovali dlhé zoznamy, sú naďalej vo výhode pred domácimi; Hlavným dôvodom technologického oneskorenia je neschopnosť získať právo vyrábať výrobky kompatibilné s moderným vybavením; Nízky stupeň konsolidácie domácich výrobcov a neustále cenové vojny medzi sebou neposkytujú príležitosť vyvíjať pokročilé produkty a súťažiť s poprednými hráčmi za rovnakých podmienok, a to aj na zahraničných trhoch.

Návrhy: V rámci FCC zaviesť mimosúťažný postup verejného obstarávania liekov s následným zverejňovaním po jednotlivých položkách. Stanovenie limitov financovania na základe priemernej trhovej ceny prinesie určité výhody domácim výrobcom, obmedzí spotrebu drahých dovážaných činidiel a efektívnejšie kontroluje využívanie rozpočtových prostriedkov; Podporovať konsolidáciu a konsolidáciu domácich výrobcov s cieľom sústrediť zdroje na vývoj moderných produktov a vstúpiť na medzinárodný trh. Nesúťažný postup pri vládnom obstarávaní rýchlo ponechá na trhu len skutočne konkurencieschopné podniky; Vyčleniť vládne finančné prostriedky na stimuláciu, na princípoch verejno-súkromného partnerstva, vývoj škály testov dostatočných na zabezpečenie biologickej bezpečnosti krajiny; Colné výhody by sa mali vzťahovať na komponenty, nie na hotové výrobky; Zosúladiť systém registrácie s európskym, kde sa na základe vyhlásenia o zhode registrujú zdravotnícke pomôcky s nízkou mierou potenciálneho rizika.